偏頭痛患者血漿中過氧化物酶體增殖物激活受體水平的研究

張賀敏， 何　秋*，林　湘，劉蘇麗，陳曉虹

(1.遼寧省人民醫院 神經內四科，遼寧 沈陽 110016； 2.大連醫科大學； 3 駐馬店市中心醫院)

偏頭痛患者血漿中過氧化物酶體增殖物激活受體水平的研究

張賀敏1， 何秋1*，林湘2，劉蘇麗3，陳曉虹1

(1.遼寧省人民醫院 神經內四科，遼寧 沈陽 110016； 2.大連醫科大學； 3 駐馬店市中心醫院)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0382)

關于偏頭痛發病機制的研究目前仍然是神經科的一個熱點問題，其中腦干-三叉神經-血管炎性學說作為主要發病機制越來越受到關注，而腦和腦膜的炎癥反應是偏頭痛的主要病理生理機制[1,2]。過氧化物酶體增殖物激活受體家族(peroxisome proliferator-activated receptors，PPARs)由Issemann等于1990年首次發現，是配體激活的轉錄因子，均屬于核激素受體超家族[3]，PPARs與卒中、阿爾茨海默病、多發性硬化等中樞神經系統疾病的關系已有研究[4-6]。我們前期的基礎研究發現實驗性大鼠偏頭痛模型中三叉神經頸復合體處過氧化物酶體增殖物激活受體PPARα、PPARβ/δ、PPARγ均呈強陽性表達[7]，臨床研究顯示偏頭痛發作期血漿PPARγ水平下調[8]，提示PPARs可能參與偏頭痛的發病過程。本研究檢測偏頭痛患者不同時期血漿中PPARs水平的變化，進一步推測PPARs與偏頭痛發作之間的關系，為偏頭痛的防治提供理論基礎。

1對象與方法

1.1研究對象

入選病例：在遼寧省人民醫院神經內科及神經外科門診、住院的偏頭痛患者227例。 其中發作期98例，發作間期129例；有先兆偏頭痛患者62例， 無先兆偏頭痛患者165例。診斷標準:符合2011版《中國偏頭痛診斷治療指南》的患者入選為偏頭痛患者，研究期間患者可進行發作期止痛治療，但均不可予預防期治療。患者志愿參加,在知情同意書上簽字。

排除標準：(1)年齡<15歲或>65歲；(2)體質量指數(BMI)<18 kg/m2或>30 kg/m2；(3)有腦動脈瘤、顱內感染、腦梗死、腦出血、蛛網膜下腔出血、腦血管畸形、腦腫瘤等神經系統疾病者(經TCD、頭CT 或頭MRI、頭MRA等檢查證實);(4)血常規、紅細胞沉降率(ESR)、抗“O”(ASO)、RF(類風濕因子)、心電圖等檢查異常；(5)同時合并高血壓病、糖尿病、高脂血癥、動脈粥樣硬化等疾病者；(6)患有炎癥及風濕性關節炎、橋本氏甲狀腺炎、系統性紅斑狼瘡、炎癥性腸病等全身性風濕免疫性疾病者；(7)口服避孕藥、懷孕或哺乳期；(8)吸煙。

連續入選同期健康體檢者100例為健康對照組。對照組年齡、性別、民族、地域等與病例組相匹配而無血緣關系，并且無偏頭痛病史及家族史者。

1.2病人分組

A組：發作期患者(n=98)；其中A1組—無先兆的發作期患者(n=71)，A2組—有先兆的發作期患者(n=27)。

B組：發作間期患者(n=129)；其中B1組—無先兆的發作間期患者(n=94)，B2組—有先兆的發作間期患者(n=35)。

C組為健康對照組(n=100)。

1.3研究方法

標本收集與處理：入院24 h內抽取清晨空腹外周肘靜脈血2 ml，收集至EDTA抗凝管中。患者血漿中PPARα、β/δ、γ的水平檢測采用酶聯免疫法(ELISA)。臨床數據收集：詳細收錄一般臨床信息資料(包括性別,年齡、BMI、血壓、血脂等)。

檢測方法：所取標本進行3 000 r/min離心10 min后吸取上層清液，分裝置于EP管中，操作步驟嚴格按照說明書的實驗方法進行。PPARα、β/δ、γ試劑盒由北京鼎國生物技術有限責任公司提供。

1.4統計學處理

2結果

2.1一般資料比較A組、B組、C組各組之間患者的一般資料比較，各方面差異均無統計學意義(P>0.05)(表1)。

表1　偏頭痛患者各組一般情況比較

注：A：發作期；A1：無先兆發作期；A2：有先兆發作期；B：發作間期；B1：無先兆發作間期；B2：有先兆發作間期。C：對照組；各組之間年齡、性別、BMI、血壓、血脂(低密度脂蛋白、甘油三酯)等方面無統計學差異(P>0.05)。

