郝麗云（山西西山煤電集團有限責任公司職工總醫院藥劑科，太原 030053）

急性心肌梗死是指冠狀動脈急性閉塞，導致血流中斷引起的局部心肌缺血性壞死。在我國每年約有0.2‰～0.6‰的人發生急性心肌梗死，且發病率及死亡率在逐年升高。臨床上常規的治療通常為溶栓治療，但存在許多禁忌證如既往發生過出血性疾病、慢性嚴重高血壓病史、創傷等。羥苯磺酸鈣是一種通過抑制血管活性物質降低毛細血管通透性、抑制血小板聚集、降低血液黏稠度的藥物，多作為口服藥用于糖尿病視網膜病變的防治。近來，有研究發現羥苯磺酸鈣對糖尿病性心肌病、冠心病等心肌損傷亦有顯著的保護作用[1]。20世紀90年代Szlavy L和Httul K等[2-3]曾對羥苯磺酸鈣在急性心肌梗死早期的治療作用做了大量的實驗研究，但國內目前未見相關報道。本研究擬通過觀察靜脈注射羥苯磺酸鈣對急性心肌梗死早期模型大鼠的心肌損傷敏感性標志物（肌酸激酶、肌鈣蛋白[4]）及直接參與多種心血管疾病病理生理過程的血管活性物質（內皮素）的影響[5]，初步探索其治療心肌梗死的作用及機制，為臨床應用提供實驗依據。

1 材料

1.1 儀器

FA1004A 電子分析天平（上海精天電子儀器廠）；低溫離心機（美國Sigma 公司）；ARCHITECT i2000SR 全自動化學發光免疫分析儀（美國雅培公司）。

1.2 藥品與試劑

羥苯磺酸鈣膠囊（西安利君制藥責任有限公司，批號：1109221，規格：每粒0.5 g）；注射用重組鏈激酶（上海凱茂生物醫藥有限公司，批號：20120307，規格：每支10 萬U）；肌酸激酶檢測試劑盒（美國Sigma 公司）；肌鈣蛋白檢測試劑盒（美國雅培公司）；內皮素檢測試劑盒（北京泰格科信生物科技有限公司）。

1.3 動物

2 方法

2.1 急性心肌梗死模型的建立

取大鼠飼養7 d取其尾靜脈血，提取血漿凍存待用。大鼠腹腔注射0.2%肝素（2 mg/kg）、3%戊巴比妥鈉（45 mg/kg）麻醉大鼠，結扎冠狀動脈左前降支以建立急性心肌梗死模型。

2.2 分組與給藥

將建模成功的50只急性心肌梗死模型大鼠隨機分為模型組、陽性對照組和羥苯磺酸鈣低、中、高劑量組，每組10只。模型組大鼠尾靜脈注射生理氯化鈉溶液5 ml，陽性對照組大鼠注射鏈激酶4×104U/kg[6]，羥苯磺酸鈣低、中、高劑量組大鼠依次注射羥苯磺酸鈣200、400、800 mg/kg[2]。

2.3 取血與心肌梗死范圍檢測

術前和給藥后4、24、48、72 h 用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管取各組大鼠尾靜脈血，靜置15 min，3 000 r/min（離心半徑8 cm）離心10 min，分離血漿，－80 ℃低溫保存，用于后續化學發光測定。于給藥后72 h時取各組大鼠心臟，稱心室質量；將心室橫切4～5 片，在37 ℃恒溫水浴條件下，置于氯化硝基四氮唑磷酸緩沖液（NBT）中染色，非梗死區染為藍色，梗死組織呈不染色狀態；將染色部分去除后，稱量梗死組織的質量，計算心肌梗死范圍＝梗死組織質量/心室質量×100%[7]。

2.4 生化指標的檢測

化學發光法采用雅培ARCHITECT i2000SR 全自動化學發光免疫分析儀，統一檢測各組大鼠血漿中的肌酸激酶、肌鈣蛋白和血管內皮素的濃度。

2.5 統計學分析

3 結果

3.1 一般狀況

5 組大鼠均在實驗過程中有死亡發生。模型組和羥苯磺酸鈣低劑量組死亡2 只，羥苯磺酸鈣中、高劑量組和陽性對照組均死亡1 只。死亡原因涉及麻醉過深、術中出血過多、急性心肌梗死后誘發心律失常等。

