羅紅霉素注射液的熱穩定性研究

摘要：目的：探討經羥丙基-β-環糊精和 -環糊精為包材制備羅紅霉素注射液的熱穩定性?方法：采用研磨法制備包合物，測定經60℃?65℃?70℃?75℃?80℃?85℃?90℃等不同溫度處理后的羅紅霉素注射液Ⅰ和Ⅱ的含量，采用初均速法預測二者有效期?結果：預測羅紅霉素注射液Ⅰ在常溫狀態下的有效保質期（1.8）要長于羅紅霉素注射液Ⅱ（0.9a）?結論：由常用的羥丙基-β-環糊精包合制備羅紅霉素注射液，能夠滿足臨床應用的需求，可為新制劑的申報提供參考?

關鍵詞：羅紅霉素注射液；羥丙基-β-環糊精； -環糊精；熱穩定性

【中圖分類號】R978.1 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-8602（2015）05-0220-02

羅紅霉素是第二代大環內酯類抗生素，適用于敏感菌株所引起的感染，包括呼吸道?耳鼻喉?生殖系以及皮膚感染，抗菌譜廣，臨床療效顯著[1]?然而，羅紅霉素在水溶液中穩定性較差，直接制成注射液還無法滿足臨床應用的要求，這也在很大程度上限制了該藥物的應用[2]?因此，有必要對羅紅霉素注射液的熱穩定性進行探究，以期能夠為新劑型的研制及臨床應用提供參考?

1資料與方法

1.1實驗材料

本試驗采用羥丙基-β-環糊精為包材制備羅紅霉素注射液Ⅰ，采用 -環糊精為包材制備羅紅霉素注射液Ⅱ，取研磨法，規格均為50mg/5mL，無色澄明液體，pH值為6.2；另選羅紅霉素標準品，甲醇?乙腈（均為色譜純），氨水?磷酸（均為分析純）為試驗藥品?選用的儀器有高效液相色譜儀?數據控超聲波清洗器?電子天平?澄明度測定儀?pH計?超級恒溫水槽等?

1.2方法

1.2.1色譜條件及適用性試驗

本組試驗甲醇-乙腈-0.05mol/L磷酸的體積比為20：44：36，流動相取1.0ml/min流速，進樣量定為20ul，設定檢測波長（取198nm），一次性微孔濾膜過濾?取適量羅紅霉素標準品，經60℃減壓干燥，并用流動相溶解?稀釋?定容，獲得貯存液，濃度為10mg/mL；再取適當稀釋后的標準品溶液，按照羥丙基-β-環糊精處方工藝和 -環糊精處方工藝配置陰性樣品，稀釋后獲取羅紅霉素注射空白輔料Ⅰ和Ⅱ，將其置于90℃恒溫水浴槽內加熱，再次倍數稀釋后獲得高溫破壞樣品Ⅰ和Ⅱ，羅紅霉素含量不受干擾?

1.2.2線性試驗及重復性試驗

在上述色譜條件下，進樣，測定峰面積，進行線性回歸，羅紅霉素在400～1.6384μg/mL，濃度范圍內與峰面積呈良好的線性關系；取高?中?低3個濃度的標準溶液，檢測雜質峰個數?峰面積均一致；取適量已知含量的羅紅霉素注射液Ⅰ?Ⅱ，分成3組，各加入羅紅霉素標準貯備液1?2?3mL，用流動相稀釋?定容后測定平均回收率分別為102.85%?101.15%?101.68%；再取羅紅霉素注射液Ⅰ?Ⅱ，稀釋成高?中?低3個濃度，進樣6次，即進行重復性試驗?

1.2.3注射液熱穩定性試驗

采取初均速法，將獲取的羅紅霉素注射液Ⅰ和Ⅱ分別置于7個超級恒溫水槽內，溫度逐一遞加，而加熱時間逐一遞減，分別為60℃（加熱12h）?65℃（加熱1h）?70℃（加熱10h）?75℃（加熱9h）?80℃（加熱8h）?85℃（加熱7h）?90℃（加熱6h），加熱完成后，迅速取出并用冷水冷卻，置于溫室終止反應?觀察兩種注射液在不同溫度下各樣品的初均速?

