酸棗仁散的藥效學研究

王利利 ，俞明遠，馬彤輝，湯林杰，徐霄龍，滕可導，劉鳳華，馬云飛，許劍琴

（1.中國農業大學動物醫學院，北京 海淀100193 ；2.北京農學院動物科學技術學院，北京 昌平 102206）

酸棗仁湯源于我國傳統醫學經典《金匱要略》，人醫臨床上用于治療虛勞虛煩不得眠，怔忡恍忽，心悸盜汗，頭目眩暈，夜間盜汗，咽干口燥等病證[1]，利用酸棗仁湯治療失眠癥可以明顯延長睡眠時間，同時加深睡眠深度，使神經衰弱等癥狀得到改善。而獸醫臨床少見報道。在獸醫生產中，動物在運輸、轉群及仔豬斷奶過程中由于內外界因素的改變會產生應激反應，如身體的損傷、情志的變化、行為的變化以及食欲差、消化功能紊亂、飼料利用率低、生長遲滯、腹瀉等癥狀，嚴重時造成畜禽死亡，給養殖業造成巨大損失。研發中獸藥飼料添加劑應用于動物生產過程中以減緩環境應激對家畜的影響，保證畜禽生產健康持續發展，有一定實用意義。本試驗所用酸棗仁散由酸棗仁湯加減方改進而成，由酸棗仁為君藥組成，水煎后，制成散劑，研究酸棗仁散對小鼠鎮靜、催眠、耐缺氧、耐高溫及鎮痛作用的影響，為應用于中獸醫臨床提供一定的理論和實驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物、藥品、試劑及主要設備 SPF 級昆明系小鼠，購自北京大學實驗動物中心（SCXK(京)2012-0001），小鼠體重為18～22 g。酸棗仁散（批號：20130601，生產單位：北京中農勁騰生物技術有限公司中試產品）；戊巴比妥鈉（德國默克公司），安定片（北京益民藥業有限公司，批號：20130307）；生理鹽水、凡士林、鈉石灰。動物活動箱：用無色有機玻璃制成的15 cm×25 cm×20 cm長方形箱，其底部放入木屑墊料。磨口廣口瓶，恒溫箱，熱板儀。

1.2 酸棗仁散對小鼠自發活動的影響 將40 只雄性小鼠隨機分為4 組，每組10 只。分別為生理鹽水組（0.3 mL/只）、酸棗仁散劑低劑量組（5 g/kg體重）、中劑量組(10 g/kg 體重）和高劑量組（15 g/kg 體重），將散劑制成混懸液后灌胃給藥。以2 min 內小鼠走動時間及雙前肢向上抬舉次數為指標，給藥前把小鼠投入箱中適應5 min，記錄2 min的活動數值作為正常值。分別在給藥后60 min和90 min，測定小鼠走動時間及雙前肢向上抬舉次數[2]。

1.3 酸棗仁散對閾劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間的協同作用 將50 只雄性小鼠隨機分為5 組，每組10 只，分別為戊巴比妥鈉組（閾劑量為60 mg/kg體重）、酸棗仁散低劑量（5 g/kg 體重）+閾劑量戊巴比妥鈉組、酸棗仁散中劑量（10 g/kg 體重）+戊巴比妥鈉組、酸棗仁散高劑量（15 g/kg 體重）+戊巴比妥鈉組、安定（2 mg/kg 體重）+戊巴比妥鈉組。酸棗仁散灌胃給藥，60 min 后再腹腔注射閾劑量戊巴比妥鈉，以翻正反射消失為入睡時間，從翻正反射消失至恢復時間為睡眠持續時間。試驗在安靜、通風、室溫18 ℃～22 ℃左右的環境下進行[3]。

