輻照血對(duì)食管癌手術(shù)患者免疫功能的影響

苗 毅，田敬榮，任春梅，李 勇

(1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院心臟血管外科，河北 邯鄲 056001； 2.河北省邯鄲市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 邯鄲 056001；3.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科，河北 石家莊 050011)

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·論 著·

輻照血對(duì)食管癌手術(shù)患者免疫功能的影響

苗 毅1，田敬榮2，任春梅1，李 勇3*

(1.河北省邯鄲市中心醫(yī)院心臟血管外科，河北 邯鄲 056001； 2.河北省邯鄲市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河北 邯鄲 056001；3.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科，河北 石家莊 050011)

目的觀察輸入輻照血對(duì)食管癌手術(shù)患者免疫功能的影響。方法選取收治的不需要輸血的20例食管癌患者為Ⅰ組(對(duì)照組)；選取術(shù)中輸入輻照血(濾白懸浮紅細(xì)胞)的20例食管癌患者為Ⅱ組，選擇術(shù)中輸入新鮮血(濾白懸浮紅細(xì)胞)的20例食管癌患者為Ⅲ組。全部患者分別于術(shù)前，術(shù)后第1天、第7天、第14天檢測T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+和CD8+，以及免疫球蛋白IgG、IgA和IgM。結(jié)果Ⅰ組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM均在術(shù)后第1天降低，術(shù)后第7天和第14天逐漸升高至術(shù)前水平，Ⅱ組輸輻照血漿后各項(xiàng)免疫指標(biāo)與Ⅰ組比較變化不大，Ⅲ組在術(shù)后第1天各項(xiàng)免疫指標(biāo)明顯受到抑制，雖然術(shù)后第7天和第14天有升高，但仍沒有達(dá)到術(shù)前水平，3組組間、時(shí)點(diǎn)間、組間·時(shí)點(diǎn)間交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論食管癌患者圍手術(shù)期輸輻照血(濾白懸浮紅細(xì)胞)對(duì)患者免疫功能無明顯影響，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

食管腫瘤；輻照血；免疫功能doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2015.11.022

輸血是保證臨床各種外科大手術(shù)順利進(jìn)行的基礎(chǔ)。圍手術(shù)期輸血可能會(huì)導(dǎo)致患者的免疫功能受到抑制，同時(shí)可能引起腫瘤復(fù)發(fā)、感染率增加、縮短術(shù)后的生存時(shí)間等不良后果[1]，然而術(shù)中輸血又是保證患者安全以及手術(shù)成功的重要措施。目前臨床上提倡的成分輸血具有很多優(yōu)越性，但在成分血的制備過程中仍會(huì)有核細(xì)胞殘留，因此在輸血后可能會(huì)使受血者機(jī)體免疫功能受到抑制。輻照血是指血液經(jīng)過一定劑量的放射線(γ射線或X射線)的照射，直接損傷T淋巴細(xì)胞的DNA，使血液中的淋巴細(xì)胞喪失復(fù)制分化能力，防止其在受血者體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)[2]。本研究旨在觀察食管癌患者術(shù)中輸入輻照成分血(濾白懸浮紅細(xì)胞)后對(duì)患者免疫功能的影響，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年9月—2011年7月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院和河北省邯鄲市中心醫(yī)院收治的確診為食管癌的患者60例。TNM分期均為Ⅱ～Ⅲ期，卡氏功能狀態(tài)評(píng)分>80分，血紅蛋白>112g/L，血細(xì)胞比容>36%，血小板計(jì)數(shù)>100×109/L，凝血酶原時(shí)間正常，心功能2級(jí)以上，無明顯肝腎功能損害。所有輸血患者均為首次受血，在輸血前未進(jìn)行過放療、化療以及使用影響免疫功能的藥物。選取不需要輸血的20例食管癌患者為Ⅰ組(患者來自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院，對(duì)照組)，男性12例，女性8例，年齡38～70歲，中位年齡55歲；選取術(shù)中輸入輻照成分血(濾白懸浮紅細(xì)胞)的20例食管癌患者(患者來自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院)為Ⅱ組，男性11例，女性9例，年齡38～72歲，中位年齡54歲；選取術(shù)中輸入新鮮成分血(濾白懸浮紅細(xì)胞)的20例食管癌患者(患者來自邯鄲市中心醫(yī)院)為Ⅲ組，男性12例，女性8例，年齡37～71歲，中位年齡54歲。3組各項(xiàng)基礎(chǔ)指標(biāo)均衡，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 Ⅰ組不輸血，輸注羥乙基淀粉(賀斯)維持血容量；Ⅱ組術(shù)中輸入400mL輻照成分血(濾白懸浮紅細(xì)胞)；Ⅲ組輸入400mL未經(jīng)輻照的新鮮成分血(濾白懸浮紅細(xì)胞)。3組麻醉方法相同，術(shù)中以平衡液及生理鹽水補(bǔ)液。術(shù)中輸入的血液均為1周以內(nèi)的庫存血，采用枸櫞酸鈉-磷酸鹽-葡萄糖保存液保存，輻照血液在術(shù)前采用γ射線進(jìn)行照射，輻射劑量為30Gy。

