膽汁及血清TNF-α和IL-6的在急性梗阻性化膿性膽管炎患者中的表達(dá)及意義

膽汁及血清TNF-α和IL-6的在急性梗阻性化膿性膽管炎患者中的表達(dá)及意義

潘昌如,劉會(huì)怡*

(鄂州市第三醫(yī)院 外科,湖北 鄂州436000)

急性梗阻性化膿性膽管炎(AOSC)是因?yàn)槟懝芄Ｗ杓凹?xì)菌感染，膽管內(nèi)壓升高，肝臟膽血屏障受損，大量細(xì)菌及毒素進(jìn)入血循環(huán)，導(dǎo)致以肝膽系統(tǒng)病損為主，合并多器官損傷的全身嚴(yán)重感染性疾病。AOSC時(shí)內(nèi)毒素和脂多糖會(huì)刺激巨噬細(xì)胞及庫(kù)普弗細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10等；細(xì)胞因子再進(jìn)一步引起機(jī)體代謝紊亂，微血管通透性增強(qiáng)，組織血液灌注減少，血液凝固性增高，最終造成多器官功能不全綜合征(MODS)甚至死亡。本研究采用我院收治的行ERC檢查治療的急性梗阻性化膿性膽管炎確診患者38例作為研究組，同期因反復(fù)發(fā)作性上腹部疼痛入院行ERCP檢查但未發(fā)現(xiàn)化膿性膽管炎病變的受試者38例作為對(duì)照組，觀察分析兩組患者TNF-α、 IL-6水平變化,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1對(duì)象與方法

1.1　對(duì)象

選擇2011年7月—2013年6月我院收治的行ERCP檢查治療的急性梗阻性化膿性膽管炎患者38例作為研究組，其中男性24例，女性14例，年齡25-79歲，平均年齡(52.2±17.7)歲。同時(shí)選取因反復(fù)發(fā)作性上腹部疼痛入院行ERCP檢查但未發(fā)現(xiàn)化膿性膽管炎病變的患者38例作為對(duì)照組，其中男性26例，女性12例，年齡29-76歲，平均年齡(47.4±14.7)歲。兩組患者性別構(gòu)成、年齡等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。兩組患者均排除其他可能導(dǎo)致全身或局部炎癥反應(yīng)的疾病，所有患者均簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2　檢測(cè)方法

1.2.1試劑及儀器BS-110型電子天平(北京賽多科斯天平有限公司)，低溫超速離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)，TNF-α、 IL-6酶聯(lián)免疫試劑盒(美國(guó)R&D公司)。

1.2.2標(biāo)本的采取與TNF-α及IL-6檢測(cè)兩組患者診斷性逆行膽管造影(ERCP)術(shù)中插管后，注入水和造影劑前，采集膽汁5 ml，同時(shí)采集靜脈血5 ml。研究組患者在術(shù)后第1天、術(shù)后第3天通過(guò)經(jīng)內(nèi)鏡鼻膽管引流術(shù)(ENBD)采集膽汁5 ml， 4℃離心標(biāo)本，將分離后的標(biāo)本置于-80℃冰箱保存，術(shù)后第4天采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)對(duì)IL-6、TNF-α 進(jìn)行統(tǒng)一檢測(cè)。

1.3　觀察指標(biāo)

測(cè)定術(shù)中研究組和對(duì)照組患者膽汁TNF-α、IL-6和血清TNF-α、IL-6水平，測(cè)定研究組患者術(shù)中(T1)、術(shù)后第1天(T2)和術(shù)后第3天(T3)膽汁TNF-α、IL-6水平。

1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2結(jié)果

2.1　兩組患者術(shù)中TNF-α及IL-6水平比較

研究組膽汁TNF-α、IL-6和血清TNF-α、IL-6水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。該結(jié)果提示，急性梗阻性化膿性膽管炎患者膽汁及血清TNF-α、IL-6水平升高，見表1。

組別n膽汁TNF-α膽汁IL-6血清TNF-α血清IL-6對(duì)照組384.04±2.217.49±3.918.17±2.3114.94±4.75研究組38178.43±27.01*204.31±41.59*184.32±27.46*411.29±79.94*

