水溶性牡蠣多糖的降血壓活性

石璇　郭國(guó)麗　馬慧慧　佟長(zhǎng)青　宮芳婧　曲敏　李偉

摘要：牡蠣中含有豐富的多糖。從牡蠣中制備的水溶性多糖經(jīng)HPLC測(cè)定，其單糖組成為葡萄糖，以葡聚糖分子篩測(cè)定其分子量為（3.93～10.84）×106 Da。以牡蠣多糖（7 g/kg）對(duì)高血壓模型大鼠灌胃均具有較明顯的降低收縮壓和舒張壓作用。

關(guān)鍵詞：牡蠣；多糖；降壓活性

牡蠣屬于軟體動(dòng)物門(mén)、瓣鰓綱、列齒目、牡蠣科。牡蠣不但營(yíng)養(yǎng)豐富，而且還具有一定的藥用價(jià)值。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載牡蠣具有斂陰、潛陽(yáng)、化痰、軟堅(jiān)等藥用價(jià)值[1]。我國(guó)沿海所產(chǎn)牡蠣有20多種。從渤海、黃海至南海均有養(yǎng)殖，主要的養(yǎng)殖品種有近江牡蠣（Crassostrea rivularis Crould）、褶牡蠣（Crassostrea plicatula）、長(zhǎng)牡蠣（Crassostrea gigas Thunberg）、大連灣牡蠣（Crassostrea talienwhanensis）以及密鱗牡蠣（Ostrea denselamellosa Lischke）[2]。研究表明，牡蠣含有氨基酸、多糖、B族維生素、牛磺酸以及鈣、磷、鐵、鋅等成分。臨床研究表明，牡蠣具有提高機(jī)體免疫力、降血壓、治療失眠、慢性中耳炎、小兒多汗癥、子宮肌瘤以及小兒遺尿等作用[3]。

對(duì)于牡蠣肉酶解產(chǎn)物降血脂、降血壓以及調(diào)整血糖的作用已有報(bào)道[4]。牡蠣肽具有的抗菌活性也有報(bào)道[5]。牡蠣多糖是牡蠣中的重要成分之一。它主要為通過(guò)α-（1，4）糖苷鍵相連且具有α-（1，6）糖苷鍵分支的葡萄聚糖[6]。對(duì)于牡蠣多糖的降血壓活性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究尚未見(jiàn)到報(bào)道。本文利用高血壓模型Wistar大鼠進(jìn)行牡蠣多糖降血壓作用研究，為利用牡蠣多糖開(kāi)發(fā)降血壓功能保健食品提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

牡蠣（Crassostrea gigas）購(gòu)于大連長(zhǎng)興農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。購(gòu)回后置于冰箱中（ -20 ℃） 保存，直至使用。

1.2方法

1.2.1牡蠣多糖制備在4 ℃時(shí)，清洗牡蠣，在0.5 MPa 壓力下，80 ℃蒸煮牡蠣，3 500 r/min離心20 min，棄去沉淀。

將上清液用濃度70%的乙酸調(diào)至pH 5，酸解2 h，3 500 r/min離心20 min，棄去沉淀。上清利用膜分離器去除分子量30 000 Da以下的物質(zhì)，用NaOH調(diào)解30 000 Da以上濾液pH至7。加入乙醇使終濃度為70%，3 500 r/min離心20 min離心得多糖沉淀。沉淀溶于蒸餾水中，在蒸餾水中透析后冷凍干燥，制得牡蠣多糖。

1.2.2牡蠣多糖性質(zhì)按照Fu及ONeill的方法測(cè)定水溶性牡蠣多糖中的單糖組成[7]。所得的水溶性牡蠣多糖經(jīng)三氟乙酸酸解，以3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮（PMP）衍生后用高效液相色譜（HPLC，美國(guó)Waters公司）分析。

水溶性牡蠣多糖分子量通過(guò)TSK-gel G3000PWXL柱（7.8 mm×30 cm）測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)水溶性多糖分子量為10、70、80及500 kDa的葡聚糖。

1.2.3牡蠣多糖降壓作用高血壓模型Wistar大鼠隨機(jī)分為3組，每組6只。分別以生理鹽水（陰性對(duì)照組）、卡托普利 （20 mg/kg）（陽(yáng)性對(duì)照組）和牡蠣多糖（7 g/kg）灌胃，1次/d，2 mL/次，共22 d，通過(guò)ALC-NIBP無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量分析系統(tǒng)（上海奧爾科特生物科技有限公司）監(jiān)測(cè)大鼠給藥前后血壓的變化情況。

1.2.4統(tǒng)計(jì)方法用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析處理，p<0.05表示差異顯著，數(shù)值以（±sd）表示。

2結(jié)果與討論

2.1牡蠣多糖性質(zhì)

牡蠣多糖經(jīng)過(guò)蒸煮、酸解、醇沉以及干燥等步驟制得。制得的牡蠣多糖經(jīng)過(guò)PMP衍生后，經(jīng)HPLC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其單糖的組成單位是葡萄糖。這與陳騫報(bào)道的牡蠣糖原組成是相同的[8]。牡蠣多糖分子量通過(guò)TSK-gel G3000PWXL柱層析測(cè)定為（3.93～10.84）×106 Da。本實(shí)驗(yàn)所提取的牡蠣多糖分子量比陳騫報(bào)道的牡蠣糖原分子量大[8]。

2.2牡蠣多糖降壓活性

從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，經(jīng)過(guò)灌胃22 d后，高血壓大鼠的收縮壓明顯降低（圖1）。牡蠣多糖的降壓效果與20 mg/kg的卡托普利相當(dāng)。其中，牡蠣多糖與陰性對(duì)照相比，它們之間的收縮壓存在顯著性差異（P<0.05）。

經(jīng)過(guò)灌胃19 d后，高血壓大鼠的舒張壓明顯降低（圖2）。牡蠣多糖的降壓效果與20 mg/kg的卡托普利相當(dāng)。其中，牡蠣多糖與陰性對(duì)照相比，它們之間的舒張壓存在顯著性差異（P<0.05）。

3結(jié)論

牡蠣多糖由葡萄糖組成，是一種相對(duì)分子量在數(shù)百萬(wàn)至數(shù)千萬(wàn)的大分子量多糖。以牡蠣多糖對(duì)高血壓模型大鼠灌胃均具有較明顯的降低收縮壓和舒張壓作用。隨著深入研究，牡蠣多糖可以被開(kāi)發(fā)成降血壓的保健食品。

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Abstract：A water-soluble polysaccharide was isolated from Crassostrea gigas （CGPS-1） by hot-water extraction.For the polysaccharide，glucose was the monosaccharide unit.Based on the calibration with Dextran，the CGPS-1 had a molecular weight of about 3.93～10.84×106 Da.The plysaccharides （7 g/kg）have better antihypertensive effect on renovascular hypertensive rats.

Key words：Crassostrea gigas； polysaccharide； antihypertensive effect

（收稿日期：2014-12-08）