褐飛虱ABCG基因的克隆與表達分析

閘雯俊，王芳芳，李三和，胡剛，陳志軍，劉凱，周雷，楊國才，游艾青

摘要：三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白（ATP-binding cassette， ABC）廣泛分布于各種生物體中，是最大的膜蛋白家族之一。在昆蟲中，ABC轉運子不僅在分子轉運過程中有重要的功能，同時在殺蟲劑抗性、代謝和發育中都起到重要的作用。克隆和鑒定了褐飛虱（Nilaparvata lugens St？覽l， BPH）ABCG基因 （NlABCG），結果表明NlABCG基因全長1 222 bp， 含有一個長度為789 bp的開放閱讀框，編碼263個氨基酸。NlABCG蛋白與內華達古白蟻（Zootermopsis nevadensis） ABCG的同源性最高，達到69%。利用qRT-PCR 檢測NlABCG基因在褐飛虱不同發育階段和不同組織中的表達，發現NlABCG 轉錄本在褐飛虱的所有發育階段都有表達，在1齡若蟲中表達量最低，隨著生長發育表達量逐漸升高。NlABCG在褐飛虱5齡若蟲的中腸中表達量最高。NlABCG基因的序列特征和表達譜非常保守，為其功能的分析提供了信息。

關鍵詞：褐飛虱（Nilaparvata lugens St？覽l， BPH）;NlABCG;克隆

中圖分類號：S435 ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ?文章編號：0439-8114（2014）23-5871-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn 0439-8114.2014.23.064

ABC 轉運蛋白最早發現于細菌，是細菌質膜上的一種具有運輸功能的 ATP 酶（Transport ATPase），是一個龐大而多樣化的蛋白家族。ABC轉運蛋白是膜整合蛋白，它通過利用 ATP 水解過程釋放的能量對溶質中各種生物分子進行跨膜轉運，其轉運的底物包括糖、氨基酸、金屬離子、多肽、蛋白質、細胞代謝產物和藥物等[1]。ABC 轉運蛋白在生物體內以全分子或半分子轉運蛋白的形式存在，全分子轉運蛋白由2個核苷酸結合域（Nucleotide ?bindingdomain，NBD）和2個跨膜結構域（Transmembrane domain，TMD）構成，每個半分子轉運蛋白包括1個NBD和1個TMD，NBD位于細胞質內，在 NBD內有一個約200個氨基酸構成的保守序列，包含了3個保……