新疆不同紅棗品種的總酚含量和抗氧化能力比較

楊璐 程平 曹苑 李宏

摘要：為了研究新疆紅棗的遺傳多樣性，尋找抗氧化能力較強的功能性紅棗品種，為保護(hù)利用紅棗資源提供基礎(chǔ)，用Folin-Ciocalteau法測定了7個品種紅棗甲醇提取液中的總酚含量，采用體外法評價了紅棗甲醇提取物的總抗氧化能力及對DPPH·和羥基自由基（·0H）的清除能力結(jié)果表明：7個參試紅棗品種都具有強抗氧化性，并且大多數(shù)品種間差異顯著，其中哈密大棗、駿棗、灰棗的抗氧化能力較強；不同品種間的總酚含量差異較大，變化值為751.25mg/100g，其中哈密大棗中含量最高是1837.48mg/100g，新疆小圓棗的總酚含量最低為1086.23nig/100g；相同品種中果肉和果核間總酚含量差異較大，果肉總酚含量約為果核的6倍。各種抗氧化指標(biāo)與總酚含量呈顯著正相關(guān)，酚類物質(zhì)是紅棗抗氧化的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。

關(guān)鍵詞：紅棗果實；總酚；Folin-Ciocalteu比色法；抗氧化活性

中圖分類號：K284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1007-7847（2015）01-0024-05

PhenolicProfilesandAntioxidantActivityofDifferentJujubeCultivarsinXinjiang

YANGLu1，CHENGPing1，CAOYuan2，LIHong1*

（1.XinjiangAcademyofForestry，Urumqi830000，Xinjiang，China；2.CollegeofPharmacy，XinjiangMedicalUniversity，

Urumqi830054，Xinjiang，China）

Abstract：In order to provide basic information for exploring strong antioxidant jujube resources in Xin-jiang，three different methods wer eused to evaluate antioxidant activities of 7 jujube cultivars including total antioxidant activity，hydroxyl radical scavenging and DPPH·radical scavenging.Results showed that 7 jujube cultivars had strong antioxidan tcapacities，and there was significant difference among most cultivars.Hami jujube，Junzao and huizaos antioxidant capacities were the strongest in all cultivars.Total phenol contents varied considerably among cultivars by Folin-Ciocalteau method，Hami jujube having the most 1837.48mg/lOOg and Xiaoyuanzao having the least 1 086.23mg/lOOg.Total phenol contents have large differences in the pulp and core，pulp total phenol content is about 6 times of the core of the fruit.Three indexes of antioxi-clant activity and total phenolic contents were significantly correlated，whereas phenolics is one of the most important materials of antioxidant activity of jujube.

Keywords：jujube；totalpolyphenols；Folin-Ciocalteu colorimetry；antioxidantactivity

（LifeScienceResearch，2015，19（1）：024-028）

紅棗又名大棗（Jujubae ftuctus），是鼠李科（Rhamnaceae）棗屬植物的成熟果實棗（ZizyphusjujubaMill.），具有很高的營養(yǎng)價值與藥用保健功效，是天然的藥食同源食品[1]。紅棗中含有多種生物活性物質(zhì)，如大棗多糖、酚類、黃酮類、皂苷類、三萜類、生物堿類、環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）等，對人體有多種保健治病功效。據(jù)文獻(xiàn)報道：紅棗中含有豐富的酚類物質(zhì)[2]具有抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗病毒等藥理作用；紅棗不同部位多酚粗提物的含量差異較大，棗皮中多酚含量遠(yuǎn)高于棗肉和棗核[4，5]，不同產(chǎn)地不同品種的紅棗總酚含量差異也較大；紅棗提取物的抗氧化能力與多酚含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系[5]。

新疆地域遼闊，特殊的地理位置和氣候條件使紅棗產(chǎn)業(yè)具有獨特的優(yōu)勢和巨大的發(fā)展空間。新疆紅棗含糖量高、味甘、肉厚、營養(yǎng)積累豐富、品質(zhì)優(yōu)良，因此新疆被譽為全球最適宜出產(chǎn)優(yōu)質(zhì)紅棗的地區(qū)。為合理開發(fā)利用新疆紅棗中酚類化合物資源，本研究采用Folin-Ciocalteu比色法考察新疆主產(chǎn)7個紅棗品種中紅棗果肉和果核中總酚的含量，采用鐵氰化鉀還原法、DPPH法、羥自由基清除法對紅棗多酚提取物的抗氧化活性進(jìn)行評價，并對其抗氧化活性與總酚含量進(jìn)行相關(guān)性分析，期望為新疆地區(qū)紅棗的深度開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料、試劑與儀器

