老年肺結核患者細胞和體液免疫狀況及免疫干預治療對其的影響

趙 暉 (上海市松江區中心醫院肺科，上海 201600)

老年肺結核包括初發肺結核以及疾病遷延未愈至60歲以后的復治肺結核患者〔1〕。老年人肺結核患病率是普通人群的3倍以上;痰結核菌陽性率高，是肺結核病的重要傳染源之一;治療過程中復治率和耐藥率高，且易發生多種并發癥，影響生命質量;患者死亡率高，且治療費用高、療程長，給患者及其家庭造成沉重的經濟負擔和精神壓力。結核病的發生、發展和轉歸與患者的免疫功能狀況密切相關〔2〕。有研究〔3〕發現，母牛分枝桿菌菌苗為一種免疫調節劑，能夠提高患者免疫功能，改善患者免疫狀態，從而提升結核病治療的有效性。本研究初步探討老年肺結核患者的免疫狀況及免疫干預治療對患者免疫狀態的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2013年9月于本院感染科住院治療的老年肺結核患者80例(A組)，男43例，女37例，年齡60～79歲，平均(69.5±8.6)歲;選取同時間段體檢的80名健康老年人(B組)，男41例，女39例，年齡61～80歲，平均(68.8±9.1)歲。肺結核診斷按照中華醫學會結核病分科學會制定的結核病臨床診療指南診斷標準〔4〕。入選標準:年齡60～80歲;老年肺結核患者均為痰菌陽性患者，且此次治療前3個月內未使用過其他影響機體免疫功能的藥物;健康老年人為無肺結核及肺外結核疾病史且肺部影像學檢查未見肺結核影像學表現，且近1年內未接種卡介苗;近1個月內未發生病毒感染性疾病者。排除嚴重心、肺、肝、脾、腎臟疾病患者以及患有精神疾病、糖尿病、甲亢、腫瘤、自身免疫性疾病、艾滋病者。兩組人員性別、年齡及體質量指數無統計學差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 分別檢測A、B組細胞及體液免疫功能指標，細胞免疫檢測項目為外周血 T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值及NK細胞，體液免疫檢測項目為外周血免疫球蛋白(Ig)A、G及M。將A組80例患者根據隨機數字表法隨機分為治療組和對照組，每組40例。兩組患者均于第一次采血完成后采用2HRZE/4HR化療方案治療，治療組于化療第2周末開始聯合使用母牛分枝桿菌菌苗治療〔5〕(深部肌肉注射22.5 μg/次，每周1次，療程為8 w)，對照組不予以其他治療。兩組患者于治療第10周末再次采血并檢測細胞免疫功能指標。血液樣本采集方法:無菌采集受試者空腹狀態下靜脈血樣本2 ml，且標本在采集后30 min內送檢。

2 結果

2.1 老年肺結核組與老年健康組細胞免疫狀況比較 老年肺結核患者外周血CD3+、CD4+T淋巴細胞百分比及CD4+/CD8+比值較老年健康組顯著減低(P＜0.001);CD8+T淋巴細胞百分比顯著高于老年健康組(P＜0.05);老年肺結核組NK細胞百分比與老年健康組相比無統計學差異(P＞0.05)。見表1。

2.2 老年肺結核組與老年健康組體液免疫狀況比較 老年肺結核組外周血IgA、IgG及IgM水平，差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

2.3 老年肺結核組內治療組和對照組患者治療前后外周血T淋巴細胞比較 治療前兩組患者外周血T淋巴細胞水平差異無統計學意義(P＞0.05)。治療后治療組患者CD3+、CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+比值高于對照組患者(P＜0.05)，CD8+T淋巴細胞百分比較對照組低(P＜0.05)，見表2。

表1 老年肺結核組與老年健康組外周血淋巴細胞及檢測結果(s，n=80)

表1 老年肺結核組與老年健康組外周血淋巴細胞及檢測結果(s，n=80)

組別 CD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)CD4+/CD8+ NK(%)IgA(g/L)IgG(g/L)IgM(g/L)A 組 59.86±10.04 30.64±10.93 29.01±11.57 1.06±0.13 17.51±8.9 2.17±0.43 12.93±3.03 1.31±0.52 B 組 67.82±4.68 40.87±4.78 23.72±5.88 1.83±0.05 16.96±8.47 2.34±0.41 13.45±3.25 1.22±0.48 t/P值 －3.667/0.000 －3.983/0.000 2.334/0.029 －3.718/0.000 0.315/0.479 －0.682/1.769 －0.239/2.487 0.454/1.959

