糖尿病視網膜病變患者血清VEGF、NO的變化及臨床意義

糖尿病視網膜病變患者血清VEGF、NO的變化及臨床意義

王春雁

(寧河縣縣醫院 眼科,天津301500)

糖尿病性視網膜病變(diabeticretinopathy，DR)最常見的視網膜血管病，是50歲以上人群主要致盲眼病之一。早期無自覺癥狀，病變發展到黃斑后出現不同程度的視力減退。視網膜微循環障礙、進展性微血管病變是DR主要的病理基礎[1]。DR也是慢性炎癥過程，炎癥因子和氧化損傷貫穿于DR發病的整個過程。已有文獻報道，血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)參與了DR的發生與發展，但關于VEGF、一氧化氮(nitric oxide，NO)與DR的關系研究甚少。本研究通過觀察DR患者血清VEGF、NO的變化，探討兩者在DR發病中的臨床意義。

1資料與方法

1.1　一般資料

選擇2010年9月-2013年9月我院收治90例糖尿病患者，分為無DR組、背景型DR組、增生型DR組，每組30例。無DR組：男16例，女14例；年齡46.5-55.0歲，平均年齡(48.3±4.7)歲；病程9.0-17.5年，平均病程(14.0±6.5)年。背景型DR組：男15例，女15例；年齡46.0-54.6歲，平均年齡(48.5±4.3)歲；病程9.3-16.5年，平均病程(13.5±6.0)年。增生型DR組：男16例，女14例；年齡45.6-55.3歲，平均年齡(48.0±5.0)歲；病程9.0-16.9年，平均病程(14.2±6.4)年。對照組：另選擇同期健康體檢者30例為對照組，男15例，女15例；年齡46.3-54.9歲，平均年齡(48.0±4.5)歲，無全身系統疾病史及眼部疾病，肝腎功能、血糖、血脂等血生化均在正常范圍內。經方差檢驗，糖尿病各組與對照組間在年齡上無顯著性差異(F=2.63，P>0.05)。糖尿病三組患者性別、年齡、病程等比較，差異均無統計學意義，具有可比性。

1.2　血清采集

所有研究對象采血前禁食水10 h，次日清晨抽取空腹肘正中靜脈血5 ml，置于速凝管中，低溫離心機上(離心速度3 000 r/min，離心半徑15 cm)離心10 min，移液器小心吸取上清液，移入已消毒的Eppendorf 管中，密封，凍存于-80℃低溫冰箱待測[2]。

1.3　ELISA法檢測血清VEGF

血清VEGF試劑盒購自美國R&D公司。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測各組血清VEGF。具體步驟如下：取出已包被一抗的微孔板，加樣本或不同濃度的標準品至孔中，封板，37℃或常溫孵育1-2 h，手工洗板，加入生物素化二抗至孔中，封板37℃或常溫孵育1 h，手工洗板，加入酶標親和素至孔中，封板(37℃或常溫孵育30 min-1 h)，手工洗板，加入底物顯色劑至孔中作用15-30 min，加入終止液,酶標儀讀取吸光度值(OD值)。

1.4　硝酸還原酶法檢測血清NO變化

NO試劑盒購自南京建成生物技術研究所。測定原理：NO化學性質活潑，在體內代謝很快轉為NO2-和NO3-，而NO2-又進一步轉化為NO3-，硝酸還原酶能特異性地將NO3-還原為NO2-，通過顯色深淺測定其濃度的高低。

1.5　統計學處理

2結果

糖尿病視網膜病變患者血清VEGF、NO的變化 無DR組、背景型DR組和增生型DR組血清VEGF水平均明顯高于對照組(P<0.05)；背景型DR組和增生型DR組血清VEGF水平差異無統計學意義(P>0.05)，但均高于無DR組(P<0.05)。無DR組、背景型DR組和增生型DR組血清NO水平均明顯低于對照組(P<0.05)；背景型DR組和增生型DR組血清NO水平差異無統計學意義(P>0.05)，但均低于無DR組(P<0.05),見表1。

表1　　糖尿病視網膜病變患者血清VEGF、NO的

注:與對照組比較*P<0.05,**P<0.05;與無DR組比較▲P<0.05

3討論

DR的病變進展始于視網膜血管化。主要病理改變包括視網膜炎癥、血管滲透性增加、視網膜表面異常血管新生[5]。DR的發生與糖尿病的病程和血糖控制程度有關，而與糖尿病患者的性別、發病年齡、糖尿病類型關系不大。約25%的糖尿病患者有DR，約5%為增殖性病變。

VEGF是特異性促進血管內皮細胞生長的細胞因子，在糖尿病患者視網膜缺血缺氧病變、新生血管形成過程中起重要作用[4]。NO是血管舒張因子，由L-精氨酸和氧氣經NO合成酶(NOS)催化而成。內皮細胞、腦來源的NOS為原生酶，能產生擴張血管的NO，是調控血管功能的關鍵，與DR的發生發展密切相關。糖尿病患者血清VEGF增多，提示血管內皮細胞增生活躍，導致視網膜等靶器官的微循環障礙，促進視網膜微血管病變的進展。糖尿病患者血清NO減少有三個主要原因：首先，因血管內皮細胞合成NO的能力下降；其次，也可能與NO的底物不足、NOS輔因子缺乏及醛糖還原酶活性增加有關；第三，糖尿病時生成的某些物質如氧自由基、糖基化終產物對NO的滅活[5]。

綜上所述，糖尿病患者血清VEGF水平增高、NO水平降低，聯合檢測血清VEGF、NO有助于DR患者病情評估。但DR發病過程中，VEGF與NO的動態變化及與DR發病的相關性尚有待進一步深入研究。

參考文獻：

[1]游逸安,許雯怡,朱樂如.增殖性糖尿病視網膜病變玻璃體與血清SDF-1、VEGF含量分析[J].醫學臨床研究,2013,42(1):100.

[2]姜艷靜.探討血清SDF-1,VEGF與糖尿病視網膜病變的相關性[J].中國醫藥指南,2014,12(4):113.

[3]邵紅,石琳琳.糖尿病視網膜病變患者血清Scd163水平以及SOD活性的變化及臨床意義[J].中國實驗診斷學,2014,18(9):1481.

[4]單俊杰,袁志蘭,曹國平.血清中VEGF 和bFGF水平與糖尿病視網膜病變關系的臨床研究[J].國際眼科雜志,2011,11(12):2097.

[5]董娟,郎平,吳昌凡.一氧化氮和一氧化氮合酶基因多態性與糖尿病視網膜病變[J].國際眼科雜志,2010,10(11):2144.

收稿日期：(2013-12-24)

文章編號：1007-4287(2015)01-0094-02