子宮肌瘤中雌激素受體、孕激素受體及Wilms瘤基因的表達及相關性

張鳳榮，程玲瑗

（天水市第一人民醫院，甘肅 天水 741000）

子宮肌瘤是女性生殖器最常見的良性腫瘤，也是人體最常見的腫瘤。據尸檢資料顯示，35歲以上婦女中約20%患有子宮肌瘤，因很多患者無癥狀或肌瘤很小，臨床報道的發病率遠較真實發病率低。子宮肌瘤雖惡變率低，但可引起子宮異常出血、腹痛、腰酸、下腹墜脹、感染、壓迫癥狀甚至不孕等多種并發癥，嚴重影響患者身心健康。其病因及發病機制目前仍不十分清楚，目前主要的治療手段是手術切除。本研究通過觀察雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及 Wilms瘤基因（WT-1）在子宮肌瘤中的表達情況，探討子宮肌瘤的發病原因和機制，從而為子宮肌瘤的非手術治療提供科學的理論依據。

1 一般資料

1.1 研究對象

收集2012年1月至2014年8月我院手術切除、病理診斷明確的子宮肌瘤病例1 372例，將因子宮肌瘤切除子宮的、手術前至少3月內沒有經過任何激素治療的病例納入研究范圍，隨機選擇150例作為研究組，對應的子宮肌層組織作為對照組，切白片3張，做ER、PR及WT-1標記。1 372例患者按年齡分5組：＜30歲組，30～39歲組，40～49歲組，50～59歲組，＞59歲組，將標記結果按照-、+、++統計歸類。

1.2 臨床表現

月經量增多1 210例，月經紊亂531例，下腹痛192例，貧血521例，下腹包塊221例，白帶增多231例，合并其他疾病者232例。其中：合并宮頸癌27例，合并子宮內膜癌11例，合并腺肌癥122例，合并腺瘤樣瘤18例，合并妊娠8例，合并卵巢腫瘤45例，合并侵襲性葡萄胎1例。

1.3 試劑及方法

本項目隨機選擇多發、單發內膜下、肌層及漿膜下子宮肌瘤病例150例，同時取對應的子宮肌層組織作為對照，所有標本均采用4%甲醛固定，石蠟包埋、HE染色。采用免疫組化法（SP），切片厚 4 μm，切白片 3張，高溫修復或酶消化，4℃冰箱過夜，以PBS緩沖液代替第一抗體作為陰性對照，已知的陽性組織作為陽性對照。免疫組化試劑ER、PR、WT-1及SP試劑盒購自邁新公司，操作按試劑盒說明書要求進行。

1.4 結果判讀

ER、PR及WT-1陽性表達定位在細胞核，以看到棕黃色顆粒分布為陽性。（1）選染色均勻有表達的區域，以陽性細胞占視野的比例進行分級：0：＜5%；1：6%～25%；2：26%～50%；3：＞50%。（2）按著色強弱分：0：陰性；1：弱，淡黃色；2：中等，黃色；3：強，棕褐色。（1）（2）相加判讀結果：0～2 為（-），3～4 為（+），5～6為（++）。

1.5 統計學分析

所有數據均采用SPSS 18.0軟件進行處理，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結果

2.1 子宮肌瘤在不同年齡段的分布情況

1 372 例子宮肌瘤患者中，40～49歲918例，占66.91%，其中單純子宮肌瘤831例，占90.52%（見表1）。

2.2 ER、PR及WT-1在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中的表達情況

ER、PR在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中的表達，有顯著性差異（P＜0.05）；而WT-1在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中均高表達，但二者之間的差異無顯著性（P＞0.05），見表2、表3。