1.4 酸棗仁散對小鼠耐缺氧能力的影響 小鼠40只隨機分為4 組，每組10 只。設生理鹽水組、酸棗仁低劑量組（5 g/kg 體重）、中劑量組（10 g/kg 體重）和高劑量組（15 g/kg 體重），分別口服給藥3 天，于第3天給藥1 h后，將各組小鼠分別放入容積相同的（250 mL）的磨口廣口瓶內（每瓶1 只），瓶內裝有同等量（10 g）的鈉石灰，以吸收水分和二氧化碳。放入小鼠后，加蓋及瓶口涂以凡士林密封。以呼吸停止為死亡指征，記錄小鼠存活時間[4]。

1.5 酸棗仁散對小鼠耐高溫能力的影響 小鼠共40 只隨機分為4 組，每組10 只。設生理鹽水組、酸棗仁低劑量組（5 g/kg 體重）、中劑量組（10 g/kg 體重）和高劑量組（15 g/kg 體重），分別口服給藥3 天，于第3 天給藥1 h 后，將小鼠放入45 ℃的恒溫箱中，立即計時，并密切觀察。以最后1 次呼吸停止為指標，記錄小鼠存活時間。

1.6 酸棗仁散對小鼠的鎮痛作用 取小鼠逐只放于（55±0.5）℃熱板儀上，記錄小鼠舔后足反應所需時間（疼痛反應潛伏期）作為小鼠的痛閾值，挑選痛閾值在5～30 s 內的雌性小鼠40 只，隨機分為對照組、酸棗仁低、中、高劑量組，連續3 d 灌胃給藥，于末次給藥后1 h，分別將小鼠置于（55±0.5）℃的熱板上，測定痛閾值，并計算痛閾提高率。

痛閾提高百分率（%）=（給藥后痛閾-給藥前痛閾）/給藥前痛閾×100%

1.7 統計學處理 用SPSS17.0 統計軟件，采用單因素方差分析，數據以“平均數±標準差”表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05 為有統計學差異，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結果

2.1 酸棗仁散對小鼠自發活動的影響 給藥后60 min 和90 min，各給藥組均能顯著減少小鼠行走時間（P＜0.05），低、中、高劑量組與對照組相比均差異極顯著（P＜0.01），其中，高劑量組與低、中劑量組相比差異顯著（P＜0.05）（表1）。給藥后60 min 和90 min，各給藥組均可以顯著減少小鼠前肢上抬次數（P＜0.05），給藥后60 min，與對照組比較，高劑量組差異極顯著（P＜0.01），給藥后90 min，與對照組比較，低、中、高劑量組均差異極顯著（P＜0.01）（表2）。結果表明，酸棗仁散劑具有顯著抑制小鼠自發活動的作用，其鎮靜效果明顯。

2.2 酸棗仁散對閾劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間的協同作用 預試驗得出戊巴比妥鈉閾劑量為60 mg/kg。酸棗仁低、中、高劑量組均可以增加戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間，其中酸棗仁散劑中劑量、高劑量組以及安定組與戊巴比妥鈉組相比，差異極顯著（P＜0.01），高劑量組與中劑量組比較差異極顯著（P＜0.01）（表3）。結果表明，酸棗仁散劑可顯著延長閾劑量戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間，具有明顯的鎮靜催眠作用。

表1 酸棗仁散對小鼠走動時間的影響（n=10）

表2 酸棗仁散對小鼠前肢上抬次數的影響（n=10）

表3 酸棗仁散對閾劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間的影響（n=10）

2.3 酸棗仁散對小鼠耐缺氧能力的影響 與對照組比較，酸棗仁散各劑量組均可以延長密閉瓶內小鼠呼吸停止時間（P＜0.05），其中，中、高劑量組差異極顯著（P＜0.01），高劑量較低劑量組差異極顯著（P＜0.01）（表4）。試驗結果表明，酸棗仁散劑可顯著提高小鼠的耐缺氧能力。

表4 酸棗仁散對小鼠耐缺氧能力的影響（n=10）

2.4 酸棗仁散對小鼠耐高溫能力的影響 與對照組相比，酸棗仁散各給藥組均可以延長小鼠呼吸停止時間，中、高劑量組效果更好（P＜0.05）（表5）。結果表明，酸棗仁散可以提高小鼠耐高溫能力。