材料：采集新疆主產(chǎn)的7個紅棗品種作為供試材料，包括：駿棗、灰棗、贊皇大棗、金昌1號、哈密大棗、圓脆紅棗、新疆小圓棗。7種樣品均來自新疆林業(yè)科學(xué)院佳木試驗站，采集的樣品為同一個果園、同一年成熟期、統(tǒng)一制干的紅棗果實。

試劑：DPPH（1，1-二苯基-2-苦肼基自由基）、TPrZ（美國Sigma公司）；鐵氰化鉀、2-脫氧核糖、單寧、95%乙醇、甲醇、EDTA、過氧化氫、三氯乙酸、硫代巴比妥酸等，均為國產(chǎn)分析純試劑。

儀器：水浴鍋（SW23，優(yōu)萊博公司）、紫外光譜儀（UV-2600，島津公司）、電子天平（TP-2102，賽多利斯公司），低速大容量多管離心機（上海安亭科學(xué)儀器公），超聲波清洗機（KQ-100型）。

1.2方法

1.2.1樣品處理

每個品種均隨機選取無病蟲、無機械傷害的干制紅棗若干，處理前先將果肉與果核分離，用剪刀將其果肉剪成0.2cmx0.2cmx0.2cm的立方體，果核粉碎備用。再分別從備用樣品中精密稱取出20g，粉碎后放人-80℃超低溫冰箱中備用。

1.2.2紅棗多酚樣品溶液制備

1.2.2.1果肉多酚樣品溶液制備

精密稱取紅棗果肉樣品粉0.3g，加體積分?jǐn)?shù)50%甲醇溶液10mL，超聲輔助提取30min，過濾，在4500r/min離心5min，取上清液2mL加水稀釋定容至10mL，即得果肉供試品溶液

1.2.2.2果核多酚樣品溶液制備

精密稱取紅棗果核樣品粉0.3g，加體積分?jǐn)?shù)50%甲醇溶液10mL，超聲輔助30min，過濾，在4000r/min離心5min，取上清液2mL加水稀釋至10ml，即得果核供試品溶液。

1.2.3總酚測定采用Folin-Cioealteu法

反應(yīng)原理為酚類化合物在堿性條件下可以將鎢鉬酸還原，生成藍(lán)色化合物，顏色的深淺與酚類化合物含量成正相關(guān)，在波長760nm處有最大吸收用移液器精密吸取供試品溶液3mL于10ml，容量瓶中，然后加入1.5mLFolin-Ciocalteu試劑，搖勻，靜置5min后加入2mL25%的Na2CO3溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，50℃水浴5min，取出冷卻后在760nm下比色。

1.2.4抗氧化能力測定

1.2.4.1總還原力能力測定

按照TUNGYu-tang的方法略作修改[6]。用移液器精密吸取2.5mL的磷酸鹽緩沖液（0.2mol/L，pH6.6）置于15mL離心管中，加入供試品溶液1.0mL，再加入1%的鐵氰化鉀混合液2.5mL，搖勻，將混合物置于50℃恒溫條件下加熱，反應(yīng)20min，冰浴冷卻，加入2.5mL10%三氯醋酸終止反應(yīng)，4000r/min離心10min。取上清液2.5mL至于具塞試管中，加入蒸餾水2.5mL，再加入0.5mL0.1%的FeCl3溶液，搖勻，靜置5min后，于700nm波長處測定吸光度，取3次實驗平均值

1.2.4.2清除DPPH自由基的能力測定

按照LI的方法略作修改[7]。用移液器精密吸取供試品溶液0.2mL至于10mL具塞試管中，加入0.05mg/mL的DPPH溶液2.0mL，加入0.8mL95%的乙醇溶液，搖勻，常溫下靜置30min后，于519nm波長處測定吸光度。

DPPH自由基的清除率（%）=（A0-A1/A0）x100%

式中：A1為樣品組的吸光值，A0為對照組的吸光值。

1.2.4.3清除羥基自由基（·OH）的能力測定

按照丁秀琴的方法略作修改[8]。用移液器精密吸取供試品溶液1.0mL置于10mL具塞試管中，然后加入2mmol/L的抗壞血酸0.1mL，6mmoJ/L的FeS040.3mL，8mg/mL的2-脫氧核糖0.1mL，6mmol/L的HA0.3mL，最后用pH7.4的磷酸緩沖溶液定容至2mL，搖勻，置于37V水浴中溫浴30min，然后加入10%三氯乙酸2mL，1%硫代巴比妥酸2mL，混勻后，沸水浴中保溫15min，冷卻后于532nm波長下測定吸光值。