2.2血漿PPARα、β/δ、γ水平比較A組患者血漿PPARα、β/δ水平高于B組及C組者(P<0.05)，PPARγ水平低于B組及C組患者(P<0.05)；亞組分析發現有無先兆偏頭痛患者發作期血漿PPARs 水平與發作間期相比均有顯著差異(P<0.05)。有先兆偏頭痛患者發作期、發作間期血清PPARα、β/δ、γ水平與無先兆偏頭痛患者相比無顯著性差異(P>0.05)。B組患者血漿PPARα、β/δ、γ 水平與C組相比無顯著性差異(P>0.05)(表2)。

組別例數PPARαPPARβ/δ濃度PPARγ濃度A組98572.3±68.1*#591.1±72.2*#157.2±104.4*#A1組71574.9±68.5◆588.5±70.5◆159.8±101.6◆A227565.3±67.6▲597.9±77.6▲150.1±113.2▲B組129306.3±69.2233.1±105.6230.3±97.2B1組94308.8±70.2242.7±109.7233.2±96.4B2組35299.6±66.8207.4±90.0222.6±100.4C組100301.49±74.3245.68±101.7221.86±95.9

*A組與B組相比有統計學差異(P<0.05),#A組與C組相比較有統計學差異(P<0.01)。◆A1與B1組相比較有統計學差異(P<0.05);▲A2組與B2組相比有統計學差異(P<0.05)。

3討論

偏頭痛是一種神經系統功能性疾患，其機制至今尚未完全闡明。被公認為偏頭痛發病機制主流學說的腦干-三叉神經-血管炎性學說認為神經源性炎癥的產生使三叉神經的刺激逆行或順行傳導傳至大腦皮層引起疼痛[9]。近年來研究發現，核轉錄因子-κB(nucleartranscription factor-κB，NF-κB)、IL家族(IL-6、IL-1、IL-10)、TNF-α及TNF-β等因子在偏頭痛的發生發展中發揮著作用[10]。我們前期的研究發現，5-HT、NF-κB及細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)等通過不同途徑參與了偏頭痛的發病過程[11，12]，同時在動物實驗中就PPARs與偏頭痛的關系進行了探討[7]；前期臨床試驗中發現過氧化物酶體增殖物激活受體亞型γ可能也影響偏頭痛的發生。

PPARs是一種配體激活型轉錄調控因子核受體超家族成員，目前己知的PPARs有3種亞型:PPARα、PPARβ/δ、PPARγ，它們的功能各不相同。PPARα可調控炎癥、細胞增殖和分化、氧化應激反應等非代謝過程的表達[13-15]。 PPARβ/δ在血管炎癥、腫瘤、內質網應激所致炎癥及胰島素抵抗等的發生過程中發揮著重要的作用[16-18]。PPARγ參與中樞神經系統的急慢性損傷及炎癥反應，在糖脂代謝、腦缺血及中樞神經系統免疫性疾病中均具有保護作用。

本研究檢測偏頭痛患者血漿中PPARs(PPARα、β/δ、PPARγ)的水平，并分別對不同時期的PPARs水平進行了比較。我們前期的基礎研究發現硝酸甘油實驗性大鼠偏頭痛模型中三叉神經頸復合體處過氧化物酶體增殖物激活受體PPARα、PPARβ/δ、PPARγ均呈強陽性表達[7]。分析結果無論動物實驗還是臨床研究中PPARα、PPARβ/δ在血漿均增加。PPARγ水平仍降低，與我們前期臨床試驗結果相符[8]，表明增加樣本量后結果仍有意義，結果穩定，可信性高；而PPARγ在大鼠三叉神經頸復合體處表達增強卻在人血漿中水平下降，分析結果可能與物種不同、組織分布不同或實驗方法等不同有關，將在未來的實驗研究中做進一步探討。

本研究結果提示PPARs的水平與偏頭痛的發作密切相關而PPAR不同亞型間存在差異。分析結果考慮PPARs對偏頭痛的發生產生不同的作用。偏頭痛發作期血清PPARα水平升高，PPARα激活后，通過抑制P38絲裂原活化蛋白激酶和核因子-κB活化而發揮抗炎的作用[19]；PPARβ/δ可能通過抑制ERK1/2磷酸化途徑,阻斷LPS誘導的NF-κB激活,并達到控制炎癥因子的表達及炎癥反應的目的[20]。而偏頭痛發作時的血漿PPARγ水平降低，考慮對偏頭痛的發生發作起到了促進作用。

本研究結果發現無先兆的偏頭痛患者與有先兆的偏頭痛患者血漿PPARs水平的比較均無顯著性統計學差異(無論在發作期，亦或是發作間期)，結果提示偏頭痛患者是否發生先兆與血漿中的PPARs水平高低可能無關。偏頭痛先兆的發生可能是由于偏頭痛患者腦內神經元的興奮性較枕葉皮層的神經元興奮高，容易發生皮層擴散性抑制，最終出現先兆癥狀[21]。

