EGFR和VEGF聯(lián)合檢測對評估乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的意義

EGFR和VEGF聯(lián)合檢測對評估乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的意義

王春艷

(北京市大興區(qū)人民醫(yī)院 病理科，北京102600)

乳腺癌是臨床常見女性惡性腫瘤，是導(dǎo)致女性腫瘤患者死亡的重要疾病[1]，且發(fā)病率呈增長趨勢，年齡呈年輕化趨勢[2]，本病的發(fā)病機制比較復(fù)雜，發(fā)病原因也較多，表皮生長因子受體和血管內(nèi)皮生長因子的過度表達可能為乳腺癌發(fā)病和轉(zhuǎn)移的重要分子生物學(xué)基礎(chǔ)[3-4]。表皮生長因子受體(EGFR)是正常細胞生長、分化和存活的重要調(diào)節(jié)因子，但當其過度表達時則可能發(fā)生腫瘤，EGFR水平高低與疾病的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后以及對化療的敏感性密切相關(guān)，同時EGFR激活還能促進血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等血管形成因子的生成，釋放更多的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)，降解細胞外基質(zhì)，導(dǎo)致腫瘤浸潤。VEGF是最強的促血管內(nèi)皮細胞分裂劑，與其的受體結(jié)合傳導(dǎo)信號刺激血管形成，血管生成對腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移至關(guān)重要，是腫瘤增殖與發(fā)生轉(zhuǎn)移的主要影響因素，同時VEGF還能促進腫瘤生長、阻礙宿主特異性抗原提呈細胞的成熟，致使腫瘤細胞得以逃避免疫反應(yīng)[5]。因而，對EGFR、VEGF的定性或定量檢測對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移研究，評價乳腺癌的預(yù)后因素，或研制特異性的單克隆抗體成為研究熱點。本文通過定性、定量檢測正常乳腺、乳腺增生、原發(fā)乳腺癌、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞中EGFR和VEGF的表達情況，探索一種具有良好的靈敏性和特異性的乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷方法，現(xiàn)將結(jié)果分析如下。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧分析本院2012年1月至2013年6月收治的85例乳腺癌患者的病例資料，具備完整臨床資料和病理診斷資料，包括淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、免疫組化結(jié)果，均為女性，年齡為30-80(46.5±10.7)歲，左側(cè)乳腺36例，占42.35%，右側(cè)乳腺49例，占57.65%，腫瘤直徑為1.4-14(3.92±2.18)cm，病理學(xué)分類為乳腺浸潤性導(dǎo)管癌56例(65.88%)，導(dǎo)管內(nèi)癌伴早期浸潤29例(34.12%)，組織學(xué)分級I級(高分化)18例，占21.17%，II級(中分化)33例，占38.82%，III級34例，占40%，TNM臨床分期為0期3例，占3.53%，I期9例,10.59%，Ⅱ期49例，占57.65%，III期24例，占28.24%，液淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有41例，占48.24%，未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有44例，占51.76%，其中轉(zhuǎn)移1-3個同側(cè)液淋巴結(jié)18例，占21.18%，轉(zhuǎn)移4-9個16例，占18.82%，轉(zhuǎn)移≥10個的有7例，占8.24%，同期納入30例乳腺正常組織和30例乳腺增生組織作為對照。

1.2方法

將新鮮的乳腺腫瘤組織固定于10%中性甲醛液內(nèi)(過夜)，常規(guī)石蠟包埋，以4微米厚度每個石蠟塊切3張病理切片，裱片后37℃保存、待染，其中兩張作免疫組化用，一張作常規(guī)HE染色，試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)公司，嚴格按照試劑盒規(guī)程要求進行染色，陽性對照為已知EGFR和VEGF陽性切片，陰性對照以PBS代替1抗，EGFR和VEGF以細胞膜或胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，然后再應(yīng)用Leica QS00MC圖像分析系統(tǒng)進行定量免疫組化，在40倍物鏡下，每個樣本隨機選取20個視野，取每個視野PU值的均值作為此樣本的陽性單位PU值。

1.3觀察指標

比較分析正常乳腺、乳腺增生、原發(fā)乳腺癌的EGFR和VEGF表達差異，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的EGFR和VEGF陽性率差異，EGFR和VEGF共同表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系，乳腺癌原發(fā)灶與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的EGFR和VEGF表達差異，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與EGFR和VEGF表達關(guān)系。

1.4統(tǒng)計分析

將數(shù)據(jù)錄入SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率表示，進行卡方分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，多組均數(shù)間的比較采用單因素方差分析(F檢驗),兩組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1正常乳腺、乳腺增生、原發(fā)乳腺癌的EGFR和VEGF PU值比較

正常乳腺組、乳腺增生組、原發(fā)乳腺癌組的EGFR和VEGF PU值存在顯著差異，F(xiàn)=178.224、67.701，P均<0.01，原發(fā)乳腺癌組的EGFR和VEGF PU值明顯高于正常乳腺組、乳腺增生組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P均<0.01，結(jié)果見表1。

表1　正常乳腺、乳腺增生、原發(fā)乳腺癌的EGFR

注：與正常乳腺比較，*P<0.05,**P<0.01,與原發(fā)乳腺癌比較，#P<0.05,##P<0.01

2.2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的EGFR和VEGF陽性率差異

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移EGFR和VEGF陽性率差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義，χ2=31.039和20.913,P均<0.05,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移EGFR和VEGF陽性率明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移，結(jié)果見表2。