注：*與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

2.2　研究組患者術(shù)后膽汁TNF-α、IL-6水平變化情況

研究組患者術(shù)后第3天膽汁TNF-α、IL-6水平低于術(shù)中、術(shù)后第1天，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；研究組患者術(shù)后第1天膽汁TNF-α、IL-6水平低于術(shù)中，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示，急性梗阻性化膿性膽管炎患者膽汁炎性因子會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，TNF-α、IL-6水平與急性梗阻性化膿性膽管炎病理過(guò)程密切相關(guān)，見表2。

表2　研究組患者術(shù)后膽汁TNF-α、IL-6水平變化

注：*與T1比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；#與T1比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05

3討論

膽汁中的細(xì)胞因子炎癥介質(zhì)主要由肝細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和膽道上皮細(xì)胞產(chǎn)生，AOSC患者炎性細(xì)胞激活、多種炎性介質(zhì)產(chǎn)生和釋放，致使細(xì)胞因子發(fā)生級(jí)聯(lián)瀑布反應(yīng)，引起全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)，最終造成多器官功能不全綜合征(MODS)甚至死亡。在膿毒血癥的病理發(fā)展過(guò)程中，TNF-α是機(jī)體最早分泌的細(xì)胞因子，是炎癥介質(zhì)連鎖反應(yīng)中最早啟動(dòng)的因子，也是很多炎性反應(yīng)的中心介質(zhì)，TNF-α刺激中性粒細(xì)胞產(chǎn)生超氧化物、彈力蛋白酶、PAF、PLA2等參與全身炎癥反應(yīng)；TNF-α是機(jī)體免疫保護(hù)的重要介質(zhì)，但也可能造成機(jī)體的免疫病理?yè)p傷，在免疫性疾病的發(fā)病病理機(jī)制中具有重要的臨床意義，正常水平的TNF-α可以起到調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、促進(jìn)組織修復(fù)、抗感染、引起腫瘤細(xì)胞凋亡等作用，但如果機(jī)體大量產(chǎn)生和釋放TNF-α則可能破壞機(jī)體自身的免疫平衡，與其他炎癥因子共同作用造成多種病理?yè)p傷。IL-6是機(jī)體損傷和修復(fù)過(guò)程中產(chǎn)生的一種急性期反應(yīng)介質(zhì)，會(huì)使中性粒細(xì)胞釋放彈力蛋白酶能力增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞毒性作用增強(qiáng)，IL-6水平升高常見于急性期蛋白的出現(xiàn)，IL-6是一種炎癥反應(yīng)的早期指標(biāo)，細(xì)菌、病毒感染均可導(dǎo)致體內(nèi)IL-6表達(dá)增加， IL-6也有多重生物學(xué)作用，一方面有明顯生理作用，另一方面又參與多種疾病的病理過(guò)程，且IL-6水平和病情嚴(yán)重程度相關(guān)。IL-6水平急劇升高對(duì)患者是一個(gè)危險(xiǎn)信號(hào)，正常人外周血清中IL-6濃度很低，因?yàn)橛贗L-6進(jìn)入人體外周血后很快失活，而急性期機(jī)體外周血IL-6濃度會(huì)急劇升高。TNF-α具有廣泛的生物學(xué)活性，同時(shí)TNF-α也會(huì)誘發(fā)IL-6等炎性介質(zhì)產(chǎn)生，并進(jìn)一步激發(fā)炎癥連鎖反應(yīng)，發(fā)生級(jí)聯(lián)瀑布反應(yīng)。

本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組膽汁TNF-α、膽汁IL-6、血清TNF-α、血清IL-6均高于對(duì)照組，研究組急性梗阻性化膿性膽管炎患者膽汁炎性因子會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)降低。該結(jié)果說(shuō)明急性梗阻性化膿性膽管炎會(huì)發(fā)生炎癥反應(yīng)，使機(jī)體產(chǎn)生大量的TNF-α、IL-6，與急性梗阻性化膿性膽管炎病理過(guò)程密切相關(guān)，應(yīng)注意控制急性梗阻性化膿性膽管炎患者發(fā)生細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)瀑布反應(yīng)，造成嚴(yán)重不良后果。此外，研究組急性梗阻性化膿性膽管炎患者膽汁炎性因子會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)降低提示ERCP術(shù)可以有效控制急性梗阻性化膿性膽管炎患者炎性反應(yīng)，臨床病癥恢復(fù)較快，值得臨床推廣應(yīng)用。

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收稿日期：(2013-12-14)

通訊作者*

文章編號(hào)：1007-4287(2015)01-0062-03