血清HBV-DNA載量、乙肝免疫學標志物定量與老年慢性乙肝患者肝功能的關系

張 蕾 周玉妮 董景云 孟莉娜 于珊珊 (濱州醫(yī)學院傳染病學教研室，山東 濱州 5660)

據(jù)統(tǒng)計，在我國1.2億人乙肝病毒(HBV)隱性感染，并且每年可能30萬人以上死于同乙肝具有密切相關的疾病，發(fā)病人數(shù)呈居高不下的趨勢〔1〕。尤其對于老年患者，身體素質(zhì)較差，免疫力較弱，對其早發(fā)現(xiàn)、早確診是治療的關鍵。本研究分析乙肝患者HBV-DNA定量檢測和肝功能的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集濱州醫(yī)學院附屬醫(yī)院感染性疾病科2012年6月到2013年6月門診和住院的確診100例乙肝老年患者的空腹血清后第一時間分離檢驗。其中男75例，女25例，年齡60～75歲，平均年齡(67.7±16.6)歲，70歲以上40例，男28例，女12例。

1.2 納入及排除標準 納入標準:①沒有其他傳染病或者感染別的病毒。②不患有對實驗因素或者實驗結(jié)果具有重大影響的疾病。③最好在采血前近期沒有使用過一些治療性的藥物。④符合倫理道德，家屬或患者簽署了知情同意書等。排除標準:①凡對實驗研究不依從、不配合、對篩檢陽性者不能按照規(guī)定繼續(xù)診斷治療的及拒絕參加試驗者。②患有嚴重的心、肝、腎疾病的患者。

1.3 HBV-DNA定量測定〔2〕首先用熒光定量多聚酶鏈式反應(FQ-PCR)定時、動態(tài)定量測定血清中HBV-DNA的含量。儀器購自德國羅氏公司提供的PCR儀，HBV-DNA定量測定的試劑盒為深圳匹基生物工程技術股份有限公司。檢測最低限量為1 000 copy/ml。

1.4 乙肝免疫學標志物(HBV-M)檢測 利用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法對乙肝血清進行檢測，試劑由上海科華公司提供，操作嚴格按照試劑盒的說明書進行。

1.5 肝功能的檢測 檢測70歲以上患者肝功能，包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和前白蛋白(PA)，儀器(國產(chǎn)生化全自動分析儀)，試劑(上海豐匯醫(yī)學科技有限公司)。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0軟件，如果定量結(jié)果服從正態(tài)分布用t檢驗;當不服從時，予以數(shù)量轉(zhuǎn)換再予以t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 各組血清HBV-DNA定量檢測結(jié)果 HBV-DNA定量測定中大三陽(HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性)組〔n=41，(64 565 ±4 374)copy/ml〕顯 著 高 于 小 三 陽 組〔n=45，(20 233 ±3 412)copy/ml〕與 HBsAg+HBcAb陽性組〔n=14，(15 983 ±2 140)copy/ml〕(t=4.55，P ＜0.05;t=3.83，P ＜0.05)，小三陽與HBsAg+HBcAb 陽性組之間無統(tǒng)計學差異(t=1.03，P ＞0.05)。

2.2 各組PA、AST、ALT水平比較 3組間有顯著差異(P＜0.05)，見表 1。

表1 各組PA、AST、ALT指標的水平(s)

表1 各組PA、AST、ALT指標的水平(s)

與大三陽組比較:1)P＜0.05;與小三陽組比較:2)P＜0.05

大三陽組＜0.001 ＜0.001 0.001

2.3 HBV-DNA的定量分析同PA、AST、ALT指標間相關性分析 HBV-DNA的定量同AST及ALT呈正相關性(r=0.436，P=0.003;r=0.372，P=0.011)，同 PA 不具有相關性(r=0.045，P=0.455)。

2.4 各年齡組HBV-DNA定量對比 HBV-DNA定量60～65歲〔n=9，(110 230 ±43)copy/ml〕、65 ～70 歲〔n=40，(130 431±30)copy/ml〕、70～75歲以上〔n=51，(45 350±20)copy/ml〕無顯著差異(t=0.23，P ＞0.05;t=0.55，P ＞0.05;t=1.03，P ＞0.05)。

