GPC3和AFP聯合檢測對原發性肝癌的診斷價值

王延峰,李南陽,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,賈儒淵,于小平

(張家口市第一醫院,河北 張家口075000)

GPC3和AFP聯合檢測對原發性肝癌的診斷價值

王延峰*,李南陽,任雅玲,薛秀斌,李林臣,曹蕾春,賈儒淵,于小平

(張家口市第一醫院,河北 張家口075000)

(ChinJLabDiagn,2015,19:0366)

原發性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC)的發病率位居全部惡性腫瘤的第5位，在每年新增的PHC病例中有超過一半是發生在中國[1]。外科切除仍然是目前針對PHC的首選治療手段[2]，如果錯過手術治療時機，則患者的預后情況極差，五年生存率極低。因此，提高PHC的早期診斷率是決定其治療效果的關鍵環節。AFP輔助診斷PHC的效率并不理想，其敏感度和特異度都難以達到臨床要求[3]，本研究通過對磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3，GPC3)和AFP聯合檢測對PHC的診斷價值進行了觀察和分析，現將研究的具體情況報告如下。

1材料和方法

1.1研究材料

選取2005年6月至2013年6月在我院接受手術治療的PHC患者60例、肝硬化患者70例和其它原因致肝破裂患者50例作為研究對象，納入患者均經B超、CT和術后病理檢查予以確診。納入的PHC患者均為初發且均未經過化療，其中，男性患者49例，女性患者11例，年齡跨度為35至68歲，平均年齡為(50.8±7.8)歲。病理檢查顯示，51例為肝細胞癌，9例為膽管細胞癌；單發腫瘤患者為40例，多發腫瘤患者為20例。TNM分期方面：3例患者為Ⅰ期，28例患者為Ⅱ期，16例患者為Ⅲ期，13例患者為Ⅳ期；Edmondson-Steiner分級方面：6例患者為Ⅰ級，35例患者為Ⅱ級，12例患者為Ⅲ級，7例患者為Ⅳ級。在納入的肝硬化中，男性患者為58例，女性患者為12例，年齡跨度為39至58歲，平均年齡為(46.5±4.2)歲。在納入的肝破裂患者中，男性患者為41例，女性患者為9例，年齡跨度為26至45歲，平均年齡為(37.2±4.6)歲，均經病理檢查確認為非肝癌、非肝硬化患者。

1.2觀察指標

應用ELISA法對以上各類患者的血清GPC3和AFP水平進行檢測，應用免疫組織化學SP法對PHC患者切除肝組織標本中的GPC3表達情況進行檢測(試劑盒均購自武漢博士德生物公司)，血清標本為各組患者的清晨空腹靜脈血，以GPC3>120 ng/ml和AFP>8.5 ng/ml為陽性，切除肝組織標本均經中性甲醛固定并以常規石蠟包埋，以4 μm厚連續切片，檢測操作步驟嚴格按照試劑盒使用說明書操作，以平均吸光度值(A值)代表染色強度和觀察指標的相對濃度。

1.3統計學處理方法

所有數據均應用EXCEL建立數據庫并應用SPSS13.0統計軟件包進行統計學分析，計量資料應用方差分析或t檢驗進行處理，計數資料應用卡方檢驗進行處理，以P<0.05為差異有顯著性。

2結果

2.1各類患者血清GPC3水平的比較

經檢測，肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)，具體結果見表1。

2.2血清GPC3和AFP聯合檢測診斷PHC分析

應用血清GPC3和AFP聯合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨應用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)，而應用血清GPC3和AFP聯合檢測與單獨應用血清GPC3檢測或血清AFP檢測的特異度的差異無顯著性(P>0.05)，具體結果見表2。

表1　各類患者血清GPC3水平的比較

注：與肝破裂比較，①P<0.05；與肝硬化比較，②P<0.05

表2　血清GPC3和AFP聯合檢測診斷PHC的價值分析

注：與GPC3比較，①P<0.05；與AFP比較，②P<0.05

2.3GPC3在PHC患者肝組織標本中的表達及相關因素分析

PHC患者的腫瘤組織、癌旁組織及正常組織中的GPC3表達水平(A值)分別為(0.162±0.037)、(0.126±0.025)和(0.063±0.012)，腫瘤組織的GPC3表達水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達水平顯著高于正常組織(P<0.05)。PHC患者肝組織GPC3表達水平與PHC患者臨床指標的相關性分析結果顯示，具有不同Edmondson病理分級或TNM臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達水平的差異有顯著性(P<0.05)，具體結果見表3。

3討論

有研究顯示，PHC是目前世界上死亡率最高的惡性腫瘤，患者在臨床確診后的五年生存率低于12%，出現這一現象的原因主要是因為大多數患者在就診時已發病到中晚期，錯過了最佳的手術治療時機。所以，提高PHC的早期診斷率是提升PHC治療效果、改善患者預后的重要保障[4]。研究發現AFP診斷PHC發病的敏感度僅為30%至60%，特異度一般不足80%，特別是對于早期PHC的檢出率更低。GPC3是一種表達于細胞膜表面的硫酸乙酰肝素糖蛋白。GPC3不在正常人的肝組織中表達，而在PHC患者的肝組織中卻呈現高表達狀態，也被很多學者認為是在AFP陰性肝癌患者的肝組織中表達率最高的標志物[5]，隨著學術界對GPC3研究的不斷深入，很多研究者發現，GPC3不僅在肝細胞癌組織中呈現高表達，而且在患者血清中的水平也出現了大幅度的上升，故學者們認為GPC3在PHC的早期診斷中具有極高的臨床應用價值[6]。很多研究證實，GPC3在小肝癌和AF陰性肝癌的早期診斷中具有較高的效率，而且當將其與其它腫瘤標志物進行聯合檢測時，診斷效能會得到大幅度的提升[7]。本研究結果顯示，肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)，說明血清GPC3水平的顯著上升可作為PHC發病的提示指標；應用血清GPC3和AFP聯合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨應用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)，而應用血清GPC3和AFP聯合檢測與單獨應用血清GPC3檢測或血清AFP檢測的特異度的差異無顯著性(P>0.05)，說明應用血清GPC3和AFP水平聯合檢測可提高診斷PHC的敏感度，同時對診斷的特異度無顯著影響；腫瘤組織的GPC3表達水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達水平顯著高于正常組織(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分級或TNM臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達水平的差異有顯著性(P<0.05)，說明GPC3在PHC患者的腫瘤組織中呈現高表達狀態，其表達水平可能與患者病情的進展具有相關性。

