白介素-1與β2防御素對(duì)胎膜早破合并羊膜腔感染預(yù)測(cè)的意義

楊麗娜，王　凡，于海燕，金海鴻，逯慶玲

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

白介素-1與β2防御素對(duì)胎膜早破合并羊膜腔感染預(yù)測(cè)的意義

楊麗娜，王凡，于海燕，金海鴻，逯慶玲

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0412)

胎膜早破(Premature Rupture of Membrane,PROM)指臨產(chǎn)前胎膜發(fā)生破裂，其發(fā)生率國(guó)外5%-15%，國(guó)內(nèi)2.7%-17%，并呈逐年上升趨勢(shì)，常致早產(chǎn)、圍生兒死亡、宮內(nèi)及產(chǎn)后感染率升高，是威脅母兒健康的一個(gè)常見(jiàn)產(chǎn)科并發(fā)癥。胎膜早破后是否及時(shí)發(fā)現(xiàn)羊膜腔感染，適時(shí)終止妊娠對(duì)于孕婦及新生兒的預(yù)后有重要的意義，本研究探討白介素-1(IL-1)與β2防御素(HBD-2)對(duì)胎膜早破合并羊膜腔感染預(yù)測(cè)的意義，為臨床預(yù)測(cè)PROM后的宮內(nèi)感染提供新的理論依據(jù)和檢測(cè)手段。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象選擇2012年6月-2013年6月在黑龍江省醫(yī)院產(chǎn)科病房因胎膜早破住院分娩孕婦42例，其中足月胎膜早破22例，未足月胎膜早破20例，同時(shí)選擇與胎膜早破組孕周相近的20例非胎膜早破孕婦作為對(duì)照組。兩組在年齡，孕周，孕產(chǎn)次比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)表1)。根據(jù)胎膜的病理診斷報(bào)告，將胎膜早破組分為絨毛膜羊膜炎(Histological chorioamnionitis,HCA)組18例和非HCA組24例。孕婦納入標(biāo)準(zhǔn)參照人民衛(wèi)生出版社出版的《婦產(chǎn)科學(xué)》第七版。HCA診斷標(biāo)準(zhǔn)為鏡下絨毛膜及羊膜被中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)且胎盤(pán)絨毛膜板晦暗或不透明[2]。

1.2標(biāo)本采集(1)血清：患者在妊娠結(jié)束前抽取肘靜脈血5 ml，3 000轉(zhuǎn)/分，離心15分鐘，分離血清，置-20℃冰箱保存待檢。(2)胎膜：患者妊娠結(jié)束后取破裂口周邊胎膜組織2 cm×2 cm送檢黑龍江省醫(yī)院病理科以確定有無(wú)組織學(xué)絨毛膜羊膜炎。

1.3實(shí)驗(yàn)方法采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各研究組對(duì)象血清β2防御素、白介素-1。

2結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各項(xiàng)基本資料的比較

各組在年齡、孕產(chǎn)次、孕周比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見(jiàn)表1)。

表1　孕產(chǎn)婦基本資料比較

2.2實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組胎膜感染情況的比較

HCA組IL-1水平、HBD-2水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.01；HCA組IL-1水平、HBD水平與對(duì)照組比較，差異顯著，P<0.01；非HCA組的IL-1水平、HBD-2水平與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異，P>0.05，見(jiàn)表2。從均數(shù)直觀圖觀察到，隨著胎膜早破的出現(xiàn)、感染的發(fā)生，IL-1水平、HBD-2水平有升高的趨勢(shì)，見(jiàn)圖1、2。

表2　孕婦血清中IL-1、HBD-2水平的比較

與HCA組比較，*：P<0.05；**：P<0.01

2.3IL-1與HBD-2預(yù)測(cè)HCA 的ROC曲線

繪制IL-1和HBD-2水平的ROC曲線，以敏感性為Y軸，1-特異性為X軸，結(jié)果提示以這2個(gè)參數(shù)預(yù)測(cè)HCA均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PIL-1=0.01，PHBD-2=0.03)；所計(jì)算的曲線下面積分別為75%和71%；95%可信區(qū)間分別為(0.60，0.90)和(0.53,0.88)；當(dāng)IL-1以80.22 pg/ml為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當(dāng)HBD-2以474.79 ng/L為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79(見(jiàn)圖3)。

