摘要:探討陰道脫落細胞學檢查中標本采集,染色及細胞形態進行分析?通過陰道分泌物細胞學檢查,對內分泌檢查,通常用于月經失調?閉經等疾病的診斷與治療參考,對于生殖道腫瘤的防癌普查及癌腫診斷,早期防治有著重要的意義?
關鍵詞:陰道脫落細胞檢查;標本采集;染色;細胞形態
【中圖分類號】R711.73 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-8602(2015)05-0172-02
女性生殖道各器官所覆蓋的上皮主要有兩種?一是鱗狀上皮,主要見于陰道?子宮頸外口等部位;二是柱狀上皮,主要見于輸卵管?子宮內腔?子宮頸管等部位?子宮頸外口鱗狀上皮和柱狀上皮交接處是子宮頸癌的好發部位?通過陰道分泌物細胞學檢查,對于生殖道腫瘤的早期防治有著重要的意義?
1 一般資料
對2014年1月~12月收治的婦產科患者60例,年齡 22~43歲,平均29歲?均為已婚婦女做宮頸刮片進行陰道脫落細胞檢查?
2 標本采集
2.1采集前準備工作 在清潔玻璃片上方刻好號碼,在送檢申請單上亦寫好同一號碼?準備好清潔刮板?刮板可取木制或竹制壓舌板的一半,一端做成半月形?準備好玻璃吸管以采集后穹隆標本?準備固定液:常用固定液有以下三種:①固定液最好用等分量之95%乙醇與乙醚?乙醚容易揮發,瓶口必須塞緊?此固定液細胞染色最為清楚?②95%乙醇固定液,一般用于普查工作?固定時間不要超過30分鐘,固定時間長可影響核的著色?③甲醇固定液?固定液每次用過,必須過濾后再用,以防止玻璃片上沖洗下來的細胞污染,一般固定10分鐘以上即可染色?
2.2采取方法:不同的檢查目的,可選擇不同部位取材?一般采用生理鹽水浸濕的棉拭子于陰道深部或宮頸管口?陰道穹隆后部等處取材?必須在標本干燥前盡快投入固定液內,以防細胞破壞,固定時間不得短于15分鐘?最理想的制片方法是一個患者的涂片單獨固定,以防止細胞標本相互污染[1]?經過巴氏染色?姬姆薩染色或革蘭染色,進行腫瘤細胞篩選或病原微生物檢查?
2.3臨床經驗
2.3.1采取標本前24小時內患者應無性交?盆浴或陰道沖洗?所用器械必須清潔?干燥,不黏附任何化學藥品,如酒精?肥皂水等,亦不可使用任何潤滑劑?
2.3.2取得的標本刮在玻片上時,應向一個方向涂抹,切忌往返,以免損壞細胞;涂片厚薄宜適中,過厚染色不良,并易脫落,過薄細胞稀少,影響診斷?
2.3.3如果盛固定液之器皿中沒有分格或無固定架時,則需在每張玻片上卡一曲別針,以防兩片相粘,損壞標本?
3 常用染色法
3.1簡易快速癌細胞染色法 此法為上海市紡織工業局第二醫院于1958年用于癌細胞檢查,經改進更宜于配制和應用?
3.1.1染液配制 第一液:1液:鹽基湖藍1 g,溶于100 ml水內;2液:高錳酸鉀(AR試劑二級)1 g,溶于100 ml水內?將1?2液分別裝于三角燒瓶中煮沸,溶解后將2液傾入1液混合后再煮沸25分鐘,趨熱過濾即可?第二液:1%伊紅乙醇(85%)溶液?
3.1.2染色步驟 涂片標本經干燥后用甲醇固定10分鐘?標本于第一液內染3~4秒,水洗?放入第二液內3~4秒,水洗后,玻片反面揩干即可鏡檢?
3.2瑞氏-姬姆薩復合染色 瑞氏和姬姆薩兩種染色原理基本相同,而染色又各有優缺點,因此在細胞學檢查中常用兩者復合染色,以取長補短,互相補充?染色結果,胞漿結果,胞漿及其中顆粒與核染色質均勻較滿意?
