低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用

李擁軍

山東省淄博市中心醫(yī)院輸血科，山東淄博 255036

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，輸血已作為一種成熟的醫(yī)療手段，被廣泛地應(yīng)用于臨床治療和搶救過程中。輸血過程中避免溶血性輸血反應(yīng)，保證輸血安全是治療的關(guān)鍵。因此，輸血前需采用科學(xué)可靠的方法進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，傳統(tǒng)常用的鹽水法雖然操作簡便、成本低，但只能檢出不相匹配的LgM 抗體，而對不完全抗體IgM無法進(jìn)行檢出[1]，存在一定的局限性，無法滿足大量需求和交叉配血時(shí)間緊迫。低離子聚凝胺技術(shù)(Manual Polybrene Test，MPT)對IgM 抗體和IgG 抗體檢驗(yàn)效果好，且試驗(yàn)過程簡單、易于操作、結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高，便于常規(guī)和急診配血。為了探究低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值，該院2012年1月—2013年1月對320例受血者及供血者采用鹽水法和MPT 法進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，并對比了兩種方法的試驗(yàn)結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的320例受血者為研究對象，其中男176例，女144例；年齡3～69歲，平均年齡35.5歲；320例患者無嚴(yán)重血液疾病，所有血樣均采用鹽水法和MPT 法進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)原理

聚凝胺（又名溴化己二甲銨）是一種高價(jià)陽離子聚合物，當(dāng)紅細(xì)胞懸液中加入聚凝胺后，產(chǎn)生了大量正電荷，繼而使得紅細(xì)胞表面唾液酸所帶的負(fù)電荷中和，提高了分子活性，使紅細(xì)胞相互接近，并發(fā)生非特異性凝集。在加入重懸液后紅細(xì)胞凝集散開，紅細(xì)胞未被致敏的會(huì)出現(xiàn)可逆的非特異性凝集，屬于陰性反應(yīng)；在加入重懸液后紅細(xì)胞凝集不散開，紅細(xì)胞被致敏的會(huì)出現(xiàn)不可逆的非特異性凝集，屬于陽性反應(yīng)[2]，由此可特異性地檢出相應(yīng)的血型Ag或Ab(IgG、IgM)。

1.3 試劑與儀器

該研究中MPT 法采用的聚凝胺介質(zhì)試劑盒為珠海貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，試劑有低離子溶液、重懸液、凝聚胺溶液等。鹽水法選用普通生理鹽水為介質(zhì)。儀器：試管、顯微鏡、離心機(jī)、電熱恒溫水箱等。

1.4 方法

MPT 法：取兩支試管，分別標(biāo)注受血者、供血者的姓名，區(qū)分主測管、次測管。加入2 滴受血者血清、1 滴3%的供血者紅細(xì)胞懸液于主測管中，加入2 滴供血者血清、1 滴3%的受血者紅細(xì)胞懸液于次測管中。然后，加入低離子介質(zhì)0.7 mL 于兩支試管中，混勻，室溫下靜置1 min 后加入2 滴凝聚胺溶液，混勻，室溫靜置15 s，用離心機(jī)3 000 r/min（相當(dāng)于1 000 g 離心力）18 s，倒掉上清液，使管底剩余0.1 mL 液體。輕搖試管，觀察到試管出現(xiàn)明顯凝集后，在主測管及次測管中滴入2 滴重懸液，輕搖試管，再次觀察試管中是否有紅細(xì)胞凝集，如有則判斷為陽性；若紅細(xì)胞凝集消失，則判斷為陰性。

鹽水法：按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》相關(guān)規(guī)定規(guī)范操作。鹽水法與MPT 法同步進(jìn)行。

2 結(jié)果

采用鹽水法和MPT 法對320例血樣進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，結(jié)果顯示，MPT 法過程簡單、操作簡便，平均耗時(shí)4.5 min，明顯少于鹽水法（平均耗時(shí)7.2 min）。MPT 法準(zhǔn)確率高，320例中有13例檢測結(jié)果呈陽性，陽性檢出率為4.06%；穩(wěn)定性強(qiáng)、靈敏度高，陽性結(jié)果中的13例樣本在顯微鏡下均可見特異性細(xì)胞凝集。傳統(tǒng)鹽水法準(zhǔn)確率相對較低，穩(wěn)定性一般，靈敏度一般，320例樣本中只檢出6例陽性結(jié)果，3例可見特異性細(xì)胞凝集，陽性檢出率為1.88%。見表1。

