卵母細胞形態異常對體外受精-胚胎移植臨床結局的影響

寧艷春，尹利榮，劉秀榮，郭劍，劉寶蓮，韓寶生，王鳳蘭，劉海靜，劉恒，馬曉慧(天津醫科大學第二醫院，天津00000;唐山市婦幼保健院;保定市望都縣醫院)

卵母細胞形態異常對體外受精-胚胎移植臨床結局的影響

寧艷春1，尹利榮1，劉秀榮2，郭劍2，劉寶蓮2，韓寶生2，王鳳蘭2，劉海靜2，劉恒2，馬曉慧3
(1天津醫科大學第二醫院，天津300000;2唐山市婦幼保健院;3保定市望都縣醫院)

摘要:目的探討卵母細胞形態異常對體外受精-胚胎(IVF-ET)移植臨床結局的影響。方法收集523例患者的1 147個成熟卵母細胞按照形態分為四組，其中形態正常組295個、透明帶厚組236個、周隙大組301個以及顆粒粗組315個(后三組為形態異常卵母細胞)。比較四組的正常受精率、補救卵胞漿內單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優胚率、著床率以及臨床妊娠率。結果透明帶厚組成熟卵母細胞正常受精率明顯低于其他三組、R-ICSI率高于其他三組(P均＜0.05)。周隙大組、顆粒粗組卵裂率低于形態正常組、透明帶厚組(P均＜0.05)。與形態正常組比較，形態異常三組優胚率、著床率、臨床妊娠率均降低(P均＜0.05)。結論卵母細胞形態異常可能影響IVF-ET臨床結局。

關鍵詞:受精，體外;胚胎移植;卵母細胞;臨床結局

有研究顯示，卵母細胞的形態學特征可以預示受精和早期胚胎發育的能力，理想的成熟卵母細胞應該是極體呈圓形或橢圓形、表面光滑、細胞質顆粒均勻清晰、卵周隙小、透明帶清晰透明［1～3］。但也有研究認為，卵母細胞形態與受精及早期胚胎發育無關［4］。因此，本研究收集三組不同形態的成熟卵母細胞，比較其正常受精率、補救卵胞漿內單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優胚率、著床率以及臨床妊娠率，分析不同形態成熟的卵母細胞對體外受精-胚胎移植(IVF-ET)臨床結局的影響。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集2012年6月～2014年2月在唐山婦幼保健院生殖遺傳科進行IVF-ET的患者523例，年齡21～35歲，不孕病程(5.69±1.96)年。患者體質量指數(20.56±3.52) kg/m2，竇卵泡數(5.62±1.23)個，促卵泡刺激素(8.59±3.65) mIU/mL，黃體生成素(5.36±2.12) mIU/mL，雌二醇(23.15±3.56) pg/mL。患者基礎內分泌正常，月經規律，且無輔助生殖技術禁忌證。將符合IVF-ET條件523例患者的1 147個成熟卵母細胞按照形態分為四組，其中形態正常組295個、透明帶厚組236個、周隙大組301個以及顆粒粗組315個(后三組為形態異常卵母細胞)。

1.2IVF-ET四組加精4～6 h后觀察受精情況，如果受精率小于30%，則進行R-ICSI。取卵日記錄R-ICSI率，ET當天記錄優胚率。ET后14 d檢測血β-hCG確定生化妊娠，ET后4周B超檢查確定臨床妊娠。比較四組的正常受精率、R-ICSI率、卵裂率、優胚率、著床率以及臨床妊娠率。

1.3統計學方法采用SPSS16.0統計軟件。計量資料以珋x±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

透明帶厚組正常受精率明顯低于其他三組，RICSI率高于其他三組(P均＜0.05)。周隙大組、顆粒粗組卵裂率低于形態正常組(P均＜0.05)。與形態正常組比較，形態異常三組優胚率、著床率、臨床妊娠率均降低(P均＜0.05)。見表1。

表1　四組正常受精率、卵裂率、R-ICSI率、優胚率、著床率、臨床妊娠率比較(%，±s)