表2　淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否的EGFR和VEGF陽性率差異

2.3EGFR和VEGF共同表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

EGFR(+)VEGF(+)共同表達的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高于EGFR(+)VEGF(-)、EGFR(-)VEGF(-)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，χ2=4.660、15.267,P均<0.05，結(jié)果見表3。

表3　EGFR和VEGF共同表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

2.4乳腺癌原發(fā)灶與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的EGFR和VEGF

乳腺癌原發(fā)灶EGFR和VEGF PU值均明顯高于轉(zhuǎn)移灶，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P均<0.01，結(jié)果見表4。

表4　乳腺癌原發(fā)灶與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的

2.5淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與EGFR和VEGF表達關(guān)系

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量越多，EGFR和VEGF PU值越高，結(jié)果見表5。

表5　淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與EGFR和VEGF表達關(guān)系

3討論

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，隨著診療技術(shù)的發(fā)展，乳腺癌診斷陽性率明顯升高，已位居女性惡性腫瘤發(fā)病率之首，對廣大女性患者的健康及生命安全造成極大影響。腫瘤血管形成的調(diào)控與多種因子表達密切相關(guān)，其中EGFR、VEGF是兩種最關(guān)鍵的因子，EGFR是表皮生長因子，其過度表達可抑制腫瘤細胞凋亡，VEGF作為血管新生和血管生長的一個主要的調(diào)節(jié)因子，EGFR還能通過增加VEGF的表達或與其協(xié)同作用促使腫瘤內(nèi)新生血管形成，兩種因子的過度表達均對癌細胞生長、轉(zhuǎn)移有明顯的促進作用。

本文結(jié)果顯示，正常乳腺組、乳腺增生組、原發(fā)乳腺癌組的EGFR和VEGF PU值存在顯著差異，原發(fā)乳腺癌組的EGFR和VEGF PU值明顯高于正常乳腺組、乳腺增生組，表明EGFR和VEGF在乳腺癌中高表達，明顯高于正常乳腺和乳腺增生，隨著乳腺組織的增生、惡變，EGFR和VEGF的表達程度隨著增強，無新生血管的腫瘤組織只能長到直徑2-3 mm,腫瘤生長緩慢且限于局部浸潤,當腫瘤進入血管期，腫瘤迅速增大進而發(fā)生擴散轉(zhuǎn)移[5],因而，EGFR和VEGF 在乳腺癌的發(fā)生、起源階段起著較強的促進作用。

本文結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移EGFR和VEGF陽性率差異明顯,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移EGFR和VEGF陽性率明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移，表明EGFR、VEGF過表達與乳腺癌的高侵襲轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)，其表達程度與患者的生存率成負相關(guān)[6]，二者可作為乳腺癌預(yù)后不良的評判指標之一,同時針對EGFR的多抗EGFR抗體和小分子酪氨酸激酶抑制劑研制也已在臨床試驗[7]。

本文結(jié)果顯示，EGFR(+)VEGF(+)共同表達的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高于EGFR(+)VEGF(-)、EGFR(-)VEGF(-)，表明EGFR與VEGF的表達呈現(xiàn)一定的正相關(guān)性，EGFR激活可介導(dǎo)EGF等血管形成因子的生成[8]。

本文結(jié)果顯示，乳腺癌原發(fā)灶EGFR和VEGF PU值均明顯高于轉(zhuǎn)移灶，且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量越多，EGFR和VEGF PU值越高，表明，EGFR和VEGF的表達對乳腺癌的淋巴轉(zhuǎn)移起著一定促進作用，EGFR和VEGF的表達越高，該乳腺癌的侵襲性更高，更具有早期向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和容易復(fù)發(fā)的傾向，同時EGFR和VEGF在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的作用還需要其他轉(zhuǎn)移促進因子的配合，因而，EGFR和VEGF可作為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的篩選指標

綜上所述，EGFR和VEGF在乳腺癌的發(fā)生、起源階段、轉(zhuǎn)移起著較強的促進作用，聯(lián)合檢測EGFR和VEGF對評估乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有重要意義，EGFR和VEGF表達越高，表明乳腺癌組織的惡性程度更高、侵襲性更強，均可作為臨床病情判斷、預(yù)后評估、靶向治療效果評價的客觀指標。

參考文獻：

[1]Ahmedin Jemal，Rebecca Siegel，Elizabeth Ward，et al．Cancer Statistics，2008[J]．CA Cancer J Clin，2008，58：71.

[2]張思維，陳萬青，孔靈芝，等．中國部分市縣2003年惡性腫瘤發(fā)病年度報告[J]．中國腫瘤，2007，16(7)：494.

[3]Tsutsui S，Chno S，Murakami S，et al．Prognostic significance of the combination of biological parameters in breast cancer[J]．Surg Today，2003，33(2)：151.

[4]趙紅軍,張延新,杜華貞,等.乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中COX-2、VEGF-C和VEGFR-3的表達及其意義[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志,2010,26(5):613.

[5]Folkman J．Angiogenesis[J]．Annu Rev Med，2006，57：1.

[6]熊立新.VEGF和EGFR在青年乳腺癌的表達及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].中國普通外科雜志,2012,21(5):614.

[7]Cunningham D，Humblet Y，Siena S，et al．Cetuximab monotherapy and cetuximab plus irinotecan in irinotecan．refractory metastatic colorectal cancer[J]．N Engl J Med，2004，351：337.

[8]劉正泉,薄愛華.VEGF、EGFR和UPA在乳腺癌表達的意義及其相關(guān)性[J].中國老年學(xué)雜志,,2010,30(23):3444.

收稿日期：2013-12-17)1007-4287(2015)03-0443-02

文章編號：1007-4287(2015)03-0440-03 (