豬偽狂犬病毒野毒感染的PCR檢測方法建立及應用

范克偉，戴愛玲，吳德峰，楊小燕＊，江丹丹

（1.龍巖學院生命科學學院，福建龍巖364012；2.福建省預防獸醫學與獸醫生物技術重點實驗室，福建龍巖364012；3.福建農林大學動物科學學院，福建福州350002）

豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性傳染病，以新生仔豬的腹瀉及神經癥狀，妊娠母豬繁殖障礙、流產、死胎及呼吸道癥狀，成年豬隱形感染，長期帶毒排毒為特征［1］。在我國豬偽狂犬病的流行范圍很廣，迄今為止已有20 多個省份出現該病的流行［2－3］。尤其自2012年以來，由豬偽狂犬病毒變異株引起的豬偽狂犬病出現了新的發病特征，發病率和死亡率明顯上升，給我國養豬業造成了重大的經濟損失［4－8］。該病目前尚無有效治療藥物，豬偽狂犬病的防制主要依靠基因缺失疫苗的廣泛應用，雖然疫苗接種可使豬免于發病，但不能阻止野毒的潛伏感染［9］。由于該病的流行形勢發生了新變化，近年來疫苗的保護率不是很高，這給該病的防控工作大大增加了難度。此外，PRV 的檢測方法主要是針對抗體或gE 抗體缺失的血清學檢測方法，無法區分疫苗免疫豬和野毒感染豬［10］。

糖蛋白gB 是PRV 的一個重要包膜組分和中和抗原，對于PRV 感染必不可少。而gB 基因對PRV 的復制也是不可缺少的［11－12］。gE 基因是PRV 的主要毒力基因之一，但不是病毒復制所需的［13］。PRV Bartha－K61株疫苗（缺失gE／gI）目前在世界上應用最為廣泛，市場占有率超過90%。因此，本研究根據豬偽狂犬病毒gB 和gE 基因序列，建立了快速鑒別豬偽狂犬病毒gE 基因缺失疫苗毒與野毒的雙重PCR 檢測方法，對于豬偽狂犬病的快速確診具有重要意義?！?br>