注:與其他三組比較，*P＜0.05;與形態正常組、透明帶厚組比較，△P＜0.05;與形態正常組比較，▲P＜0.05。

組別　n　正常受精率　卵裂率　R-ICSI率　優胚率　著床率　臨床妊娠率形態正常組　295　85.36±6.35　97.62±3.56　3.21±1.35　36.59±2.63　63.56±6.35　53.26±6.25透明帶厚組　236　58.35±3.26*　93.56±4.25　12.36±2.36*　20.25±5.26▲　35.26±5.59▲　32.56±5.26▲周隙大組　301　82.59±2.95　79.63±5.69△　2.36±1.58　25.36±3.91▲　40.25±4.65▲　28.38±3.65▲顆粒粗組　315　84.58±5.36　74.21±6.85△　2.95±1.48　23.28±4.63▲　40.56±5.63▲　30.59±2.69▲

3　討論

卵母細胞是人類進行有性生殖的配子之一，其質量的好壞直接決定受精卵以及胚胎后期的分裂發育、著床、分化潛能。卵母細胞形態異常因促排卵過程中各種因素導致的，但具體原因并不完全明了［5，6］。透明帶是包繞在卵胞膜周圍的一層由顆粒細胞分泌的蛋白質，在受精以及著床方面有重要作用。本研究中透明帶厚的成熟卵母細胞正常受精率明顯低于其他三種成熟的卵母細胞，R-ICSI率高于其他三種成熟的卵母細胞，說明了透明帶增厚可能會通過影響精子的穿透，影響正常的受精率，提高R-ICSI率。而且透明帶增厚也會影響胚胎的孵出，從而影響其著床。這就需要采取激光打孔卵母細胞透明帶削薄技術，輔助其孵化著床［7］，但這種操作有可能增加單卵雙胎的概率。

在IVF控制性促排卵過程中，卵母細胞的胞核和胞質不像自然周期一樣同時成熟，兩者成熟具有不同步性［8］。顆粒粗的成熟卵母細胞是胞核可能已經成熟但胞質還未成熟的一種表現［9］。本研究結果顯示，顆粒粗的卵母細胞雖然受精率與形態正常的卵母細胞沒有差異，但是卵裂率和優胚率明顯低于形態正常組，這就導致了后期的臨床妊娠率低，受精后胚胎進一步發育的潛能較差。周隙大的卵母細胞也是在IVF過程中常見的一種異常形態。在卵母細胞發育的過程中，極體剛剛從卵胞膜中排出來卵母細胞，極體扁平，卵周隙很小。卵周隙大的卵母細胞是否是一種卵母細胞過度成熟、卵周隙過度擴張的表現有待進一步研究。本研究中卵周隙大的卵母細胞受精率和正常卵母細胞沒有差異，但是其后期的卵裂率、優胚率以及臨床妊娠率明顯降低，說明卵周隙大的卵母細胞胞質、細胞器、酶類、蛋白質等供胚胎后期發育的一些營養物質有可能已接近退化，從而影響胚胎的后期發育。

綜上所述，IVF-ET過程中卵母細胞是一種重要的配子，其形態可能影響IVF-ET臨床結局。因此在控制性促排卵的過程中，臨床醫生應該注意適當調節促卵泡素的起始劑量，盡量為實驗室提供形態正常、胞核和胞質都成熟的正常形態的卵子。同時也要根據卵母細胞的異常形態采取相應的措施，如卵胞漿內單精子注射、透明帶削薄等，以提高IVF-ET整體臨床妊娠率。

參考文獻:

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［9］Marín Bivens CL，Lindenthal B，O＇Brien MJ，et al.A synthetic analogue of meiosis-activating sterol(FF-MAS) is a potent agonist promoting meiotic maturation and preimplantation development of mouse oocytes maturing in vitro［J］.Hum Reprod，2004，19(10) : 2340-2344.

(收稿日期:2014-08-29)

通信作者:尹利榮

文章編號:1002-266X(2015)21-0050-02

文獻標志碼:B

中圖分類號:R714.13

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.21.019