本研究結果進一步說明PPARs參與偏頭痛的發作主要是由于其參與了炎性反應，而非神經元的興奮，故有先兆組與無先兆組相比PPARs水平無顯著性差異。

總之，本研究結果表明PPARs 參與偏頭痛的發病過程，結合前期研究結果考慮發作期血清PPARα、β/δ水平升高可能是偏頭痛的保護機制之一，而PPARγ對偏頭痛的發作起到了促進作用。本研究的結論將為完善偏頭痛的發病機制研究提供新的思路，為防治偏頭痛的藥物研發提供理論依據。展望未來可在基礎研究及臨床研究中進一步將作用于PPARs受體的藥物引入偏頭痛的治療中，為偏頭痛的治療打開了新的通道。

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摘要：目的觀察不同時期、不同亞型偏頭痛患者血漿中過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)的變化，探討偏頭痛的發病機制。方法將227例偏頭痛患者分成偏頭痛發作期組(A組，n=98)和發作間期組(B組，n=129)；同時根據患者先兆癥狀的不同又分為四個亞組，即A1組-無先兆的偏頭痛發作期患者(n=71)，A2組-有先兆的偏頭痛發作期患者(n=27)；B1組-無先兆的偏頭痛發作間期患者(n=94)，B2組-有先兆的偏頭痛發作間期患者(n=35)；以年齡、性別相匹配的100例健康者作為對照組。搜集患者的臨床資料(性別、年齡、BMI、血壓、血脂)，并采用酶聯免疫法(ELISA)檢測受試者血漿PPARs水平，采用SPSS系統軟件進行統計分析。結果偏頭痛發作期患者血漿中PPARα、PPARβ/δ水平明顯高于發作間期及健康對照者的水平(572.3±68.1 VS 306.3±69.2 VS 301.49±74.3、591.1±72.2 VS 233.1±105.6 VS 245.68±101.7，P<0.05 )，而PPARγ水平發作期組低于發作間期組及健康對照組(157.2±104.4 VS 230.3±97.2 VS 221.86±95.9，P<0.05) ；有先兆和無先兆偏頭痛發作期PPARα、PPARβ/δ、PPARγ水平與發作間期比較均有明顯差異( 574.9±68.5 VS 308.8±70.2，588.5±70.5 VS 242.7±109.7，159.8±101.6 VS 233.2±96.4，P<0.05)。PPARs水平在發作間期患者組與健康對照者組之間比較無統計學顯著性差異(P>0.05)；無論是偏頭痛發作期或發作間期，有先兆與無先兆患者血漿PPARs水平組內比較均無明顯差異(P>0.05)。 結論PPARs參與偏頭痛發作的病理生理過程，與有無偏頭痛先兆發生無關。

關鍵詞：偏頭痛； 過氧化物酶體增殖物激活受體； 發病機制； 炎癥

Changes of serum PPARs levels in migraine patientsZHANGHe-min,HEQiu，LINXiang，etal.(DepartmentofNeurology,LiaoningProvinceHospital,Shenyang110016,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the clinical features of patients with migraine ， and analyze the plasma level of PPARs(peroxisome proliferator-activated receptors) during different periods and different subtypes in migraine patients.To explore the relationship between PPARs and migraine attacks.Methods227 patients with migraine were divided into two main groups:attack period group (n=98) and attack free period group (n=129).According to the patients with or without aura symptoms patients were further divided into four subgroups.100 cases of healthy were taken as control group.Collect the clinical data of patients(Gender,age,BMI,blood pressure,blood lipid.The serum levels of PPARs were measured using enzyme-linked immunoassay (ELISA).Using SPSS software for statistical analysis.ResultsNo significant difference about age,BMI,blood pressure,blood lipid level among migraine during headache attack period、headache free period and the control group..The PPARα、PPARβ/δ levels in patients with migraine during headache attack period were significantly higher than headache free period and healthy control group.The PPARγlevels in patients with migraine during headache attack period were significantly lower than those during headache free period and healthy control group.The PPAR α、β/δ、γlevels in patients with migraine during headache attack period have significant differences compared with those during headache free period no matter with or without aura.The PPARs levels in headache free period have no significant difference to healthy control group (P>0.05).The level of PPARs in plasma of migraine was no significant difference between migraine with aura group and without aura group，regardless of whether during headache attack period or headache free period(P>0.05).ConclusionPPARα、β/δ,and PPARγ involved in the pathogenesis of migraine.With or without aura had no obvious effect to PPARs level.

Key words:Migraine；Peroxisome proliferator-activated receptors(PPARs)；Pathogenesis；Inflammation

收稿日期：(2013-10-13)

文獻標識碼：A

中圖分類號：R747.2

文章編號：1007-4287(2015)03-0382-04

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