3 討論

乙型肝炎傳染的途徑主要有血液傳播、性傳播、垂直傳播。一部分乙肝會發(fā)展成為肝硬化和肝癌，成為無法治愈的疾病〔3，4〕。HBV感染后，往往呈隱性感染，也可出現(xiàn)急性肝炎以及慢性肝炎病例，嚴重者可發(fā)展為爆發(fā)性肝炎甚至細胞癌〔5〕。臨床診斷大多參考HBV-M以及HBV-DNA相關檢測〔6〕。其中HBV-DNA主要反映患者體內(nèi)的HBV感染以及復制，也為傳染性強弱判定的金標準〔7〕。其中HBeAg為患者體內(nèi)出現(xiàn)病毒復制的明確指標。患者血清的ALT同肝細胞的受損程度具有密切關系，直接反映肝功能的變化。早期乙肝篩檢的主要方法最常選擇ELLSA法對HBV-M進行檢驗，不僅價廉迅速，而且操作簡便，能夠用于大批量篩查，但是靈敏高特異度不是很高，會提高誤診率〔8〕。FQ-PCR表現(xiàn)出的特異性以及靈敏度均較高，能夠直接監(jiān)測患者血清中HBV-DNA病毒的復制，同時能夠區(qū)別患者是否為早期的乙肝感染，還是現(xiàn)癥感染及恢復期的感染，同時也可以對乙肝出現(xiàn)的突變株予以診斷〔5〕，其中病毒活躍期的復制也為啟動及激發(fā)患者肝臟組織呈炎癥病變的重要因素。患者體內(nèi)HBV-DNA也是反映其感染最早出現(xiàn)的指標，而體內(nèi)可最先出現(xiàn)的則為HbsAg(+)與HBeAg(+)以及HbcAb(+)三項指標，所以對HBV-DNA的檢測是診斷HBV感染的金標準〔9〕。本結(jié)果顯示HBV-DNA的定量分析同HBV-M關系密切，與慢性乙肝患者的肝功能(ALT、AST)有一定的相關性。

乙肝老年患者應定期檢查，隨時關注病情變化，一旦出現(xiàn)情況立即采取措施;注重藥物選擇，合理用藥;及時調(diào)理患者飲食習慣;戒煙、戒酒并注重休息，不能熬夜，同時保持良好心態(tài)〔10〕。

1 郭明日，吳 敏，張 立，等.乙型肝炎血清學標志物與HBV-DNA定量及肝功能指標相關性研究〔J〕.國際醫(yī)學檢驗雜志，2013;34(18):2465-6.

2 Lippi G，Blanckaert N，Bonini P.Haemolysis:an overview of the leading cause of unsuitable specimens in clinical laboratories〔J〕.Clin Chem Labor Med，2008;46(6):764-7.

3 張慶安.乙肝患者血清免疫學標志物檢測結(jié)果與HBV-DNA定性、定量關系的分析〔J〕.山東醫(yī)藥，2012;52(22):74-6.

4 李 俐，張家穎，劉劍凱.乙肝患者血清IL-2、sIL-2R水平與肝損程度、HBV DNA含量的變化〔J〕.中國老年學雜志，2008;28(19):2212-3.

5 秦望森.兩種檢測乙肝血清學標志物方法的臨床對比〔J〕.中國老年學雜志，2011;31(14):277-9.

6 李佳霖，祁朝玲.慢性乙肝患者血清標志物、基因型與病毒載量關系的研究〔J〕.海南醫(yī)學院學報，2013;19(6):794-5.

7 陳光輝，孫長義，趙 靜.HBV血清學標志物與HBV-DNA熒光定量相關性分析〔J〕.中華實用診斷與治療雜志，2013;27(2):1908-10.

8 施志農(nóng)，陳繼梅.1546例乙型肝炎患者HBV-M、HBV-DNA、肝功能檢測結(jié)果分析〔J〕.中華全科醫(yī)學，2011;9(6):966-8.

9 劉 紅，黃從想.中華醫(yī)學會肝病分會、中華醫(yī)學會感染病分會.慢性乙型肝炎防治指南〔J〕.中華肝臟病雜志，2011;19(1):13-24.

10 陳 皓.老年肝硬化患者預后及影響因素的研究進展〔J〕.中國老年學雜志，2012;32(19):167-71.