表3　GPC3在PHC患者肝組織標本中表達相關因素分析

綜上所述，PHC患者的血清和腫瘤組織中的GPC3均呈現高表達狀態，其在肝組織中的表達水平可能與患者病情的進展具有相關性，應用血清GPC3和AFP水平聯合檢測可提高診斷PHC的敏感度。

參考文獻：

[1]劉紅丹,梁健,鄧鑫.三維適形放療在治療原發性肝癌中的研究進展[J].實用癌癥雜志,2013,28(1):103.

[2]Poon D,Anderson BO,Chen LT,et al.Management of hepatocellular carcinoma in Asia:consensus statement from the Asian Oncology Summit 2009[J].Lancet Oncol,2009,10(11):1111.

[3]紀鳳卿,徐振興,滕菁.甲胎蛋白異質體L3在原發性肝癌診斷中的研究進展[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(5):580.

[4]Marrero JA,Feng Z,Wang Y,et al.Alpha-fetoprotein,des-gamma carboxyprothrombin,and lectin-bound alpha-fetoprotein in early hepatocellular carcinoma[J].Gastroenterology,2009,137(1):110.

[5]楊龍,劉劍勇.GPC3與肝癌的研究進展[J].中國癌癥防治雜志,2010,2(2):146.

[6]余娟平,張瓊,徐偉文,等 Glypican-3的血清檢測與原發性肝癌診斷的研究進展[J].分子診斷與治療雜志,2013,5(3):189.

[7]楊康,王萬祥.血清標記物GPC3與肝細胞癌的研究進展[J].疾病監測與控制,2013,7(8):480.

摘要：目的觀察和分析磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)和甲胎蛋白(AFP)聯合檢測對原發性肝癌(PHC)的診斷價值。方法選取60例PHC患者、70例肝硬化患者和50例其它原因致肝破裂患者作為研究對象，對各類患者的血清GPC3和AFP水平和PHC患者的肝組織標本中的GPC3表達水平進行檢測。結果肝破裂患者的血清GPC3水平顯著低于肝硬化患者(P<0.05)，肝硬化患者的血清GPC3水平顯著低于PHC患者(P<0.05)；應用血清GPC3和AFP聯合檢測診斷PHC的敏感度為90%，顯著高于單獨應用血清GPC3檢測或血清AFP檢測(P<0.05)；腫瘤組織的GPC3表達水平顯著高于癌旁組織(P<0.05)，癌旁組織的GPC3表達水平顯著高于正常組織(P<0.05)，具有不同Edmondson病理分級或TMN臨床分期的PHC患者的肝組織GPC3表達水平的差異有顯著性(P<0.05)。結論PHC患者的血清和腫瘤組織中的GPC3均呈現高表達狀態，其在肝組織中的表達水平可能與患者病情的進展具有相關性，應用血清GPC3和AFP水平聯合檢測可提高診斷PHC的敏感度。

關鍵詞：原發性肝癌；磷脂酰肌醇蛋白聚糖；甲胎蛋白；免疫組化；腫瘤標志物；血清學檢測

The diagnosis value of the combined GPC3 and AFP detection of primary hepatic carcinomaWANGYan-feng,LINan-yang,RENYa-ling,etal.(FirsrHospitalofZhangjiakou,Zhangjiakou075000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe and analyze the diagnosis value of the combined glypican-3 (GPC3) and alpha-fetoprotein (AFP) detection of primary hepatic carcinoma.Methods60 patients with PHC,70 patients with liver cirrhosis and 50 patients with liver rupture caused by other reasons were selected as the research objects.The serum GPC3 and AFP levels of all kinds of patients and the GPC3 expression level of the liver tissues of the patients with PHC were detected.ResultsThe serum GPC3 level of the patients with liver rupture was significantly lower than that of the patients with liver cirrhosis (P<0.05),and the serum GPC3 level of the patients with liver cirrhosis was significantly lower than that of the patients with PHC(P<0.05);the sensitivity of the combined serum GPC3 and AFP detection in the diagnosis of PHC was 90%,which was significantly higher than that of single detection of serum GPC3 or serum AFP (P<0.05);the GPC3 expression level in the tumor tissues was significantly higher than that in the paracancerous tissues (P<0.05),and the GPC3 expression level in the paracancerous tissues was significantly higher than that in the normal liver tissue (P<0.05).There was significant difference of the GPC3 expression level in the liver tissue of the PHC patients with different Edmondson pathological grading or different TMN clinical stage (P<0.05).ConclusionThe GPC3 levels in serum and tumor tissue of the PHC patients show high expression,and the expression level in liver tissue may be associated with the progress of the diseases.The combined detection of serum GPC3 and AFP levels can improve the diagnostic sensitivity of PHC.

Key words:primary liver cancer;glypican;alpha fetoprotein;immunohistochemistry;tumor marker;serological detection

收稿日期：(2014-01-09)

文獻標識碼：A

中圖分類號：R735.7

文章編號：1007-4287(2015)03-0366-03

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