3.2 心肌梗死范圍

模型組、陽性對照組和羥苯磺酸鈣低、中、高劑量組大鼠在急性心肌梗死發生72 h 后的心肌梗死范圍分別為（29.7±5.1）%、（18.3±5.8）%、（25.8±6.3）%、（17.9±4.5）%、（17.6±3.9）%。與模型組比較，陽性對照組和羥苯磺酸鈣中、高劑量組大鼠的心肌梗死范圍明顯減小（P＜0.01），羥苯磺酸鈣低劑量組大鼠的心肌梗塞范圍差異無統計學意義（P＞0.05），其中陽性對照組與羥苯磺酸鈣中、高劑量組間比較差異無統計學意義（P＞0.05）。各組大鼠心肌梗死面積的染色圖見圖1。

圖1 各組大鼠心肌梗死面積的染色圖A.模型組；B.羥苯磺酸鈣低劑量組；C.羥苯磺酸鈣中劑量組；D.羥苯磺酸鈣高劑量組；E.陽性對照組Fig 1 Myocardial infarction area staining of rats in each groupA.model group；B.calcium dobesilate low-dose group；C.calcium dobesilate medium-dose group；D.calcium dobesilate high-dose group；E.positive control group

3.3 血漿中肌酸激酶、肌鈣蛋白的變化

在急性心肌梗死發生后4～72 h 內，5 組大鼠血漿中肌酸激酶、肌鈣蛋白的濃度均較術前（即0 h）明顯增加，并在24 h時達到峰值。同時組間比較顯示，羥苯磺酸鈣中、高劑量組和陽性對照組上述指標在心肌梗死后各時間點的水平均較模型組明顯降低，差異具有統計學意義（P＜0.05），且羥苯磺酸鈣中、高劑量組大鼠血漿中肌酸激酶的水平呈現出在心肌梗死后先高于陽性對照組、后于48 h 時低于陽性對照組的趨勢。各組大鼠血漿中肌酸激酶和肌鈣蛋白的濃度比較見表1、表2。

表1 各組大鼠血漿中肌酸激酶的濃度比較（）Tab 1 Comparison of plasma concentrations of creatine kinase of rats in each group（）

表1 各組大鼠血漿中肌酸激酶的濃度比較（）Tab 1 Comparison of plasma concentrations of creatine kinase of rats in each group（）

注：與0 h比較，＊P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05Note：vs.0 h，＊P＜0.05；vs.model group，#P＜0.05

表2 各組大鼠血漿中肌鈣蛋白的濃度比較（）Tab 2 Comparison of plasma concentrations of troponin of rats in each group（）

表2 各組大鼠血漿中肌鈣蛋白的濃度比較（）Tab 2 Comparison of plasma concentrations of troponin of rats in each group（）

注：與0 h比較，＊P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05Note：vs.0 h，＊P＜0.05；vs.model group，#P＜0.05

3.4 血漿中內皮素的變化

內皮素是一種縮血管物質，是調節心血管功能的重要因子。檢測結果表明，5組大鼠血漿中的內皮素濃度均較術前（0 h）明顯增加，差異具有統計學意義（P＜0.05）。同時，與模型組比較，羥苯磺酸鈣中、高劑量組和陽性對照組大鼠血漿中的內皮素濃度明顯減少，差異具有統計學意義（P＜0.05）；但羥苯磺酸鈣中、高劑量組與陽性對照組比較差異無統計學意義（P＞0.05）。各組大鼠血漿中內皮素的濃度比較見表3。

表3 各組大鼠血漿中內皮素的濃度比較（）Tab 3 Comparison of plasma concentration of endothelin of rats in each group（）

表3 各組大鼠血漿中內皮素的濃度比較（）Tab 3 Comparison of plasma concentration of endothelin of rats in each group（）

注：與0 h比較，＊P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05Note：vs.0 h，＊P＜0.05；vs.model group，#P＜0.05

4 討論

急性心肌梗死是指因心肌缺血所致的部分心肌急性壞死，常常引發嚴重的并發癥如急性循環功能障礙、心率失常、心功能衰竭、嚴重低血壓及休克。本實驗通過結扎冠狀動脈前降支建立急性心肌梗死大鼠模型，5組大鼠均有死亡現象發生。在成功建立的模型基礎上，本實驗觀察了各組大鼠的心肌梗死范圍，結果表明羥苯磺酸鈣中、高劑量組與陽性對照組均可顯著縮小由于心肌缺血所致的梗死范圍。