表1 子宮肌瘤在不同年齡段的分布情況

表2 ER、PR在子宮肌瘤和子宮肌層組織中的表達情況

表3 WT-1在子宮肌瘤和子宮肌層組織中的表達情況

3 討論

（1）子宮肌瘤是女性生殖器最常見的良性腫瘤，多見于30～50歲婦女，其中40～50歲發病率高達51.2%～60.0%[1]。本組資料顯示：本地區子宮肌瘤患者亦多見于30～50歲女性，以40～49歲組發病率最高，占66.91%，單純因子宮肌瘤切除子宮的占所有切除子宮患者數的71.43%。子宮肌瘤的臨床表現因肌瘤所在部位、多少、大小而不同，如位于漿膜層、肌層、內膜下，多發或單發，臨床癥狀主要是月經量增多、月經紊亂、下腹墜痛、貧血、下腹包塊等。子宮肌瘤在本地區發病率較高，也是導致子宮肌瘤病種醫療費用不斷增高的原因之一，并且嚴重影響女性身心健康和生活質量，所以，全社會都應該重視該病的預防、治療。開展子宮肌瘤的非手術治療，對于降低醫療費用，提高女性生活質量，具有重要意義。

（2）雌、孕激素與子宮肌瘤的關系：雌、孕激素與子宮肌瘤的發生、發展關系密切，一直被認為是子宮肌瘤發生和發展的促進劑，當外源性給予雌激素或妊娠時，子宮肌瘤迅速增大，絕經后肌瘤停止生長甚至萎縮、消失，表明子宮肌瘤具有激素依賴性。相關資料顯示：雌、孕激素水平在肌瘤組織中的表達高于正常肌層組織，說明二者在肌瘤的發生、發展中起促進作用。本組資料亦顯示ER、PR在肌瘤組織中高表達，明顯高于周圍肌層組織，這與文獻報道[2]一致。臨床上對于子宮肌瘤患者采用米非司酮治療[3]，已取得顯著效果，對于圍絕經期子宮肌瘤患者，采取期待療法，同樣取得了一定效果。

（3）WT-1與子宮肌瘤的關系：有資料顯示，胰島素樣生長因子 2（IGF-2）、胰島素樣生長因子 1受體（IGF-1受體）[4]、表皮生長因子（EGF）、轉化生長因子 β（TGF-β）、Bcl-2和 C-myc基因等，在子宮平滑肌瘤的發生中通過抑制細胞凋亡或促使子宮平滑肌瘤分泌、旁分泌的方式，促進子宮平滑肌瘤細胞增殖和生長。WT-1基因[5]于1990年在腎的Wilm腫瘤中作為抑癌基因被分離克隆，其染色體位于11P13，能與IGF-1、TGF-β、EGF、Bcl-2、C-myc等生長調控因子及其受體結合，調節這些生長因子的轉錄。我們研究發現：WT-1在子宮肌層和子宮平滑肌瘤中均有過表達，證明子宮肌層及肌瘤中均有WT-1基因存在，而肌瘤中WT-1的表達與肌層中有一定差異，提示WT-1參與了肌瘤的發生。資料顯示，WT-1能與上述調控因子及其受體結合，激活或抑制生長因子轉錄，因此我們推測：子宮局部雌、孕激素水平增高，導致部分生長因子及其受體含量增加，WT-1基因可能以不同的異構體形式與以上調控因子結合，激活了其轉錄作用，導致子宮平滑肌瘤的發生、發展。目前國內對ER、PR及WT-1在子宮平滑肌瘤中的表達情況，尚無相關報道。

WT-1可以與多種生長因子結合，但其在女性胃壁和腸壁平滑肌組織中均呈陰性，在正常子宮肌壁內高表達，提示WT-1過度表達可能與雌、孕激素水平有關。因此，使用激素拮抗劑，不僅可以有效控制肌瘤生長，而且可以通過降低或抑制WT-1表達，達到抑制上述生長因子，阻止肌瘤生長，甚至使其萎縮、消失，或通過選擇干預位點，進行靶點治療，達到治療子宮平滑肌瘤的目的，為子宮平滑肌瘤的藥物治療提供理論依據。

總之，我們認為：子宮平滑肌瘤是多因素、多種生長因子共同作用的結果，降低性激素水平，阻斷WT-1基因位點，均能達到阻止肌瘤生長或使其萎縮甚至消失的目的。