李曉霞,劉 燕,曹平華,韓文霞,姚昱君,祝 蕊,禹學(xué)禮
(1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,河南洛陽471003;2.河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院牧業(yè)工程學(xué)院,河南中牟451450)
胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)的關(guān)鍵在于胚胎發(fā)育質(zhì)量的優(yōu)劣[1]。相較體內(nèi)培養(yǎng)來說,體外生產(chǎn)胚胎質(zhì)量差,在形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和生物化學(xué)方面均與體內(nèi)胚胎存在明顯差異。原因在于體外生產(chǎn)胚胎處于高氧濃度條件下,導(dǎo)致活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)產(chǎn)生過多[2]。ROS是體外胚胎發(fā)育效率低的重要原因,同時(shí)高水平的ROS會(huì)降低精子活力[3]、使糖酵解酶失活、頂體膜損傷[4]、DNA氧化,最終影響體外受精率和體外胚胎發(fā)育潛能。添加抗氧化劑可減少ROS產(chǎn)生、阻止氧化應(yīng)激效應(yīng)。
褪黑素(Melatonin,MLT)化學(xué)名為N-乙酰-5-甲氧基-色胺,是一種由松果腺合成和分泌的神經(jīng)內(nèi)分泌激素,具有高度親脂性和部分親水性,可彌散穿透各種生理屏障,發(fā)揮強(qiáng)大的抗氧化作用[5]。褪黑素及其代謝物可直接清除ROS、激活抗氧化酶、增加GSH水平、抑制細(xì)胞氧化酶產(chǎn)生[6]。尤其在減少細(xì)胞氧化損傷方面,褪黑素是最有效的抗氧化劑[21-23]。褪黑素保護(hù)作用在許多繁殖生物技術(shù)研究中已證實(shí),如促進(jìn)牛[7-8]和水牛[9]卵母細(xì)胞體外成熟,提高豬[10]、老鼠[11]、倉鼠[12]、人[13]、水牛[14]和羊[15]的精子功能,刺激老鼠[16]、牛[17]和綿羊[18]胚胎發(fā)育。然而,關(guān)于牛精子功能研究報(bào)道很少,尤其在牛精子獲能方面研究還未見報(bào)道。為此,本研究將探討在體外成熟液、獲能液和胚胎培養(yǎng)液中添加MLT對牛卵母細(xì)胞成熟、獲能后精子質(zhì)量和早期胚胎發(fā)育的影響。