1.3 觀察指標(biāo) 3組患者分別于術(shù)前1d以及術(shù)后第1天、第7天、第14天早晨空腹采集外周靜脈血，EDTA抗凝。應(yīng)用免疫熒光試劑盒，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞亞群水平；采用免疫比濁法檢測外周血免疫球蛋白IgG、IgA和IgM。

2 結(jié) 果

2.1 3組外周血T細(xì)胞亞群水平比較 3組術(shù)前外周血T細(xì)胞亞群水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Ⅰ組CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+均在術(shù)后第1天降低，術(shù)后第7天和第14天后逐漸升高至術(shù)前水平，Ⅱ組輸輻照血漿后各項(xiàng)免疫指標(biāo)與Ⅰ組比較變化不大，Ⅲ組術(shù)后第1天各項(xiàng)免疫指標(biāo)明顯受到抑制，雖然術(shù)后第7天和第14天有升高，但仍沒有達(dá)到術(shù)前水平，3組組間、時(shí)點(diǎn)間、組間·時(shí)點(diǎn)間交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

組別CD3+術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天CD4+術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天Ⅰ組53.47±2.4951.62±2.6554.20±2.5156.83±2.8836.83±2.4032.79±3.4835.26±3.5736.89±2.47Ⅱ組53.27±2.8551.23±2.4354.16±2.5556.69±2.5936.59±2.7032.40±3.7435.57±3.5336.73±2.64Ⅲ組53.65±2.7143.11±3.1545.49±2.9347.22±2.4036.72±2.5225.89±3.4526.55±3.3427.31±2.68組間F=7.890 P=0.000F=7.280 P=0.000時(shí)點(diǎn)間F=94.455 P=0.000F=13324.678P=0.000組間·時(shí)點(diǎn)間F=24.756 P=0.000F=17.063 P=0.000組別CD8+術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天CD4+/CD8+術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天Ⅰ組26.93±2.8326.18±2.7227.16±2.4627.08±2.651.37±0.521.25±0.121.30±0.221.36±0.15Ⅱ組26.82±2.7826.13±2.7427.11±2.2926.95±2.801.38±0.451.24±0.161.31±0.201.35±0.17Ⅲ組26.78±2.9435.61±2.7035.39±2.7135.17±2.611.39±0.390.72±0.080.75±0.090.77±0.12組間F=3438.754 P=0.000F=9129.054 P=0.000時(shí)點(diǎn)間F=2166.846 P=0.000F=118.917 P=0.000組間·時(shí)點(diǎn)間F=10.717 P=0.001F=3727.368 P=0.000

2.2 3組免疫球蛋白水平比較 3組術(shù)前免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Ⅰ組IgG、IgA、IgM均在術(shù)后第1天降低，術(shù)后第7天和第14天逐漸升高至術(shù)前水平，Ⅱ組輸輻照血漿后各項(xiàng)免疫指標(biāo)與Ⅰ組比較變化不大，Ⅲ組術(shù)后第1天各項(xiàng)免疫指標(biāo)明顯受到抑制，雖然術(shù)后第7天和第14天有升高，但仍沒有達(dá)到術(shù)前水平，3組組間、時(shí)點(diǎn)間、組間·時(shí)點(diǎn)間交互作用差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

組別IgG術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天Ⅰ組12.52±2.1112.18±1.5312.37±1.5812.64±1.51Ⅱ組12.58±2.0612.15±1.5612.33±1.6712.61±1.49Ⅲ組12.59±2.038.92±1.429.03±1.759.68±1.84組間F=1535.93 P=0.000時(shí)點(diǎn)間F=199.371 P=0.000組間·時(shí)點(diǎn)間F=8.923 P=0.003組別IgA術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天Ⅰ組2.75±0.202.50±0.192.64±0.222.81±0.26Ⅱ組2.74±0.222.48±0.212.62±0.232.78±0.31Ⅲ組2.77±0.181.29±0.141.32±0.151.56±0.24組間F=5314.600 P=0.000時(shí)點(diǎn)間F=546.948 P=0.000組間·時(shí)點(diǎn)間F=6452.184 P=0.000

組別IgM術(shù)前術(shù)后第1天術(shù)后第7天術(shù)后第14天Ⅰ組1.37±0.331.14±0.231.26±0.351.44±0.29Ⅱ組1.36±0.351.12±0.271.24±0.381.42±0.31Ⅲ組1.35±0.370.84±0.390.91±0.420.96±0.18組間F=1443.505 P=0.000時(shí)點(diǎn)間F=399.875 P=0.000組間·時(shí)點(diǎn)間F=583.055 P=0.000

