橋本甲狀腺炎中細胞間黏附分子1的表達及意義

賈　樂,徐嘉雯,王新營，王強修※

(1.寶雞市中醫醫院病理科,陜西 寶雞 721001； 2.山東大學附屬省立醫院病理科,濟南 250021； 3.廣饒縣人民醫院病理科，山東 東營 257399)

橋本甲狀腺炎中細胞間黏附分子1的表達及意義

賈樂1,徐嘉雯2,王新營3，王強修2※

(1.寶雞市中醫醫院病理科,陜西 寶雞 721001； 2.山東大學附屬省立醫院病理科,濟南 250021； 3.廣饒縣人民醫院病理科，山東 東營 257399)

摘要：目的探討細胞間黏附分子1(ICAM-1)在橋本甲狀腺炎(HT)中的表達及其意義。方法選取 2008 年 1 月至2012 年 12 月在山東大學附屬省立醫院甲狀腺外科行手術切除的甲狀腺疾病患者147例，根據疾病和腫瘤生物學行為不同分成HT組(72例)、甲狀腺微小乳頭狀癌(PTMC)組(60例)、甲狀腺腺瘤組(15例)。采用免疫組織化學法檢測3組患者ICAM-1的表達。結果ICAM-1在HT組(30.1%，22/72)及PTMC組(85.0%，51/60)中高表達，在甲狀腺腺瘤組中無表達。ICAM-1在伴有甲狀腺乳頭狀癌(PTC)樣核特征的HT(61.9%，13/21)中表達顯著高于不伴有者(17.6%，9/51)，差異有統計學意義(P<0.01)。不同年齡、性別、多灶性、有無復發和遠處轉移的ICAM-1陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)，有無包膜侵犯和淋巴結轉移的ICAM-1陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論ICAM-1在PTMC和伴有PTC樣核特征的HT中表達上調，提示其可能參與甲狀腺癌的發生、發展過程。

關鍵詞：橋本甲狀腺炎；甲狀腺微小乳頭狀癌；細胞間黏附分子1；診斷

甲狀腺微小乳頭狀癌(papillary thyroid microcarcino-mas，PTMC)是指直徑≤1 cm的甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinomas，PTC)，常可伴發橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis，HT)[1-2]。臨床診斷工作中，當HT中的部分細胞出現PTC的核改變特征時，與小灶性的PTMC形態學改變非常相似，極易導致病理診斷困難或誤診。細胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)屬于黏附分子中免疫球蛋白超家族中的成員，被認為在腫瘤的局部浸潤和遠處轉移中起非常重要的作用。文獻報道,ICAM-1可在PTC中過表達[3]，但在HT患者中的表達情況仍不詳。本研究通過檢測ICAM-1蛋白在HT、PTMC及甲狀腺腺瘤中的表達，探討其在甲狀腺疾病尤其是伴有PTC樣核改變的HT中的表達及意義。

1資料與方法

1.1一般資料選取2008年1月至2012年12月在山東大學附屬省立醫院甲狀腺外科行手術切除的甲狀腺疾病患者147例，病理學檢查根據2004年世界衛生組織甲狀腺腫瘤分類[4]。并根據疾病和腫瘤生物學行為的不同分為3組：HT組72例，男20例、女52例，男∶女=1∶2.4；年齡19～68歲，平均(41.0±4.0)歲；伴有PTC樣核特征21例，不伴有PTC樣核特征51例。PTMC組60例，男17例、女43例，男∶女=1∶2.2；年齡22～79歲，平均(42.1±2.8)歲。甲狀腺腺瘤組15例，男5例，女10例，男∶女=1∶2.0；年齡24～59歲，平均(40.1±3.0)歲。3組患者的性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入與排除標準納入標準：患者臨床病史資料齊全，病理診斷結果明確，存檔蠟塊無缺失，由2名病理醫師重新復查臨床及病理資料，以確定病變組織學類型；腫瘤患者則明確病灶大小、多灶性、有無包膜浸潤及淋巴結轉移等情況。排除標準：臨床病史資料不全，病理診斷結果不確定，甲狀腺癌的直徑>1 cm，用于進行免疫組織化學染色所需的存檔蠟塊缺失以及術前患者接受過內分泌治療或放化療者。

