天然生育酚的微波萃取工藝研究

張巖，張紅紅，吳樹國

(濱州學院 化工技術研究中心，山東 濱州 256603)

天然生育酚(VE)是存在生物體內的一種強抗氧化劑，具有提高細胞的活力和增強記憶力，減緩人體衰老的作用，廣泛應用在化妝品、藥品食品添加劑和保健品等領域［1-2］。因此，研究天然生育酚的提取工藝具有重要的現實意義［3-5］。

微波萃取技術是一種新型的萃取技術，具有萃取效率高、節約溶劑、操作簡單、重現性好、節能環保等諸多優點，因而近年來廣泛的應用于天然活性物成分的提取研究［6-8］。為此，本實驗利用微波萃取法對大豆中的生育酚的提取工藝進行研究，旨在獲得最佳提取工藝，為生育酚的提取提供理論依據和技術參考。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

天然混合生育酚;大豆;無水乙醇、硝酸均為分析純。

MAS-II 微波萃取設備;AUY120 電子精密天平;SHZ-III 循環水真空泵;RJ-TDL-50A 中型離心機;Agilent 8453 紫外分光光度計。

1.2 實驗方法

黃豆打碎，過60 目篩。稱取2.0 g 大豆粉于250 mL 三口燒瓶中，加入20 mL 無水乙醇，將燒瓶放入微波萃取裝置中，并連接好冷卻裝置。啟動微波裝置，打開冷卻水冷卻，萃取時間過半時打開磁子，轉速為600 r/min，運行1 min 后關閉。取出三口燒瓶，靜止，冷卻，抽濾，濾液離心后，在最大吸收波長295 nm 下測吸光度。每個實驗平行3 次。

1.3 分析方法

1.3.1 標準曲線的繪制 取0.1 g 天然混合生育酚，用乙醇溶解，移入100 mL 容量瓶中，用無水乙醇定容，搖勻，制成1 mg/mL 的生育酚標液。分別取1 mL生育酚標液于10 個100 mL 燒杯中，依次加入無水乙醇，稀釋至10，20，40，50，60，80，100 μg/mL。用紫外分光光度計測其吸光度，繪制濃度與吸光度的標準曲線，線性回歸，得方程Y =0.068 53X +0.004 8，R2=0.985 41。

1.3.2 樣品分析 大豆提取物清液經離心后，對液體進行紫外檢測，在最大吸收波長295 nm 下測吸光度，按圖1 的回歸方程測黃酮濃度，然后根據清液體積轉化為質量，再由下式計算每100 g 大豆中生育酚的萃取量。

圖1 生育酚的標準曲線Fig.1 Standard curve of tocopherol

式中 η——萃取量，mg/100 g;

C1——生育酚的質量，g;

C0——大豆粉質量，g。

2 結果與討論

2.1 萃取時間對萃取量的影響

萃取溫度30 ℃，萃取功率300 W，萃取時間對萃取量的影響見圖2。

圖2 萃取時間對生育酚萃取量的影響Fig.2 Effect of the extraction time on the extraction amount of tocopherol

由圖2 可知，隨萃取時間增加，萃取量呈增加趨勢，最佳萃取時間為10 min，10 min 之后，萃取量略有下降趨勢。10 min 之前，微波裝置對生育酚處于一個萃取的過程，萃取量隨著時間而上升，10 min 萃取已經基本完成，再增加萃取時間，微波可能會破壞生育酚的內部構造，萃取量不會上升，并且無水乙醇容易揮發，時間越長，揮發的就越多，造成一定的損失。所以，最佳的萃取時間為10 min。

2.2 萃取溫度對萃取量的影響

萃取時間10 min，萃取功率300 W，萃取溫度對萃取量的影響見圖3。

由圖3 可知，萃取量隨著萃取溫度的升高先上升后下降，這是因為溫度的升高，一開始有利于大豆細胞壁的破裂，有利于萃取，但是溫度繼續升高，對微波萃取起到的作用就不明顯，更高的溫度會破壞生育酚的內部構造，而且較高的溫度會加快無水乙醇的揮發，對萃取帶來負面影響，生育酚在高溫下會加速氧化，失去其天然功效，所以萃取溫度40 ℃比較合適。

圖3 萃取溫度對生育酚萃取量的影響Fig.3 Effect of the extraction temperature on the extraction amount of tocopherol

2.3 萃取功率對萃取量的影響

萃取時間10 min，萃取溫度40 ℃，萃取功率對萃取量的影響見圖4。

圖4 萃取功率對生育酚萃取量的影響Fig.4 Effect of the extraction of power on the extraction amount of tocopherol

由圖4 可知，萃取量隨著萃取功率的增大而上升，400 W 時達到最高。400 W 之后，萃取量有所下降。最佳萃取功率為400 W。這可能由于低微波功率條件下萃取溫度低，細胞壁的破碎程度有限，有效成分難以溶出;而過高的微波功率，可能會使生育酚的結構發生改變而影響萃取量。

2.4 正交實驗結果

在以上單因素實驗基礎上，對萃取時間、萃取溫度、萃取功率進行正交實驗優化。每次實驗平行3次，結果見表1。

由表1 可知，正交實驗得到微波萃取生育酚的最優工藝條件為A2B2C2，即萃取溫度40 ℃，萃取時間10 min，萃取功率400 W。3 個因素影響大小的順序依次為萃取溫度＞萃取時間＞萃取功率，影響最大的是溫度。

為了驗證最優組合的正確性，在最佳萃取組合條件下重復實驗3 次，結果見表2。

表1 正交實驗結果Table 1 The results of orthogonal test

表2 驗證實驗結果Table 2 The validation of the orthogonal test

由表2 可知，平均萃取量為7.9 mg/100 g，說明了優化實驗的合理性。

3 結論

微波輔助無水乙醇萃取大豆中生育酚的最佳工藝參數為:料液比1∶10(g/mL)，萃取溫度40 ℃，萃取時間10 min，萃取功率400 W。在此條件下，生育酚的萃取量可達7.9 mg/100 g，有望代替固-液提取的傳統工藝應用于工業生產中。

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