·OH清除率（%）=（1-A1/A0）X100%

式中：A1為樣品組的吸光值，A0為空白組的吸光值。

1.2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用Excel對數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析，采用SPss17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差和相關(guān)性分析，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2結(jié)果

2.1不同紅棗品種中總酣含量比較

表1不同品種紅棗樣品中總酣含量

Table1TotalphenoliccontentsindifferentdriedJujubescultivars

Varieties Thecontentofphenolic（mg/1OOg）AI=3

Pulp Core

Junzao 1623.71±30.01 261.37±15.43

Huizao 1407.26±25.16 287.51±13.17

Zanhuangdazao 1362.83±22.31 234.17±17.06

Jinchang1 1126.12±24.32 204.95±16.12

HamiJujube 1837.48±24.54 296.15±15.21

Yuan—cuiJujube 1337.61±30.17 231.21±13.56

Xiaoyuanzao 1086.23±19.65 211.06±14.41

分別對7個不同品種紅棗果肉和果核中總酚含量進(jìn)行測定，結(jié)果如表1。由表1可以看出，紅棗不同品種果實果肉中的平均總酚含量為1397.32mg/100g，變幅為751.25mg/100g。其中哈密大棗中含量最高是1837.48mg/100g，新疆小圓棗的含量最低為1086.23mg/100g。

紅棗不同品種果核中的平均總酚含量為246.63mg/100g，變幅為91.20mg/100g。哈密大棗中含量最高是296.15mg/100g，金昌1號的總酚含量最低為204.95mg/100g。經(jīng)方差分析可知同一個品種紅棗果肉和的果核中總酚含量差異顯著（P<0.05），果肉中總酚含量約為果核的6倍。

縱向來看，紅棗各品種間的總酚含量差異較大，在品種的綜合利用上具有較大的選擇空間。對供試樣品進(jìn)行快速聚類分析，分成三類：第一類為哈密大棗總酚含量最高，第二類為駿棗、灰棗、贊皇大棗、圓脆紅棗，第三類為金昌1號、新疆小圓棗總酚含量最低（聚類圖略）

2.2不同品種紅棗果肉的抗氧化活性比較

2.2.1不同紅棗品種總抗氧化能力比較

由表2可知，7個供試紅棗品種果肉中的總抗氧化能力均為正值，說明新疆主產(chǎn)的這7個紅棗品種的果肉均具有一定的抗氧化能力；不同品種紅棗果肉的總酚粗提物的總抗氧化能力之間存在較大差異?？偪寡趸芰ψ顝姷氖枪艽髼椷_(dá)到89.15個單位，其次是駿棗88.21個單位，新疆小圓棗的抗氧化能力最弱為55.97個單位，變幅為33.18個單位。通過方差分析表明，各品種間總抗氧化能力存在顯著差異（P<0.05），其中哈密大棗>駿棗>灰棗，這3個品種的總抗氧化能力最強，并且顯著高于其他品種。

2.2.2不同紅參品種DPPH.自由基清除率比較

DPPH·自由基屬于比較穩(wěn)定的有機物自由基，廣泛應(yīng)用于測定純抗氧化劑或植物提取物的體外抗氧化活性。不同品種紅棗果肉提取液的DPPH清除能力如表2所示，不同品種紅棗果肉的總酚粗提物的DPPH·自由基清除能力之間存在較大差異。DPPH·自由基清除能力最強的是哈密大棗，清除率為89.23%，新疆小圓棗的清除能力最弱，為57.52%，7個供試品種的DPPH.自由基清除能力為89.23%?57.52%，變幅為31.71%，平均清除率74.7%。通過方差分析表明，哈密大棗、駿棗、灰棗這3個品種的DPPH·自由基清除能力較高，與其他品種間存在顯著差異（P<0.05）。

2.2.3不同紅棗品種羥基自由基清除率比較

羥基自由基（·0H）是最活躍的一種活性分子，也是進(jìn)攻性最強的化學(xué)物質(zhì)之一，是目前所知活性氧自由基中對生物體毒性最強、危害最大的一種自由基，殺死紅細(xì)胞，降解DNA、細(xì)胞膜和多糖化合物，導(dǎo)致細(xì)胞損傷或疾病。不同品種紅棗果肉提取液的·OH清除能力如表2所示，紅棗不同品種總酚提取液對羥基自由基均具有較強的清除能力，清除率在95.75%～53.00%，平均清除率為79.64%，變幅為42.75%，各品種間清除能力差異較大，清除能力最強的是哈密大棗，新疆小圓棗的清除能力最弱。通過方差分析表明，哈密大棗>駿棗>灰棗，這3個品種的羥基自由基清除率能力較高，與其他品種間存在顯者差異（P<0.05）。

