細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子在人前列腺癌組織的表達及臨床意義▲

黃俊波 莊曉波 鄭躍東

(廣東省揭西縣人民醫院泌尿外科，揭西縣 515400，E-mail:306669335@qq．com)

隨著人口老齡化和居民飲食結構變化，前列腺癌的發病率和死亡率逐年上升。惡性腫瘤的生物學特性多變，其生長和侵襲、轉移是一個多因素、多步驟的復雜過程［1］。運用分子生物學技術對調控基因及其表達的蛋白進行檢測，可更好地了解惡性腫瘤的生物學行為，并有助于尋找治療的新靶點［2］。細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子CD147是新發現的腫瘤細胞膜相關抗原，在腫瘤侵襲和轉移的多個關鍵環節扮演著重要角色［3］。但目前CD147在前列腺癌中作用的報告較少。本研究運用免疫組化方法檢測CD147蛋白在人前列腺癌的表達情況，旨在探討其在前列腺癌發生發展中的作用，現報告如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 2008年1月至2012年12月我院收治前列腺癌患者56例(前列腺癌組)，年齡(58．6±4．2)歲。同期在我院就診良性前列腺增生患者56例(前列腺增生組)，年齡(56．9 ±5．4)歲，高分化8 例，中分化16例，低分化36例。兩組均經病理確診。排除合并嚴重臟器損傷者、嚴重精神性疾病者等。本研究經醫學倫理委員會批準，兩組患者或家屬均知情同意。

1．2 主要試劑 CD147單克隆抗體(稀釋濃度1∶50)、鏈霉菌抗生物素蛋白－過氧化酶試劑盒及二氨基聯苯胺染色顯色試劑盒均購自美國Sigma公司。

1．3 方法

1．3．1 收集臨床資料及標本:記錄前列腺癌組患者的詳細臨床資料，包括年齡、病理分級、臨床分期、Gleason評分［4］、有無淋巴結轉移、生存情況、分化程度等。Gleason評分＜5分為分化程度好;Gleason評分5～7分為分化程度中;Gleason評分＞7分為分化程度差或未分化。記錄前列腺增生組的年齡、病情等。于我院病理科取兩組患者的病灶石蠟標本，標本經10%甲醛固定，常規石蠟包埋，制作5 μm連續切片備用。

1．3．2 免疫組織化學染色:將組織蠟塊制成厚約5 μm的切片，按照鏈霉菌抗生物素蛋白－過氧化酶試劑盒說明書嚴格操作。使用已知陽性切片作為陽性對照，磷酸鹽緩沖液代替一抗作陰性對照。

1．3．3 結果判讀:光鏡(德國徠卡公司，DM1000型)下進行觀察，陽性表達位于細胞質或細胞膜，出現淺黃色、黃色或棕黃色顆粒時為陽性反應，出現陽性反應的細胞即為陽性細胞。依據染色深淺與視野內陽性細胞所占比例評定陽性反應的強度。觀察時每張切片選取5個高倍視野，每個視野計數100個細胞，按照觀察視野中陽性細胞所占的百分比例進行評分:≤5%時為0分，5% ～25%為1分，25% ～50%為2分，50% ～75%為3分，＞75%為4分。按照染色強度進行評分:0分 為陰性，1分為弱陽性，2分為中等陽性，3分為強陽性。兩者相乘得分≥3分時為陽性表達，＜3分時為陰性表達。

1．4 統計學分析 采用SPSS 20．0軟件進行統計分析，計數資料的比較采用χ2檢驗，各病理特征與臨床預后的關系采用Cox回歸分析法，以P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 兩組CD147表達情況比較 前列腺癌組CD147表達陽性率為100．0%(56/56)，明顯高于前列腺增生組的 14．3%(8/56)(χ2=84．000，P ＜0．001)。

2．2 前列腺癌組CD147與臨床病理參數間的關系

CD147的表達與Gleason評分、TNM分期、淋巴結轉移具有明顯關系(P＜0．05)，與患者的年齡和腫瘤分化程度無關(P ＞0．05)，見表1。

表1 前列腺癌組患者CD147與臨床病理參數間的關系(n，%)

2．3 前列腺癌患者Cox回歸模型多因素分析 對56例前列腺癌患者進行隨訪發現，1年時存活51例(91．1%)，2年時存活43例(76．8%)。CD147表達陽性、Gleason評分高是前列腺癌患者的預后差的危險因素(P＜0．05)，CD147陽性、Gleason評分高的患者，復發和死亡的風險大。見表2。

表2 Cox回歸模型多因素分析結果

3 討論

目前惡性腫瘤已成為我國居民首位死亡原因，腫瘤的浸潤轉移特性使其成為導致腫瘤患者死亡的主要原因和腫瘤臨床治療的主要困難。目前惡性腫瘤的發病機制及生物學行為成為生命科學中的研究熱點［5］。

CD147是一種新發現的腫瘤細胞膜相關抗原，廣泛表達于惡性腫瘤細胞表面［6］。腫瘤的侵襲及轉移的關鍵環節，涉及細胞外基質和基底膜的降解、腫瘤血管的形成等［7］。在這過程中，基質金屬蛋白酶(MMPs)幾乎能降解細胞外基質和基底膜的所有成分，在腫瘤細胞的浸潤與轉移中發揮著重要作用［8］。血管內皮生長因子(VEGF)是迄今發現的最重要的血管生成促進因子，已被證實是腫瘤新生血管生成的主要調節因子。VEGF通過促進血管內皮細胞的有絲分裂，增加血管通透性等使血管內膠質外滲，為血管內皮細胞生長提供必需的基質，進而促進腫瘤血管形成，為腫瘤的增殖和轉移提供條件［9］。有研究證明CD147具有刺激腫瘤細胞和間質細胞分泌和活化MMPs，介導腫瘤細胞之間、腫瘤細胞和基質細胞的相互作用;與MMPs在腫瘤細胞表面形成復合物，形成腫瘤細胞－細胞外基質金屬蛋白酶類－基質成分構成的腫瘤侵襲和轉移的局部微環境［10－12］。因此人們廣泛認同CD147的表達與人體某些惡性腫瘤的惡性程度、侵襲能力和轉移及預后密切相關。

本文結果顯示，前列腺癌組CD147表達陽性率為100．0%，明顯高于前列腺增生組的 14．3%(P ＜0．05)。表明前列腺癌組織中CD147表達率明顯高于前列腺良性增生組織，這與相關文獻［13］報告一致。本文結果顯示，CD147的表達與前列腺癌Gleason評分、TNM分期、淋巴結轉移顯著相關(P＜0．05)，而與患者的年齡和腫瘤分化程度無關(P＞0．05)。Cox回歸模型分析結果顯示，CD147表達陽性、Gleason評分高是前列腺癌患者的預后危險因素(P＜0．05)，CD147陽性、Gleason評分高的患者，復發和死亡的風險大。Gleason評分是由病理科醫生在顯微鏡下，通過對前列腺癌細胞進行形態學觀察所建立的病理學評估方法，其結果受醫生的主觀因素影響較大［14］。相對而言，CD147的檢測結果更為客觀可靠。本組研究結果表明CD147異常表達是除Gleason評分外的可用來獨立判斷前列腺癌進展程度的臨床指標，其表達上調可作為前列腺癌預后不良的危險信號。

綜上所述，前列腺癌組織CD147的高表達在腫瘤的發生與發展中發揮著重要作用，可作為研究腫瘤發病機制、判斷腫瘤進展及臨床預后的有效分子標志。

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