影響血凝檢測的其他因素

摘要：血凝檢測與諸多因素有著密切關系，如：樣本的采集、運送、保存；試劑的選用、復溶、預溫和儲存；儀器的選擇、保養、監控和校準；參考范圍的確定；檢驗人員的熟悉程度；操作規范的執行情況；凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APPT）危急值的處理；室內、室間質控情況；檢驗報告的正確填寫或輸入；檢驗報告的復核；與臨床的溝通等。

關鍵詞：樣本采集；血凝檢測；影響

【中圖分類號】R331.1+43 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-8602（2015）01-0090-02

一、樣本對血凝檢測結果的影響

1樣本采集與處理

1.1采血技術

1.1.1患者處于平靜、空腹狀態醫務人員應幫助患者消除緊張情緒，避免血小板、凝血因子的激活；止血帶不應拉得太緊，最好不要超過5min，必須順利“一針見血”，避免混入組織液或發生溶血。因為組織液中會有豐富的因子Ⅷ，可激活外源性凝血途徑，加速凝血酶原的消耗，使試驗結果偏低。采血液與抗凝劑混勻，不宜用力振搖，避免用力振蕩破壞凝血蛋白；宜采用真空采血管，可顛倒混勻。采血時有多管，宜采用第2管。采血時不能有氣泡，氣泡會使纖溶蛋白原、因子V、因子Ⅷ變性。

1.1.2試管要求一次性注射器，硅化玻璃管，要求2mL血量規格。

1.1.3抗凝劑選用常用的抗凝劑是枸櫞酸鈉。因為因子Ⅴ和因子Ⅷ在枸櫞酸鈉中穩定。不宜使用EDTA-2Na、肝素、草酸鹽抗凝。肝素影響還適用于接受肝素治療的病人的監測。而草酸鹽能與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點。EDTA能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白原單體聚合，且對因子Ⅴ保護性差。抗凝劑與全血的比例：抗凝劑與全血的比例為1∶9，不嚴格控制比例會改變血漿的鈣離子濃度而影響結果（要求血量與采血管標本的體積差要≤10%）。

1.2樣本保存

樣本保存受時間和溫度影響，由于凝血因子易失活，室溫條件下，試管加塞避免CO2擴散而使pH改變。血漿標本原則上應立即檢測，血液一旦離體后即開始變化，隨離體的時間不同凝血因子逐漸消耗，從而檢測出的結果也不同。從樣本采集起，PT 2h之內、TT 2h之內、APTT 2h之內完成檢測。凝血試驗在室溫保存4h內完成，如果不能及時檢測完成，放置4℃冰箱保存，24h內完成。不能完成將血漿放置在-20℃冷凍存放1周。試驗PT血漿應于37℃快速融化，不要超過10min；TT試劑預溫不宜超過30min，不能反復凍融。血液采集進入空器及進入實驗所用時間越短，凝血因子保護越好。

1.3樣本運送和處理

最好在實驗室內采血，樣本應隨采隨測，病房患者的樣本盡快送到實驗室，盡量減少運輸和儲存時間，防止日光直射，以避免凝血因子降低酶活性。

3000r/min離心10min，標本離心后如發現有溶血或小凝塊應重抽，血中的乳糜微粒等將對血凝試驗結果造成干擾，應通知臨床醫生。出現這種情況都嚴重影響結果。

二、過程外因素對血凝檢測結果的影響

2.1操作的因素

操作技術對檢驗結果有很大的影響，某個環節不正確將會造成試驗結果的明顯變化。

檢查儀器電源、光源是否穩定，預熱時間或溫度是否正確。溫度過高過低都影響檢驗結果。檢查所有試劑、緩沖液、標本是否合格，如發現問題及時糾正。

每次檢測之前，應先檢測質控血漿的數值，以確保檢測結果的準確性。血漿預溫不宜超過10min。加試劑時量要準確，要防止氣泡的產生，有氣泡時凝血時間會延長，出現錯誤的結果。加樣器與反應杯垂直，加樣時間要掌握好，加樣動作要穩、準、快。既要讓反應杯與感應器充分接觸，又不能停頓時間過長。測定過程中應保持反應杯的清潔，防止異物掉入比色杯。

2.2藥物和其他因素

藥物本身影響凝血機制，如用肝素、華法林可抑制凝血酶，嚴重影響干擾凝血酶原試驗，使凝血酶原時間延長。DIC患者在早期血液處于高凝狀態，PT時間縮短，但在大量消耗凝血因子和產生的FDP拮抗凝酶的作用時，PI時間延長。

生理變化：妊娠、激動或劇烈運動精神緊張等因素都會影響凝血檢測的結果。在凝血檢測中，以上各種原因都會影響凝血檢測結果。出現異常結果時，應聯系咨詢病情，診斷是否用抗凝藥或在溶栓治療，抽血是否順利。檢驗人員收集標本一定要觀察采血量，有無凝血塊，離心后有無脂血，溶血觀察血漿的顏色，不合格的標本退回重抽，否則會造成不正確的結果。只有掌握和了解各種不利因素，才能避免出現錯誤的結果。保證質量才能更好為臨床服務，提供準確的數據。

2.3試劑使用及要求

不同的凝血活酶試劑有不同的最佳適用范圍，應選用適合檢測的儀器，適合本實驗室目的凝血活酶，嚴格按照說明書使用，注意有效期和穩定性。取溶試劑使用后，立即放入冰箱2～8℃保存[2]，每次使用要求混勻，發現試劑混濁立即遺棄。復溶后的試劑不能反復凍融。嚴格控制好APTT試劑中的CaCl2濃度。試劑使用中要注意污染的問題，避免試劑瓶蓋錯蓋造成交叉污染；同一試劑用同一吸管或移液頭，不能交叉使用，否則會造成試劑標本的交叉污染。

三、結論

由此可見，血凝檢驗結果受多方面因素的影響。新材料和新技術的應用將影響護理部和檢驗科的合作，樣本前處理的很多工作都涉及到護理部，護理部和檢驗科加強學習與溝通使大家對檢驗項目有一定的了解，并規范樣本的采集及送檢時間的控制這樣才能從各方面提高檢驗結果的準確性。只有掌握和了解這些，才能盡可能避免不利因素的干擾和錯誤的解釋，才能真正給臨床以幫助。

參考文獻

[1] 馮永青，翟春璽. 不同時間、溫度、抗凝劑對血漿凝血酶原時間測定結果的影響[J]. 陜西醫學檢驗. 2013.

[2] 劉穎燕，徐彩萍. 樣本采集對血凝檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學. 2008.

[3] 李立青. 標本放置時間及溫度對凝血三項測定結果的影響[J]. 大理學院學報2014.

[4] 肖秀林，陳紅宇，王昌富，等. PT和APTT樣本采集順序和保存溫度的探討[J]. 上海醫學檢驗雜志，2011.