圖1IL-1水平變化趨勢(shì) 圖2HBD-2水平變化趨勢(shì)圖3IL-1與HBD-2診斷HCA 的ROC曲線

3討論

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外的學(xué)者對(duì)胎膜早破發(fā)生的原因從機(jī)械力學(xué)，胎膜結(jié)構(gòu)變化，感染，免疫等方面的研究取得長(zhǎng)足的進(jìn)步。其中感染一直是眾多研究者密切關(guān)注的相關(guān)因素之一。我們普遍觀察到發(fā)生胎膜早破的孕婦，在發(fā)病后相當(dāng)一段時(shí)間內(nèi)無(wú)明顯的臨床表現(xiàn)，處于亞臨床感染階段，等到出現(xiàn)感染征象，可能已經(jīng)對(duì)孕產(chǎn)婦及胎兒的預(yù)后造成影響，因此，胎膜早破合并感染的早期發(fā)現(xiàn)十分重要。本研究探討IL-1與HBD-2在胎膜早破患者中對(duì)羊膜腔感染的預(yù)測(cè)，希望為臨床胎膜早破合并絨毛膜炎的診斷提供新的思路。

有人認(rèn)為，感染引起的IL-1升高 是人類分娩的機(jī)理[3]，國(guó)外有研究[4]發(fā)現(xiàn)，孕晚期羊水中IL-1β水平升高，有發(fā)生胎膜早破和早產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。Puchner等[5]研究結(jié)果顯示羊水中 IL-1β 水平每增加一個(gè)單位，早產(chǎn)及胎膜早破的發(fā)生率增加7.2 倍。我們的研究表明，胎膜早破發(fā)生后IL-1較對(duì)照組有所升高，但與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨著絨毛膜感染的發(fā)生，IL-1水平進(jìn)一步升高，與對(duì)照組及非HCA組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可作為胎膜早破發(fā)生后，羊膜腔出現(xiàn)感染的診斷指標(biāo)。

人防御素是一組多肽，具有抗微生物和細(xì)胞毒活性,是構(gòu)成機(jī)體天然防衛(wèi)系統(tǒng)的重要組成部分,它能夠?qū)Χ喾N細(xì)菌、真菌、某些有包膜的病毒起到殺傷作用。防御素分為α和β防御素兩大類。它們?cè)谌梭w呈現(xiàn)持續(xù)的非特異性表達(dá)，同時(shí)也可以被細(xì)胞因子等炎癥反應(yīng)的產(chǎn)物誘導(dǎo)表達(dá)。HBD-2對(duì)革蘭氏陰性菌及革蘭氏陽(yáng)性菌都有一定的滅活性。還有研究者報(bào)道HBD-2對(duì)大腸桿菌,銅綠假單胞菌及白色念珠菌有較強(qiáng)的殺滅活性[6]。HBD-2存在于妊娠婦女的生殖道中，是抵抗微生物入侵生物屏障的重要組成部分,胎膜早破發(fā)生后,微生物侵入羊膜腔，HBD-2參予進(jìn)行抗微生物的天然免疫反應(yīng),故其水平升高；當(dāng)微生物的入侵受到抑制,就不會(huì)發(fā)生宮內(nèi)感染，相反，如果羊膜腔內(nèi)的天然免疫屏障未能控制微生物的入侵,病原微生物的產(chǎn)物就會(huì)刺激了HBD-2的表達(dá)。Soto E等人發(fā)現(xiàn)，羊水中HBD-2水平在HCA患者中出現(xiàn)升高[7]，也有研究者發(fā)現(xiàn)HBD-3水平在宮內(nèi)感染患者中有所升高[8]。我們的研究表明，胎膜早破后HBD-2較對(duì)照組有所升高，但與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨著絨毛膜感染的發(fā)生，HBD-2水平進(jìn)一步升高，與對(duì)照組比較差異顯著，與非HCA組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此，HBD-2水平可作為胎膜早破羊膜腔出現(xiàn)感染的診斷指標(biāo)。

在分組比較中可以看到，IL-1和HBD-2隨著胎膜早破的發(fā)生和感染的發(fā)生都呈現(xiàn)出升高的趨勢(shì)，可作為疾病的動(dòng)態(tài)觀察依據(jù)。我們考慮HBD-2通過(guò)自身特有的殺菌機(jī)制使菌體裂解，發(fā)揮生物活性并導(dǎo)致釋放菌體內(nèi)諸如內(nèi)毒素等物質(zhì)時(shí)，而菌體內(nèi)容物又可誘發(fā)IL-1的產(chǎn)生或生成上調(diào),進(jìn)而又使機(jī)體局部各種細(xì)胞因子增多。這又能使HBD-2基因表達(dá)上調(diào),至此形成一個(gè)循環(huán)，HBD-2和IL-1互為因果,相互促進(jìn)，共同升高。通過(guò)ROC曲線的繪制，我們看到當(dāng)IL-1以80.22 pg/ml為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當(dāng)HBD以474.79 ng/L為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79(見(jiàn)圖3)，提示可以此作為分界點(diǎn)進(jìn)行HCA的預(yù)測(cè)。