2結果

羅紅霉素注射液Ⅰ?Ⅱ各樣品，經流動相稀釋相同倍數后，測得峰面積，結果顯示，外觀性狀?澄明度?pH值均無明顯變化?羅紅霉素注射液Ⅰ樣品隨著溫度的依次遞加，其濃度分別為154.4μg/m?152.7μg/m?150.9μg/m?145.9μg/m?135.9μg/m?128.8μg/m?91.3μg/m，殘存率分別為98.19%?97.10%?95.96%?92.77%?86.41%?81.91%?58.03%；羅紅霉素注射液Ⅱ樣品隨著溫度的依次遞加，其濃度分別為272.1μg/m?269.6μg/m?265.9μg/m?258.2μg/m?247.7μg/m?239.8μg/m?225.7μg/m，殘存率分別為98.46%?97.56%?96.22%?93.43%?89.41%?86.80%?81.69%?在常溫狀態下（25℃），羅紅霉素注射液Ⅰ樣品的濃度為157.3μg/m，殘存率為100%，預測有效保質期為1.8a；羅紅霉素注射液Ⅱ樣品的濃度為276.3μg/m，殘存率為100%，預測有效保質期為0.9a；兩種樣品均比較穩定，樣品Ⅰ的有效保質期要長于樣品Ⅱ?

3討論

羅紅霉素目前在臨床上應用的劑型為固體制劑，還沒有注射液劑型上市，鑒于其水溶液的穩定性較差，以往嘗試通過調節pH值?加入有機溶劑等途徑還改變上述性狀，但是獲得的增溶效果并不理想，羥丙基-β-環糊精和 -環糊精都是較為常用的藥用輔料，通過與羅紅霉素匹配，可有效改善該藥物的化學穩定性?溶解度以及刺激性等[3]?因此，采用這兩種包材制備羅紅霉素注射液，能夠增強該藥物在水溶液中的穩定性，可為臨床應用提供更多的劑型選擇，本試驗采用初均速法對這兩種注射液溫度的穩定性進行考察，并對其有效期進行預測，旨在為新制劑的研發及臨床應用提供必要的參考?

藥物有效期確定的主要依據是藥品的熱穩定性，熱穩定性試驗可以采用留樣觀察和溫度加速兩種方法，就準確性而言，留樣觀察要優于溫度加速，但是其也存在費時過長的缺點，因此，本試驗采用的是后一種方法，能夠在較短時間內對自然條件下藥品的有效期進行預測，適合應用于新制劑處方的研究及新藥和工藝的篩選[4]?為提高本次試驗分析的靈敏度，還采用了二極管陣列檢測器，實驗結果表明，限制羅紅霉素注射液研制及臨床廣泛應用的最主要原因是其在溶液中不穩定?易降解而造成的，選用常用的羥丙其-β-環糊精孔徑更大的γ-環糊精對其進行包合，可增大羅紅霉素的溶解性，進而提高其在水溶液中的穩定性，對兩種包材制備進行比較，前一種獲得的穩定性效果更好，初步預測藥品的有效期可達1.8年?由此可見，由羥丙基-β-環糊精包合制備羅紅霉素所制備的注射液，更能夠滿足生產?儲藏?運輸及臨床應用的需求?

參考文獻

[1] 王建，曾紅霞，洪利婭.羅紅霉素在胃腸道介質中溶解度?油水分配系數?穩定性及原研片溶出行為研究[J].藥物分析雜志，2013，10（3）：1787-1791.

[2] 郭蓓寧，郁繼誠，張菁，等.高效液相色譜-電噴霧串聯質譜法（LC-ESI-MS/MS）檢測人血漿中羅紅霉素濃度[J].藥物分析雜志，2010，15（8）：1537-1540.

[3] 李瑋.大環內酯類抗生素熱穩定性及分解動力學研究[J].藥物分析雜志，2010，13（8）：1544-1547.

[4] 蘭瑩，歐陽五慶.羅紅霉素納米乳的制備及體外抑菌效果分析[J].畜牧與獸醫，2012，12（6）：70-73.