RP—HPLC法同時測定清肺抑火片中苦參2種成分的含量

康紹建等

摘要：目的建立RP-HPLC法同時測定清肺抑火片中氧化苦參堿和苦參堿的含量。方法采用Waters C18 色譜柱（46 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（用三乙胺調ph至68）（5：9：86）為流動相，流速10 mLmin-1，檢測波長為220 nm，柱溫30 ℃。結果氧化苦參堿和苦參堿進樣量分別在00339～13560μg（r2=09999）；0132～5280μg（r2=09999）范圍內呈現良好的線性關系。平均回收率（n=6）分別為9765%，9763%；RSD分別為041%，079%。結論該方法快速簡便，結果準確可靠，為清肺抑火片的全而質量控制提供科學的依據。

關鍵詞：清肺抑火片；高效液相色譜；氧化苦參堿、苦參堿

中圖分類號：R284文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）10-0067-02

清肺抑火片由梔子、黃芩、大黃、天花粉等9味藥組成，具有清肺止嗽，降火生津的功效。用于肺熱咳嗽，痰延壅盛，咽喉腫痛，口鼻生瘡，牙齦疼痛，牙齦出血，大便干燥，小便赤黃[1]。全國有22個批準文號，涉及21家生產企業；現行法定標準有7個，其中4個標準的檢驗項目只有性狀和檢查，3個標準增加了3-4個薄層色譜鑒別和黃芩苷含量測定；但其檢測方法和評價指標不一；不能很好的控制產品質量。本文采用RP-HPLC同時測定清肺抑火片中苦參的主要有效成分氧化苦參堿和苦參堿的含量[2～4]，為全面評價清肺抑火片的質量提供了簡便快速、準確可靠的方法。

1儀器與試藥

儀器：島津LC-20A高效液相色譜儀；分析天平（Denver TB-215D，十萬分之一）；分析天平（SartorIUS BS224S，萬分之一）。

試藥：清肺抑火片（批號120866、130754 和121294）樣品由云南騰藥制藥有限公司提供；氧化苦參堿對照品（批號110780-200405）、苦參堿對照品（批號110805-200507），均由中國藥品生物制品檢定所提供；實驗中制備陰性樣品所用藥材由云南省曲靖藥業有限公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，實驗用水為娃哈哈純凈水；其它試劑均為分析純。

2溶液制備

21混合對照品溶液精密稱取氧化苦參堿和苦參堿適量，加甲醇制成每1 mL各含氧化苦參堿005 mg，苦參堿01 mg的混合溶液，即得。

22供試品溶液取本品10片，包衣片除去包衣，精密稱定，研細，取20 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入2 mL濃氨試劑，使濕潤，再加入三氯甲烷100 mL，稱定重量，超聲提取30 min，放冷，過濾，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至10 mL容量瓶，精密量取5 mL，加在中性氧化鋁柱上（100-200目，4 g，內徑1 cm），依次以三氯甲烷，三氯甲烷-甲醇（7：3）各20 mL洗脫，合并洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉移至5 mL容量瓶中，用微孔濾膜（045 μm）濾過，取續濾液即得。

23陰性樣品溶液依照清肺抑火片的處方制備缺苦參的陰性樣品，按“22”項下方法制備溶液，即得。

83筆者對本次抽樣的202批次15家企業樣品按照上述實驗條件進行檢測，發現各生產企業間產品質量差異大，企業內各批次產品質量差異也較大；分析原因有1該品種執行的標多，而且要求參差不齊的情況，導致各生產企業間產品質量差異大；有些企業因該品種標準低，在生產時未能對各味藥材的質量進行全面控制，導致各批次產品質量差異較大。各企業應加強對原料質量嚴格把關，以確保產品質量。2該品種各生產企業的生產工藝流程雖然與原部頒標準WS3-0418-90大體一致，但各自對梔子、知母提取時間、加水量；前胡、苦參、黃柏、黃芩、天花粉提取的乙醇用量及清膏的相對密度等工藝參數差異比較大；各企業應加強生產監督管理，嚴格按照GMP生產。參考文獻：