表2 治療組和對照組治療前后外周血淋巴細胞檢測結果(s，n=40，%)

表2 治療組和對照組治療前后外周血淋巴細胞檢測結果(s，n=40，%)

與治療組比較:1)P＜0.05

組別 治療前治療10 w后CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+治療組 59.13±10.26 30.62±10.03 28.98±10.44 1.07±0.13 65.73±7.21 40.94±8.83 23.01±7.19 1.66±0.13對照組 58.89±10.47 30.66±9.56 29.35±10.05 1.05±0.09 58.93±10.201)31.17±9.961)30.21±10.871) 1.09±0.071)

3 討論

老年肺結核傳染性強，耐藥率高，癥狀不典型且病程長，加之化療藥物易引起多種不良反應，給老年肺結核的防治工作帶來了極大的困難〔6〕。近年來，老年肺結核病的發病率呈不斷上升趨勢〔7〕，老年肺結核已受到越來越多的關注。

本研究結果說明結核分枝桿菌感染引起老年肺結核發生與CD3+和CD4+T淋巴細胞降低有關。有研究〔8〕證實，T淋巴細胞在控制結核分枝桿菌方面發揮主要作用，是人體防御結核感染的主要免疫機制。CD3+、CD4+T淋巴細胞能夠分泌多種細胞因子〔9〕，如產生γ-干擾素(IFN)，調節細胞免疫和體液免疫，且能夠產生細胞毒作用，介導靶細胞的溶解，發揮免疫效應。當感染結核分枝桿菌時，免疫功能低下者外周血T淋巴細胞，尤其是CD3+、CD4+T淋巴細胞減少，無法將病原體有效局限、抵抗和殺滅，從而引起疾病的發生。老年健康者外周血CD3+和CD4+T淋巴細胞正常，因其對結核桿菌產生及時而有效的免疫應答和抵抗作用，從而不會引起肺結核病的發生。由于CD3+、CD4+T淋巴細胞減少，CD8+T淋巴相對增多，CD8+T淋巴細胞發揮的作用相對增強。CD8+T淋巴細胞能夠識別已感染結核桿菌的細胞，并產生等某些細胞因子〔10〕，通過調節和介導免疫應答將已吞噬結核菌的巨噬細胞溶解或引起細胞凋亡，而這種免疫應答反應使得已被吞噬的結核分枝桿菌重新暴露、釋放和擴散，造成反復排菌后病原菌再次感染新的細胞，從而加劇了疾病的發生和進展，增加治療周期和難度。因此，外周血CD8+T淋巴細胞水平升高是老年肺結核患者疾病發生和進展原因之一。NK細胞在肺結核的發病機制中不發揮主導作用〔11〕，其含量對機體抵抗結核桿菌的作用無影響。

體液免疫狀態與是否發生老年肺結核無關。在已有的對結核分枝桿菌病原微生物學研究〔12〕以及對肺結核疾病發病機制的研究〔13〕中發現，結核分枝桿菌是細胞內病原菌〔14〕，而存在于人體血清中的抗體難以進入細胞內，從而無法識別結核分枝桿菌并發揮免疫效應。因此老年人外周血血清免疫球蛋白在抵抗和殺滅結核分枝桿菌方面無明顯作用。免疫干預治療方法能夠提高老年肺結核患者外周血CD3+和CD4+T淋巴細胞水平、CD8+T淋巴細胞百分比，改善患者細胞免疫功能。抗結核藥物能夠抑制或殺滅結核分枝桿菌，但對機體與抗結核分枝桿菌相關的免疫功能無影響，而免疫干預治療能夠提高患者免疫功能，改善患者細胞免疫狀態。應用母牛分枝桿菌菌苗〔15〕免疫干預可刺激T淋巴細胞增殖，尤其是 CD3+和CD4+T淋巴細胞增殖更明顯。CD3+和CD4+T淋巴細胞增多一方面可增加IL-2等細胞因子的分泌，使調節免疫應答作用增強，另一方面增強T淋巴細胞介導的細胞毒作用，及時吞噬和殺滅受感染的病變細胞，控制病情的發展。CD8+T淋巴細胞增殖較前兩者慢，其在外周血的百分比下降。已有研究〔16〕證實，CD8+T淋巴細胞數量的增高與結核病發病和細菌擴散密切相關。CD8+T淋巴細胞作用減弱，經CD8+T淋巴細胞處理后釋放并暴露的結核桿菌減少，因此病原菌在體內的擴散得到有效控制，有助于延緩病情發展、提高藥物治療的有效性。

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