表5 酸棗仁散對小鼠耐高溫能力的影響（n=10）

2.5 酸棗仁散對小鼠的鎮痛作用 酸棗仁散低、高劑量組與對照組相比有一定鎮痛作用，但差異不顯著（表6）。

3 分析與討論

酸棗仁湯是傳統經典鎮靜安神方，已有文獻報道，酸棗仁煎劑在小劑量時能使實驗動物安靜，且鎮靜作用較恒定；稍大劑量則有催眠之效。其鎮靜、催眠作用的活性成分為水溶性的，對中樞神經系統的作用與安定藥頗為類似[5]。隋宏等研究表明，酸棗仁合劑可以增加入睡小鼠的動物數，抑制其自主活動和生理代謝[6]。本方在原酸棗仁方的基礎上加入神曲，并制成散劑。

表6 酸棗仁散對小鼠的鎮痛作用（n=10）

本實驗室藥效學試驗結果表明，酸棗仁散劑灌胃給藥后，與對照組相比，小鼠自主活動次數減少，且差異極顯著（P＜0.01），說明酸棗仁散有明顯的鎮靜作用，且高劑量組（15 g/kg 體重）效果更好。我們又進行了延長戊巴比妥鈉小鼠睡眠時間試驗，觀察到酸棗仁散各劑量組均具有延長戊巴比妥鈉小鼠睡眠時間的作用，并有劑量依賴性，高劑量（15 g/kg 體重）組效果最好（P＜0.01），表明酸棗仁散有明顯的催眠作用。小鼠耐缺氧試驗結果顯示，酸棗仁散各劑量組對常壓耐缺氧小鼠的存活時間與對照組相比顯著延長（P＜0.05），表明酸棗仁散劑可明顯增加小鼠耐缺氧能力，且高劑量組（15 g/kg 體重）效果更好。小鼠耐高溫試驗結果顯示，在高溫（45 ℃）下，酸棗仁散各劑量組小鼠存活時間與對照組相比均增加，且中劑量組（10 g/kg 體重）效果更好，表明酸棗仁散可以在一定程度上提高小鼠的耐高溫能力，但作用不顯著。鎮痛試驗結果顯示，酸棗仁散低、高劑量組痛閾值有一定的提高，但與對照組相比差異不顯著，表明酸棗仁散劑對小鼠有一定程度的鎮痛作用，但效果不明顯。綜上所述，本方劑酸棗仁散具有明顯的鎮靜、安定、催眠和耐缺氧作用；有一定程度的耐高溫和鎮痛作用，但效果不顯著，有待后續試驗進一步驗證。結合方劑組成分析，藥效學試驗結果與組方功能分解是相一致的，甚至有可能在實踐中起到其他功效。

本研究為酸棗仁散作為專用飼料添加劑用于仔豬斷奶、轉群及生產運輸[7]等提供一定的實驗依據，以期將環境應激的危害降低到最小，保證畜禽生產健康持續發展。

[1]許濟群，王綿之.方劑學[M].北京：人民衛生出版社，1995：306-309.

[2]洪庚辛，覃文才，曹斌，等.棗仁合劑的中樞抑制作用[J].中藥通報，1998，13（9）：42-44.

[3]陳其.中藥藥理研究方法學[M].2 版.北京：人民衛生出版社，2006：657-663.

[4]羅翔丹，潘風光，張鐵華，等.鹿茸多肽對小鼠耐缺氧和抗疲勞能力的影響[J].食品科學，2008，29（4）：386-388.

[5]王育虎.酸棗仁湯鎮靜催眠作用機理研究[D].濟南：山東中醫藥大學，2007.

[6]隋宏，張國慶，孫光，等.酸棗仁合劑的鎮靜安神作用研究[J].寧夏醫志，2007，29（11）：963-964.

[7]萬長榮，麻武仁，徐霄龍，等.酸棗仁合劑對運輸應激大鼠淋巴細胞亞群和Th 類細胞因子的調控作用[A].中國畜牧獸醫學會中獸醫學分會學術年會論文集[C]，哈爾濱，2013：12-17.