[1]衛生部藥典委員會衛生部藥品標準中藥成方制劑（第二冊）[S].北京：中華人民共和國衛生部，1990：248。

[2]國家藥典委員會中華人民共和國藥典：一部[S].中國醫藥科技出版社，2010

[3]王定營；陳良銘；高效液相色譜法測定婦潔靈中苦參堿的含量[J]華夏醫學；2006，6：124-125

[4]田紅霞；宋莉；田洪斌；HPLC法測定苦膽片中苦參堿的含量[J]；中國藥事；2010，11：210-211（收稿日期：2014-04-25）endprint

摘要：目的建立RP-HPLC法同時測定清肺抑火片中氧化苦參堿和苦參堿的含量。方法采用Waters C18 色譜柱（46 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（用三乙胺調ph至68）（5：9：86）為流動相，流速10 mLmin-1，檢測波長為220 nm，柱溫30 ℃。結果氧化苦參堿和苦參堿進樣量分別在00339～13560μg（r2=09999）；0132～5280μg（r2=09999）范圍內呈現良好的線性關系。平均回收率（n=6）分別為9765%，9763%；RSD分別為041%，079%。結論該方法快速簡便，結果準確可靠，為清肺抑火片的全而質量控制提供科學的依據。

關鍵詞：清肺抑火片；高效液相色譜；氧化苦參堿、苦參堿

中圖分類號：R284文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）10-0067-02

清肺抑火片由梔子、黃芩、大黃、天花粉等9味藥組成，具有清肺止嗽，降火生津的功效。用于肺熱咳嗽，痰延壅盛，咽喉腫痛，口鼻生瘡，牙齦疼痛，牙齦出血，大便干燥，小便赤黃[1]。全國有22個批準文號，涉及21家生產企業；現行法定標準有7個，其中4個標準的檢驗項目只有性狀和檢查，3個標準增加了3-4個薄層色譜鑒別和黃芩苷含量測定；但其檢測方法和評價指標不一；不能很好的控制產品質量。本文采用RP-HPLC同時測定清肺抑火片中苦參的主要有效成分氧化苦參堿和苦參堿的含量[2～4]，為全面評價清肺抑火片的質量提供了簡便快速、準確可靠的方法。

1儀器與試藥

儀器：島津LC-20A高效液相色譜儀；分析天平（Denver TB-215D，十萬分之一）；分析天平（SartorIUS BS224S，萬分之一）。

試藥：清肺抑火片（批號120866、130754 和121294）樣品由云南騰藥制藥有限公司提供；氧化苦參堿對照品（批號110780-200405）、苦參堿對照品（批號110805-200507），均由中國藥品生物制品檢定所提供；實驗中制備陰性樣品所用藥材由云南省曲靖藥業有限公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，實驗用水為娃哈哈純凈水；其它試劑均為分析純。

2溶液制備

21混合對照品溶液精密稱取氧化苦參堿和苦參堿適量，加甲醇制成每1 mL各含氧化苦參堿005 mg，苦參堿01 mg的混合溶液，即得。

22供試品溶液取本品10片，包衣片除去包衣，精密稱定，研細，取20 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入2 mL濃氨試劑，使濕潤，再加入三氯甲烷100 mL，稱定重量，超聲提取30 min，放冷，過濾，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至10 mL容量瓶，精密量取5 mL，加在中性氧化鋁柱上（100-200目，4 g，內徑1 cm），依次以三氯甲烷，三氯甲烷-甲醇（7：3）各20 mL洗脫，合并洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉移至5 mL容量瓶中，用微孔濾膜（045 μm）濾過，取續濾液即得。