2.3 總酚含量與抗氧化活性相關(guān)性分析

實驗以總抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和羥基自由基清除能力作為紅棗果肉總酚提取液抗氧化能力的評價指標(biāo)，由表3相關(guān)性分析顯示|：紅棗果肉總酚含量與3種抗氧化評價指標(biāo)之間均存在高度的正相關(guān)性（P<0.05），相關(guān)系數(shù)分別是0.834、0.893、0.917。表明紅棗果肉中酚類物質(zhì)與其抗氧化能力密切關(guān)系。Gardner等[9]研究結(jié)果表明果汁中總酚含量與FRAP清除率相關(guān)性很高；丁秀琴等[8]、黃龍等[10]、KubolaJ等[11]、AbuBakarMF等[12]的研究表明在多種果蔬中酚類物質(zhì)含量與其總抗氧化能力之間均呈顯著正相關(guān)性，本研究結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致。

3討論

多酚類物質(zhì)為植物體內(nèi)的復(fù)雜酚類次生代謝物，主要存在于植物的皮、根、葉、果中，具有抗氧化、強化血管壁、促進(jìn)腸胃消化、降低血脂肪與增加身體抵抗力以及防止動脈硬化、血栓形成的作用，還能利尿、降血壓、抑制細(xì)菌與癌細(xì)胞生長及幫助消化。此次涉及的7個紅棗品種總酚含量較高，但不同品種間含量差異顯著，果肉中總酚含量為1837.48?1086.23mg/100g，果核中總酚含量為296.15?204.95mg/100g。朱銳等[13]的研究表明，同一品種紅棗間因栽培環(huán)境和管理措施不同，棗果中的營養(yǎng)成分存在差異。本研究中7個供試紅棗品種均采自同一樣地，栽培環(huán)境和管理措施一致，說明不同品種紅棗間的總酚含量及抗氧化活性存在差異主要與紅棗的基因型有關(guān)

自由基是機體氧化反應(yīng)中產(chǎn)生的有害化合物，可損害機體的組織和細(xì)胞，進(jìn)而引起慢性疾病及衰老效應(yīng)，自由基清除劑的研究對人體健康有著重大的意義。植物中多酚化合物具有良好的抗氧化活性以及清除有害人體健康的自由基的能力。本研究結(jié)果表明：此次涉及的7種紅棗果肉均具有較強的抗氧化活性，不同品種間抗氧化活性存在顯著差異，哈密大棗、駿棗、灰棗抗氧化能力較強，這可能與紅棗果肉中酚類物質(zhì)的含量和成分有關(guān)。研究表明酚類化合物的羥基數(shù)目越多，其抗氧化活性越強[8、14]，而基因型又決定了果品中的總酚含量[15]。

不同的抗氧化實驗方法產(chǎn)生的結(jié)果不同，沒有任何一種單獨的體外抗氧化實驗方法能夠精確地評價樣品的抗氧化能力[16]，因此本實驗采用總抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和羥基自山基清除能力3種方法測定紅棗果肉的抗氧化能力。實驗結(jié)果表明：供試紅棗品種均具有較強的抗氧化性，各品種間抗氧化性差異較大。相關(guān)性分析表明：紅棗果肉中的總酚含量與3個抗氧化指標(biāo)間具有顯著的正相關(guān)性，說明紅棗果肉中酚類物質(zhì)與其抗氧化能力有密切關(guān)系，即紅棗的多酚類物質(zhì)應(yīng)該是其抗氧化的主要物質(zhì)基礎(chǔ)而對于相同品種紅棗在不同產(chǎn)地時體內(nèi)總酚含量和抗氧化性會有何種變化有待進(jìn)一步研究，以期探明抗氧化活性最強的紅棗品種及其產(chǎn)地，為選擇利用總酚穴量較高的抗氧化性保健食品品種提供有力的參考

4結(jié)論

新疆主產(chǎn)的7個紅棗品種中的總酚含量均較高，不同品種間總酚含量差距較大，果肉中總酚禽量較果核中高出約6倍；供試紅棗品種均具有較強的抗氧化性，各品種間抗氧化性差異較大'紅棗果肉總酚含量與3種抗氧化指標(biāo)（總抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和羥基ft由基清除能力）之間均存在高度的正相關(guān)關(guān)系；酚類物質(zhì)是紅棗抗氧化的重要物質(zhì)搞礎(chǔ)之一。

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