1.3試劑ICAM-1單克隆抗體購自美國Santa cruz生物有限公司，PV6000免疫組織化學檢測試劑盒和二氨基聯苯胺法顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.4免疫組織化學染色采用EnVision二步法，以磷酸鹽緩沖液替代一抗作為陰性對照，用已知正常扁桃體組織作為陽性對照。石蠟包埋的組織4 μm連續切片；二甲苯脫蠟，梯度乙醇逐級水化；10% H2O220 min阻斷內源性過氧化物酶活性；抗原修復用微波爐抗原熱修復，修復液為枸櫞酸鈉(0.1 mol/L，pH 6.0)。按免疫組織化學試劑盒說明書操作，一抗4 ℃過夜，磷酸鹽緩沖液沖洗；Envision二抗室溫40 min；二氨基聯苯胺法光鏡控制下顯色，蘇木精對比染色，脫水，風干，中性樹脂封片。

1.5免疫組化染色結果判斷選擇5個高倍視野各計數500個腫瘤細胞， 以細胞質和膜出現明顯的棕黃色顆粒并且明顯強于背景非特異性染色為染色陽性細胞，包括染色強度和陽性細胞百分率進行評價。染色強度：陰性，0分；弱陽性，1分；中等陽性，2分；強陽性，3分。陽性細胞百分率：<5%，0分；5%～25%，1分；26%～50%，2分；51%～75%，3分；>75%，4分。最終染色得分為兩者相加，<3分為陰性；≥3分為陽性[5]。染色結果經2位高年資病理醫生進行評價，取平均值。

2結果

2.13組甲狀腺疾病患者ICAM-1表達的比較ICAM-1定位于細胞膜或細胞質(見封三圖1)，3組ICAM-1陽性表達率比較差異有統計學意義(χ2=55.284，P<0.01)，PTMC組和HT組ICAM-1的陽性表達率顯著高于甲狀腺腺瘤組[85.0%(51/60)，30.6%(22/72)比0](χ2=39.844,6.135，P<0.01)，且PTMC組顯著高于HT組(χ2=39.246，P<0.01)。

2.2ICAM-1在HT中的表達ICAM-1在伴有PTC核特征的HT患者中的陽性表達率顯著高于不伴有者[61.9%(13/21)比17.6%(9/51)]，差異有統計學意義(χ2=13.540，P<0.01)。

2.3ICAM-1表達與PTMC臨床病理特征的關系不同年齡、性別、多灶性、有無復發和遠處轉移的ICAM-1陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)，較無包膜侵犯的ICAM-1陽性率高，有淋巴結轉移的較無淋巴結轉移的ICAM-1陽性率高(均P<0.05)，見表1。

ICAM-1：細胞間黏附分子1； PTMC：甲狀腺微小乳頭狀癌

3討論

ICAM-1是一種跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白家族成員，分布于淋巴管和血管內皮細胞、纖維母細胞等中，是參與介導細胞間黏附識別的重要因子，其可與淋巴細胞表面的受體淋巴細胞功能相關抗原結合，使淋巴細胞與內皮細胞穩定黏附[1]。研究發現，ICAM-1可在前列腺癌[5]、乳腺癌[6]和口咽癌[7]等多種實體瘤中過表達，并與腫瘤發生、發展有關。PTMC是甲狀腺癌最常見的病理學類型，單純依靠組織學特征鑒別PTMC與具有PTMC核特征的HT是非常困難的[8]。本研究檢測了ICAM-1在HT、PTMC及甲狀腺腺瘤中的表達。結果顯示，ICAM-1在HT、PTMC中過表達，而在甲狀腺腺瘤中不表達，ICAM-1在PTMC和HT中的陽性表達率顯著高于甲狀腺腺瘤(P<0.01)。與HT相比，ICAM-1在PTMC中的表達明顯上調，而且大多數ICAM-1表達陽性的PTMC有甲狀腺包膜的浸潤和淋巴結轉移，表現出高侵襲性的特征。因此，行ICAM-1標記有助于病理醫師結合形態學特征更準確地對常見甲狀腺疾病進行鑒別診斷。