3 討 論

食管癌是嚴(yán)重威脅人類健康的常見的惡性腫瘤之一，每年全球因食管癌死亡的患者約30萬，我國是食管癌的高發(fā)國家，每年全球的新發(fā)病例中中國人占一半以上[3]，食管癌在我國的發(fā)病率居惡性腫瘤的第5位，病死率居第4位[4]。目前外科手術(shù)仍是食管癌主要治療模式之一[5-6]。食管癌患者自身免疫力低下，對(duì)其實(shí)行的全身麻醉、手術(shù)治療以及手術(shù)創(chuàng)傷引起的術(shù)后應(yīng)激反應(yīng)，均可引起腫瘤患者術(shù)后免疫功能紊亂，加重免疫抑制[7]。食管癌手術(shù)創(chuàng)傷大、手術(shù)時(shí)間長、術(shù)中出血較多，為了及時(shí)糾正患者術(shù)中貧血和血容量不足，術(shù)中輸血必不可少。但是由于血液中含有多種成分，輸血可能會(huì)通過不同的途徑影響受血者的免疫功能，進(jìn)而會(huì)加重患者術(shù)后的免疫抑制，使機(jī)體內(nèi)殘存的脫落的腫瘤細(xì)胞逃逸機(jī)體的免疫監(jiān)視，導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移[8]，從而在一定程度上限制了輸血在腫瘤手術(shù)患者中的應(yīng)用。目前臨床多提倡成分輸血，然而在成分血的處理過程中仍會(huì)出現(xiàn)核細(xì)胞的殘留。

有研究認(rèn)為，腫瘤患者在輸血后引起機(jī)體免疫抑制可能與異體單核細(xì)胞、白細(xì)胞源可溶性介質(zhì)、人類可溶性白細(xì)胞抗原有關(guān)[9]。淋巴細(xì)胞對(duì)電離輻射特別敏感，經(jīng)過一定劑量的照射后，淋巴細(xì)胞不能修復(fù)損傷的DNA，從而導(dǎo)致其不能復(fù)制和分化，使淋巴細(xì)胞失去免疫活性，即使在受者體內(nèi)存活，也不會(huì)對(duì)受血者的機(jī)體產(chǎn)生排斥和攻擊。本研究選取了60例食管癌患者，將其分為3組進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，食管癌患者在圍手術(shù)期輸入未經(jīng)輻照的成分血后，與未輸血的Ⅰ組相比，T細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平明顯降低，CD8+水平顯著上升，說明異體輸血加劇了食管癌患者已經(jīng)存在的細(xì)胞免疫功能損害，而輸入輻照成分血的患者T細(xì)胞亞群的表達(dá)水平則未出現(xiàn)顯著變化。免疫球蛋白屬于特異性免疫的重要指標(biāo)，主要存在于組織液、外分泌液以及血液中，在一定程度上對(duì)機(jī)體的免疫狀態(tài)進(jìn)行表達(dá)[10]。本研究結(jié)果顯示，與未輸血的Ⅰ組相比，輸入未經(jīng)輻照的成分血的Ⅲ組，外周血免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量顯著降低，產(chǎn)生這一現(xiàn)象的主要原因可能是異體輸血使得機(jī)體B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體減少，患者的體液免疫功能降低，輸入輻照血的Ⅱ組患者外周血免疫球蛋白的表達(dá)量未出現(xiàn)顯著變化。

本研究結(jié)果表明，食管癌手術(shù)患者在圍手術(shù)期輸入輻照成分血后，機(jī)體的細(xì)胞免疫指標(biāo)T細(xì)胞亞群水平以及體液免疫指標(biāo)免疫球蛋白的含量均無明顯變化，說明血液經(jīng)過一定劑量的射線照射后，淋巴細(xì)胞滅活，對(duì)患者的免疫功能不產(chǎn)生負(fù)面影響。同時(shí)也進(jìn)一步證實(shí)了供血中的淋巴細(xì)胞可引起食管癌患者的免疫抑制。因此，在條件允許的情況下，對(duì)于食管癌患者來說輸入輻照血是一種較為安全的輸血技術(shù)，該技術(shù)可以避免異體輸血對(duì)機(jī)體免疫功能的干擾，因此在臨床上具有十分現(xiàn)實(shí)的意義，值得推廣應(yīng)用。

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(本文編輯：許卓文)

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《河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》編輯部

2015-02-02；

2015-03-08

苗毅(1980-)，男，河北邯鄲人，河北省邯鄲市中心醫(yī)院主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事心胸外科疾病診斷治療。

*通訊作者。E-mail:liyongdoctor@126.com

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1007-3205(2015)11-1320-03