急性心肌梗死發生發展的過程中還常伴隨著一些特異性標記物的升高，其中肌酸激酶、肌鈣蛋白是診斷急性心肌梗死發生時的敏感指標。肌酸激酶又稱磷酸肌酸激酶，主要存在于骨骼肌和心肌中，常在在胸痛發作后3～60 h 開始升高、12～24 h 達到峰值、3～4 d 恢復正常，其陽性結果對急性心肌梗死肯定診斷價值可達92%以上[4]。肌鈣蛋白是心肌肌原纖維的調節蛋白，為心臟的特異性蛋白。當心肌細胞因缺血、缺氧發生損傷時，肌鈣蛋白通過破損細胞膜釋放入血，在血中出現較早，持續時間長。本研究在大鼠心肌梗死發生前及發生后4、24、48、72 h 分別檢測了其血液中肌酸激酶、肌鈣蛋白的濃度。實驗結果表明，在急性心肌梗死發生后肌酸激酶、肌鈣蛋白濃度均增加的基礎上，羥苯磺酸鈣中、高劑量組的上升趨勢顯著降低，與陽性對照組差異無統計學意義。

另外，筆者還檢測了大鼠血漿中內皮素的含量。內皮素是一種強烈的縮血管物質，其引起的血管收縮、心肌缺血、代謝紊亂和細胞增殖是許多心血管疾病的共同致病因素。近年來越來越多的研究肯定了羥苯磺酸鈣對糖尿病性心肌病、冠心病等心肌損傷均有顯著的保護作用[8-10]；且相較于傳統鏈激酶等溶栓治療存在諸多禁忌，羥苯磺酸鈣的應用更為廣泛。本實驗結果表明，急性心肌梗死發生后5組大鼠血漿中內皮素濃度均明顯升高，提示內皮素可能參與了心肌梗死的發生發展；與模型組比較，羥苯磺酸鈣中、高劑量組和陽性對照組大鼠心肌梗死后血漿內皮素的濃度顯著降低（P＜0.05），羥苯磺酸鈣低劑量組差異無統計學意義（P＞0.05）。

綜上所述，合適劑量的羥苯磺酸鈣可通過降低內皮素的釋放、抑制血管收縮以及降低毛細血管通透性、血液黏滯性和血小板活性，顯著降低心肌梗死時特異性標志物的濃度，在大鼠急性心肌梗死發生的早期發揮保護心肌細胞的作用。其具體作用機制仍需后續研究進一步探討。

[1]張成珍，張玉俠.羥苯磺酸鈣的應用進展[J].醫藥導報，2012，31（9）：1 181.

[2]Szlavy L，Repa I，Lengye I，et al.Effects of intravenous streptokin-ase and CLS 2210（calcium dobesilate）on the biochemical markers of early acute myocardial infarction：a historic comparison with both studies[J].Angiology，1992，43（9）：741.

[3]Huttl K，Hollenberg NK.Effect of CLS 2210（calcium dobesilate）on survival and myocardial infarction size in the rat：influence of dose and duration of treatment[J].Cardiology，1992，80（1）：28.

[4]岳玉武.急性心肌梗死生化標志物研究進展[J].內蒙古醫學雜志，2013，45（4）：460.

[5]肖繼明，陳銳華，徐軍，等.急性心肌梗死患者血漿中早內皮素的動態變化及意義[J].醫學研究生學報，2007，20（3）：331.

[6]廖昌龍，李啟運，李雄根.尿激酶和鏈激酶對大鼠血小板功能的影響[J].中國病理生理雜志，2002，18（4）：426.

[7]李智，于曉風，曲紹春，等.西洋參葉20s-原人參三醇組皂苷對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用[J].吉林大學學報，2009，35（1）：51.

[8]趙玉勤，朱銳，吳校林，等.羥苯磺酸鈣治療高血壓性心臟病72例[J].醫藥導報，2013，32（8）：1 025.

[9]張偉河.羥苯磺酸鈣在冠脈慢血流中的應用[J].中國傷殘醫學，2013，21（11）：491.

[10]李波，高美娟，張潔，等.2，5-二羥苯磺酸鈣對糖尿病大鼠心肌保護作用的研究[J].山東大學學報：醫學版，2009，47（10）：9.