目前，HT與甲狀腺癌的關系仍有爭論。有研究指出，HT患者患甲狀腺癌的風險是正常人的1.68倍[9]，尤其是伴有PTC核特征(如核重疊、增大、毛細胞核及核溝等[10])者，PTC核特征出現-甲狀腺濾泡上皮不典型增生-Hürthle細胞化生可能是一個連續的過程[9,11]。李曉靜等[12]回顧性分析了772例甲狀腺癌資料，發現2005年PTMC占乳頭狀癌總數的27.27%，2011年升至54.22%，乳頭狀癌合并HT者占其總數的12.38%。本研究結果顯示，72例HT中有21例伴有PTC核特征，且為多灶性，形態學上與PTMC很相似，病理檢查時極易造成誤診、誤治。本研究結果顯示，具有PTC核特征改變的HT中ICAM-1的表達較不伴有PTC核特征者顯著升高(P<0.05)，提示ICAM-1可能介入了甲狀腺腫瘤發生、發展的過程。并且，ICAM-1在PTMC中的陽性率顯著高于HT,有利于輔助PTMC的診斷。

文獻報道，轉染中重排/甲狀腺乳頭狀癌基因1和轉染中重排/甲狀腺乳頭狀癌基因3癌基因的表達提示HT是PTC的癌前病變[13]。另有研究指出，p63蛋白[14]和雜合性人類8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶缺失可能參與了HT-PTC的惡性轉化[15]。但是到目前為止，仍無肯定的遺傳學證據證實兩者之間存在必然的相關性。本研究結果提示，ICAM-1陽性表達有助于識別PTMC以及伴有PTMC核特征的HT，并且建議對ICAM-1陽性的HT患者定期隨訪，以做到早發現、早診斷和早治療。

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2015年版《中國科技期刊引證報告》中《醫學綜述》的指標數值

《醫學綜述》在中國科學技術信息研究所的2015年版《中國科技期刊引證報告》(核心版)同類學科48種期刊中的總被引頻次(4045)排名第7位、影響因子(0.447)排名第31位、綜合評價總分(56.5)排名第8位、學科影響指標(0.96)排名第2位(5個并列)，他引率0.95；在2015年版《中國科技期刊引證報告》(擴刊版)的總被引頻次8755、影響因子0.978、他引率0.98、學科影響指標0.85、學科擴散指標9.33、擴展H指標11。

Expression and Clinical Significance of Intercellular Adhesion Molecule-1 in Hashimoto ThyroiditisJIALe1,XUJia-wen2,WANGXin-ying3,WANGQiang-xiu2.(1.DepartmentofPathology,BaojiCityChineseMedicineHospital,Baoji721001,China; 2.DepartmentofPathology,ShandongProvincialHospitalAffiliatedtoShandongUniversity,Jinan250021,China；3.DepartmentofPathology,GuangraoCountyPeople′sHospital,Guangrao257399,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in Hashimoto thyroiditis(HT).MethodsA total of 147 patients with thyroid disease admitted to Shandong University Affiliated Provincial Hospital Thyroid Surgery from Jan.2008 to Dec.2012 were included in the study,according to the disease and biological behavior of the tumor they were divided into HT group(72 cases),small papillary thyroid carcinoma(PTMC) group(60 cases),thyroid adenoma group(15 cases).The expression of ICAM-1 in the 3 groups was detected by immunohistochemistry(IHC).ResultsICAM-1 expression was not detected in follicular lesions adenoma,but was frequently overexpressed in HT(30.1%,22/72)and papillary thyroid microcarcinomas(85.0%,51/60).ICAM-1 expression in patients with PTC-like nuclear alterations(61.9%,13/21) was significantly higher than that in HT caseswithout PTC-like features(17.6%,9/51)(P<0.01).Differences of ICAM-1 positive rate among different ages,genders,multifocalness,recurrence and distant metastasis had no statistical significance(P>0.05).ICAM-1 positive rate between patients with or without capsular invasion and lymph node metastasis had statistically significant difference(P<0.05).ConclusionICAM-1 expression is upregulated in PTMC and HT with PTC-like features,indicating that it might be involved in the genesis and development of thyroid carcinoma.

Key words:Hashimoto thyroiditis; Papillary thyroid microcarcinomas; Intercellular adhesion molecule-1; Diagnosis

收稿日期：2015-01-30修回日期：2015-05-28編輯：伊姍

基金項目：國家自然科學基金青年基金(81202092)；山東省醫藥衛生科技發展計劃(2011HW053)：山東省科學技術發展計劃(2012YD18045)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.24.049

中圖分類號：R736.1

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)24-4554-03