超聲檢測乳腺浸潤性癌患者阻力指數值與術后組織畸胎癌衍生生長因子-1和SOX-2表達的關系

劉艷婷 (海南省農墾總醫院超聲科，海南 海口 570311)

老年人是乳腺浸潤性癌高發人群。腫瘤生物學行為的術前判定對治療及判斷預后有重要價值〔1〕。臨床上觀察血流最簡便而無創的手段是彩色多普勒超聲檢測阻力指數(RI)值，其對判斷乳腺癌的生物學行為可能有一定意義〔2〕。畸胎癌衍生生長因子相關肽(Cripto)-1是表皮生長因子相關肽(EGF)-CFC家族成員之一，研究發現Cripto-1可以促進腫瘤細胞增殖、遷移、侵襲及血管生成過程〔3，4〕。轉錄因子SOX-2是干細胞的關鍵因子，參與胚胎發育和細胞分子調控，其表達的增加將使細胞喪失分化功能，患者預后差〔5，6〕。本文關注彩色多普勒超聲檢測乳腺浸潤性癌患者RI值與術后組織中Cripto-1和SOX-2的關聯性。

1 材料與方法

1.1 一般資料 我院確診為乳腺浸潤性癌并進行根治手術的女性患者113例，術前均行彩色多普勒超聲檢測，年齡54～81(平均64.3)歲。依據世界衛生組織(WHO)中關于乳腺癌的診斷標準，并經病理醫師再次閱片證實。其中浸潤性導管癌103例，浸潤性小葉癌10例。

1.2 超聲檢測方法 選用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率7.5～10 MHz。患者在檢查時均取仰臥位，在乳腺各象限作縱橫切掃查，觀察有無異常回聲區，對腫瘤區在常規觀察基礎上重點觀察血流情況，計算RI值。

1.3 Cripto-1、SOX-2蛋白檢測 Cripto-1、SOX-2蛋白均由武漢博士德生物工程公司提供，原液按不同比例稀釋后行預實驗，選擇最理想的配比濃度進行正式實驗。正式實驗應用免疫組化SP法，應用DAB顯色。操作均由主管技師完成，嚴格質量控制。Cripto-1以明確的細胞質著色為陽性，SOX-2以明確的細胞核著色為陽性。Cripto-1和SOX-2均計數5個腫瘤細胞密集區的細胞，取陽性細胞百分率的平均值，以陽性細胞＞5%為陽性，以陽性細胞25%為陰性。

1.4 統計學處理方法 采用SAS6.12軟件進行t檢驗、方差分析和線性相關分析。

2 結果

2.1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達率的關系 術前RI值為0.43～0.93，平均為0.76±0.16。不同RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達率差異顯著(P均＜0.05)。見表1。

表1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達率的關系(s，%)

表1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達率的關系(s，%)

RI值 n Cripto-1 SOX-2＜0.7 20 40.15±11.30 35.48±8.70 0.7 ～0.9 60 65.47±18.48 50.58±11.36＞0.9 33 76.50±19.81 67.33±15.69 F/P值 9.58/0.007 5 9.09/0.010 2

2.2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達率的比較 有無淋巴結轉移、不同腫瘤最大徑、有無脈管浸潤及不同Ki67增殖指數亞組中，RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達率差別顯著(P均＜0.05)。見表2。

2.3 觀察組RI值與Cripto-1和SOX-2表達關聯性 RI值與Cripto-1表達(r=0.43，P=0.045 2)、RI值與 SOX-2表達(r=0.54，P=0.009 8)均正相關。

表2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達率比較(s)

表2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達率比較(s)