表1 鹽水法和MPT 法的比較

3 討論

為了規(guī)范醫(yī)療機(jī)構(gòu)合理用血，推廣科學(xué)用血技術(shù)，保證臨床用血的安全，國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)（原衛(wèi)生部）于2000年6月根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床用血管理辦法》制定了《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》，為輸血醫(yī)務(wù)人員提供正確、安全、規(guī)范地從事輸血工作的綱領(lǐng)性文件[3]。凡輸注全血、濃縮紅細(xì)胞、紅細(xì)胞懸液、洗滌紅細(xì)胞、冰凍紅細(xì)胞、濃縮白細(xì)胞、手工分離濃縮血小板等患者，應(yīng)進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，以避免溶血性反應(yīng)，保證輸血安全。因此，輸血前必須對供血樣本和受血者進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，而交叉配血試驗(yàn)方法對試驗(yàn)結(jié)果有著重要的影響。目前臨床常用的有鹽水法、MPT 法等，傳統(tǒng)的鹽水法雖然操作簡單、費(fèi)用低廉，但只能檢出IgM 抗體，不能檢出不配合的IgG 抗體，這就降低了準(zhǔn)確率，一旦造成漏檢就可能引起輸血反應(yīng)。可見，鹽水法準(zhǔn)確率不高，且無法滿足臨床應(yīng)用的需求。而MPT 法能檢出完全抗體和不完全抗體，能促進(jìn)紅細(xì)胞及不規(guī)則抗體的反應(yīng)[4]，且此方法靈敏度高、準(zhǔn)確度高，操作簡單、價(jià)格低廉，適合基層醫(yī)院廣泛應(yīng)用。MPT 法作用原理是通過低離子介質(zhì)降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，從而促進(jìn)紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體發(fā)生反應(yīng)。在MPT 法試驗(yàn)過程中，紅細(xì)胞懸液中滴入聚凝胺溶液后，產(chǎn)生大量正電荷，繼而使得紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷中和，紅細(xì)胞表面的電位降低，從而提高了分子活性，使得紅細(xì)胞發(fā)生非特異性凝集，當(dāng)加入重懸液后，凝集現(xiàn)象不消失。

該組試驗(yàn)通過對比鹽水法和MPT 法的臨床應(yīng)用，得出鹽水法雖然操作簡單、成本低，但其檢測不出不規(guī)則抗體，對ABO 以外的抗體不能檢測，其中不規(guī)則的抗體大多為IgG類，主要是由于免疫刺激、輸血、妊娠產(chǎn)生，通過鹽水法不能被凝集，只有被致敏的相應(yīng)抗原才能夠出現(xiàn)凝集[5]。而MPT 法不僅操作簡單、費(fèi)用低廉，更重要的是能同時(shí)檢出完全抗體和不完全抗體，避免遲發(fā)性溶血反應(yīng)發(fā)生，避免漏檢，可為臨床治療診斷提供參考依據(jù)[6]。該研究過程中發(fā)現(xiàn)聚凝胺法是從凝集到無凝集的一個(gè)發(fā)生過程，因此，試驗(yàn)過程中要注意解聚的時(shí)間和掌握試管振搖的力度。MPT 法平均耗時(shí)4.5 min，略少于祁蕙燕[7]研究中的6 min，應(yīng)考慮樣本數(shù)量及試驗(yàn)人員操作成熟度的影響。該組鹽水法、MPT法的陽性檢出率均略高于龍亞銀[8]的研究數(shù)據(jù)，應(yīng)考慮檢驗(yàn)樣本中有無溶血性患者及長期輸血史患者，溶血性患者及長期輸血患者所占比例越高，陽性檢出率越高。因此，MPT 法與鹽水法具有準(zhǔn)確性高、穩(wěn)定性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，可快速準(zhǔn)確的檢測出不規(guī)則抗體IgG，不會(huì)發(fā)生漏檢現(xiàn)象，具有很好的應(yīng)用價(jià)值，值得在各醫(yī)院推廣使用。

[1]陳欣榮.交叉配血方法應(yīng)用效果評(píng)價(jià)[J].中國醫(yī)藥指南,2013,11(8):574-575.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:258.

[3]賴順華,蔡國斌,徐小丹.淺談低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國醫(yī)藥指南,2012,10(33):96-97.

[4]葉旭英,曹穎.低離子聚凝胺用于輸血檢驗(yàn)價(jià)值分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2013,11(11):45-46.

[5]秦江萍.低離子凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代診斷與治療,2012，23（12）：2207-2208.

[6]許子珍.聚凝胺配血法與鹽水交叉配血法的應(yīng)用效果比較[J].吉林醫(yī)學(xué),2013,34（23）：4775.

[7]祁蕙燕.聚凝胺交叉配血試驗(yàn)在臨床輸血中的應(yīng)用體會(huì)[J].青海醫(yī)藥雜志,2012,42(11):59-60.

[8]龍亞銀.低離子聚凝胺法與鹽水法交叉配血效能的比較[J].廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,21(4):372-373.