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摘要：目的通過(guò)測(cè)定外周血白介素-1(IL-1)及β2防御素(HBD-2)水平，探討他們?cè)谔ツぴ缙浦械淖饔茫治銎渑c羊膜腔感染的相關(guān)性，為臨床的診斷與治療提供新的思路。方法42例胎膜早破患者分別測(cè)定外周血IL-1及HBD-2水平，與20例對(duì)照組進(jìn)行比較，根據(jù)胎膜病理診斷結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組進(jìn)一步分出組織學(xué)絨毛膜炎組(HCA)和非組織學(xué)絨毛膜炎組(非HCA組)，比較兩組間HBD-2及IL-1水平。結(jié)果42名胎膜早破患者中，病理證實(shí)胎膜早破無(wú)感染者(非HCA)24例，感染者(HCA)18例。HCA組IL-1水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.01；HCA組IL-1水平與對(duì)照組比較，差異顯著， P<0.01；非HCA組的IL-1水平與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異，P>0.05。 HCA組HBD水平與非HCA組比較，差異顯著，P<0.05；HCA組HBD水平與對(duì)照組比較，差異顯著， P<0.01；非HCA組的HBD水平與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異，P>0.05。從均數(shù)直觀圖觀察到，隨著胎膜早破的出現(xiàn)，感染的發(fā)生，IL-1、HBD水平均有升高的趨勢(shì)。通過(guò)ROC曲線觀察，當(dāng)IL-1以80.22 pg/ml為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.78，特異性為0.75；當(dāng)HBD以474.79 ng/L為分界點(diǎn)時(shí)，診斷HCA的敏感性為0.67，特異性為0.79。結(jié)論胎膜早破患者外周血IL-1、HBD-2水平有預(yù)測(cè)和診斷HCA的可能，其升高在HCA患者中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，為臨床HCA的診斷提供新的手段。

關(guān)鍵詞：β2防御素；白介素-1；絨毛膜羊膜炎；胎膜早破

The Value of Serum IL-1 and HBD-2 in Diagnosis of Infection in Premature Rupture of MembranesYANGLi-na,WANGFan,YUHai-yan,etal.(HeilongjiangProvincialHospital，Harbin150036,China)

Abstract:ObjectiveTo analysis the relationship between the infection and the serum level of IL-1 and HBD-2 in premature rupture of membranes.Methods42 women with PROM were enrolled in the study.20 samples without PROM pregnancies matching the same gestational ages were recruited as control group.According to the results of pathological diagnosis of membranes,pregnant women with PROM were divided into histological chorioamnionitis(HCA) and non-HCA.We analyze the level of IL-1 and HBD-2 between the different groups.ResultsIn 42 patients with PROM,24 cases were non-infected and 18 cases were infected.The level of IL-1 in HCA group are significantly higher than non-HCA group and control group(P<0.01).The level of HBD-2 in HCA group are significantly higher than non-HCA group(P<0.05) and control group(P<0.01).There is no statistically significant different between non-HCA and control group(P>0.05).We observe from the mean plot show that the level of IL-1 and HBD-2 has a tendency to rise with the emergence of PROM and infection.According to the ROC curve,when IL-1 take 80.22 pg/mL,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.78 and 0.75 respectively.when HBD-2 take 474.79 ng/L,the sensitivity and specificity of diagnosis infection in PROM are 0.67 and 0.79 respectively.ConclusionThe clinical value of serum IL-1 and HBD-2 may be a specific index diagnosis of infection PROM in the future.

Key words:HBD-2;IL-1;chorioamnionitis;premature rupture of membranes

收稿日期：(2013-11-27)

作者簡(jiǎn)介：楊麗娜，碩士，副主任醫(yī)師，黑龍江省醫(yī)院婦產(chǎn)科醫(yī)生。

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R714.43+3

文章編號(hào)：1007-4287(2015)03-0412-03

基金項(xiàng)目：黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題(2013372)