3.2.1試劑 瑞氏-姬姆薩染液配制法:瑞氏粉 0.38 g,姬姆薩粉0.03 g;甲醇 100 ml?先將瑞氏粉與姬姆薩粉放在清潔?干燥的乳缽里,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解,將已溶解的染料倒入棕色瓶中,未溶解的再加少量甲醇溶解,甲醇全部用完為止?配好的染色液48小時后可以使用,放置越久越好用[2]?pH 6.4~6.8磷酸鹽緩沖液:磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.3 g,磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 0.2 g,蒸餾水 加至1 000 ml,配好后用磷酸溶液校正pH,如無緩沖液也可用新鮮蒸餾水代替?
3.2.2染色步驟 涂片上滴加瑞氏-姬姆薩染色液適量?1分鐘后加緩沖液適量?
4陰道脫落細胞檢查細胞形態
4.1女性生殖道炎癥的細胞形態 女性生殖道炎癥是婦女的常見病?長期?慢性炎癥刺激,又可誘發核異質甚至惡性腫瘤?識別炎癥病變的細胞形態變化,對于診斷與癌癥鑒別都有重要意義?
4.1.1慢性子宮頸炎 為婦女最為常見的疾病?臨床表現為白帶增多,宮頸糜爛或肥大或出現息肉?涂片背景“污濁”,粘液?白細胞?吞噬細胞及細胞碎片較多,上皮細胞可出現各種炎癥變化,如核輕度增大?深染?胞質出現空泡?底層細胞增多,重度也可出現核異質?
4.1.2老年性陰道炎 見于絕經后的老年婦女?涂片中以萎縮型基底層細胞為主,細胞較小?大小不一,胞質變薄,核固縮?深染及碎裂,伴有數量不等的各種炎癥細胞?
4.1.3滴蟲性陰道炎 由滴蟲感染所致?涂片中可見鱗狀上皮各層細胞?青年女性常伴有潰瘍,見較多的底層細胞;老年婦女可見較多的表層細胞,因為陰道滴蟲常促進鱗狀上皮分化成熟?但并不表示雌激素水平的低落和增高?根據感染程度,可見數量多少不等的各種炎癥細胞及滴蟲[3]?
4.2宮頸癌細胞形態 在女性生殖器官的惡性腫瘤中,以宮頸癌最為多見?宮頸癌中又以鱗癌多見,占宮頸癌的95%,其次為腺癌,未分化癌極少見?
4.2.1鱗癌 根據腫瘤細胞分化程度又分高分化鱗癌和低分化鱗癌,以低分化鱗癌最為多見?高分化鱗癌:①癌細胞多散在分布?②癌細胞體積較大,胞質豐富,多數有角化而紅染?③胞核顯著增大,畸形?深染明顯?④癌細胞形態多異,可出現纖維形?蝌蚪形?蜘蛛形,有時可見癌珠?低分化鱗癌:①癌細胞多成群出現?②癌細胞圓形或卵圓形,相當于外底層或中層細胞,分化越差,細胞越小,胞質較少,角化不明顯?③胞核呈不規則圓形或卵圓形,核胞質比明顯增大?
4.2.2腺癌 較少見,約占5%,以高分化腺癌多見?胞體中等大小,大小不一,呈圓形?卵圓形或不規則形?胞質豐富,胞質內含有粘液空泡,可見印戒樣癌細胞?胞核呈圓形?卵圓形或不規則圓形,有輕度至中度畸形,常見巨大核仁?癌細胞分散也可成團脫落,成團的癌細胞極性紊亂,在細胞團周邊部的癌細胞呈柵欄狀排列?
參考文獻
[1] 呂衛國;謝幸.宮頸癌的篩查[J].中國實用婦科與產科雜志.2006.(1):8-9
[2] 羅曉云,嚴子禾,丁月華;陰道分泌物常規檢查方法的改進[J];華北煤炭醫學院學報;2002.(05):580.
[3] 李崇劍;許凱聲.6803例陰道分泌物常規檢查結果分析.上海醫學檢驗雜志.2000.(1):56-56