臨床病理特征 n RI值 χ2值 P值 Cripto-1(%)χ2值 P值 SOX-2(%)t值 P值腫瘤最大直徑 ≤5 cm 63 0.68±0.34 6.57 0.024 3 57.24±10.25 7.64 0.021 2 42.77±11.61 5.75 0.039 2＞5 cm 50 0.86±0.23 75.35±13.21 65.53±19.60淋巴結轉移 無 73 0.65±0.33 7.64 0.020 1 56.25±18.94 7.35 0.029 2 44.12±18.53 6.53 0.025 2有40 0.92±0.45 79.79±12.56 60.47±17.45脈管浸潤 無 88 0.63±0.25 7.98 0.018 2 57.51±19.24 8.75 0.018 2 43.18±17.53 7.63 0.020 9有25 0.99±0.21 80.75±13.43 69.42±15.44 Ki67 ≤25% 68 0.68±0.34 7.05 0.021 9 57.61±13.73 7.68 0.023 4 41.92±19.02 5.84 0.038 4＞25% 45 0.84±0.25 76.76±19.62 63.50±13.63

3 討論

乳腺浸潤性癌是一組具有旺盛生長能力的腫瘤，其具有累及周圍和其他部位的傾向，多數為腺癌，主要發生于乳腺實質上皮細胞，特別是乳腺末梢導管小葉單位〔7，8〕。研究認為其發病機制復雜，常表現為基因異常性，也證實基因和蛋白異常表達時促使腫瘤發生的危險性及直接的促進作用〔9〕。Cripto-1是從人類胚癌cDNA文庫中用葡萄糖-6-磷酸脫氫酶作為cDNA嵌合體過濾分離偶然發現的〔10，11〕，其為 EGF-CFC基因家族的成員之一，由于其著絲粒在染色體的3p21.3上，此部位常易出現丟失或呈現雜合子異常錯配的改變，因此其異常表達時可能引起細胞結構和功能的明顯改變〔12，13〕。陳琛等〔14〕觀察 Cripto-1在肺腺癌中的表達，認為Cripto-1與其配體Nodal在早期胚胎發育中發揮作用，同時可以引起腫瘤的進展，即刺激腫瘤細胞增殖、遷移和腫瘤的血管新生。SOX-2是SRY相關基因家族成員，是一種轉錄因子，參與胚胎發育和細胞分子調控〔15，16〕。SOX-2含有一個高度保守的HNG box DNA結合域，可以參與多種實體腫瘤的發生，對促進腫瘤的轉錄起一定作用〔17〕。

術前對惡性腫瘤的評估不僅對定性有幫助，還對治療及分期有一定價值，其依據有腫瘤間質血管生成和相關的形態學改變〔18〕。乳腺癌常表現為形態不規則，邊界不清楚，有成角毛刺狀或鋸齒狀，可見不均勻低回聲，病灶內有微粒樣鈣化點。可見較強的血流信號。腫瘤塊內可見不規則型、穿入型血流。本實驗提示RI值在判斷腫瘤有一定價值。RI值與Cripto-1和SOX-2在一定程度上具有協同作用。RI值、Cripto-1和SOX-2升高時提示腫瘤進展。由于超聲檢測的RI值為術前的結果，因此RI值在術前一定程度上反映了Cripto-1和SOX-2的變化，其作為無創性檢查，對綜合考慮患者病情及指導治療有重要意義。隨著RI值升高，Cripto-1和SOX-2表達也升高。RI值反映腫瘤間質的血流，尤其是腫瘤血管生成期，此時腫瘤迅速增大，血管生成加速，此時影像學檢測血流的指標較容易，對腫瘤判斷價值更理想。腫瘤進展時，由缺氧誘導因子調控的相關因子表達升高，其中包括 Cripto-1和SOX-2表達增強〔19〕，使適應缺氧環境的腫瘤細胞表型更容易存活并為了存活而更易于獲得侵襲轉移的潛能〔20，21〕，此時腫瘤生長迅速，腫瘤的血管生成豐富，預后差。應用超聲檢測RI值是無創性評價腫瘤指標的客觀標志，尤其適合機體狀況較差的患者。

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