23陰性樣品溶液依照清肺抑火片的處方制備缺苦參的陰性樣品，按“22”項下方法制備溶液，即得。

83筆者對本次抽樣的202批次15家企業樣品按照上述實驗條件進行檢測，發現各生產企業間產品質量差異大，企業內各批次產品質量差異也較大；分析原因有1該品種執行的標多，而且要求參差不齊的情況，導致各生產企業間產品質量差異大；有些企業因該品種標準低，在生產時未能對各味藥材的質量進行全面控制，導致各批次產品質量差異較大。各企業應加強對原料質量嚴格把關，以確保產品質量。2該品種各生產企業的生產工藝流程雖然與原部頒標準WS3-0418-90大體一致，但各自對梔子、知母提取時間、加水量；前胡、苦參、黃柏、黃芩、天花粉提取的乙醇用量及清膏的相對密度等工藝參數差異比較大；各企業應加強生產監督管理，嚴格按照GMP生產。參考文獻：

[1]衛生部藥典委員會衛生部藥品標準中藥成方制劑（第二冊）[S].北京：中華人民共和國衛生部，1990：248。

[2]國家藥典委員會中華人民共和國藥典：一部[S].中國醫藥科技出版社，2010

[3]王定營；陳良銘；高效液相色譜法測定婦潔靈中苦參堿的含量[J]華夏醫學；2006，6：124-125

[4]田紅霞；宋莉；田洪斌；HPLC法測定苦膽片中苦參堿的含量[J]；中國藥事；2010，11：210-211（收稿日期：2014-04-25）endprint

摘要：目的建立RP-HPLC法同時測定清肺抑火片中氧化苦參堿和苦參堿的含量。方法采用Waters C18 色譜柱（46 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（用三乙胺調ph至68）（5：9：86）為流動相，流速10 mLmin-1，檢測波長為220 nm，柱溫30 ℃。結果氧化苦參堿和苦參堿進樣量分別在00339～13560μg（r2=09999）；0132～5280μg（r2=09999）范圍內呈現良好的線性關系。平均回收率（n=6）分別為9765%，9763%；RSD分別為041%，079%。結論該方法快速簡便，結果準確可靠，為清肺抑火片的全而質量控制提供科學的依據。

關鍵詞：清肺抑火片；高效液相色譜；氧化苦參堿、苦參堿

中圖分類號：R284文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）10-0067-02

清肺抑火片由梔子、黃芩、大黃、天花粉等9味藥組成，具有清肺止嗽，降火生津的功效。用于肺熱咳嗽，痰延壅盛，咽喉腫痛，口鼻生瘡，牙齦疼痛，牙齦出血，大便干燥，小便赤黃[1]。全國有22個批準文號，涉及21家生產企業；現行法定標準有7個，其中4個標準的檢驗項目只有性狀和檢查，3個標準增加了3-4個薄層色譜鑒別和黃芩苷含量測定；但其檢測方法和評價指標不一；不能很好的控制產品質量。本文采用RP-HPLC同時測定清肺抑火片中苦參的主要有效成分氧化苦參堿和苦參堿的含量[2～4]，為全面評價清肺抑火片的質量提供了簡便快速、準確可靠的方法。

1儀器與試藥

儀器：島津LC-20A高效液相色譜儀；分析天平（Denver TB-215D，十萬分之一）；分析天平（SartorIUS BS224S，萬分之一）。

試藥：清肺抑火片（批號120866、130754 和121294）樣品由云南騰藥制藥有限公司提供；氧化苦參堿對照品（批號110780-200405）、苦參堿對照品（批號110805-200507），均由中國藥品生物制品檢定所提供；實驗中制備陰性樣品所用藥材由云南省曲靖藥業有限公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，實驗用水為娃哈哈純凈水；其它試劑均為分析純。

2溶液制備

21混合對照品溶液精密稱取氧化苦參堿和苦參堿適量，加甲醇制成每1 mL各含氧化苦參堿005 mg，苦參堿01 mg的混合溶液，即得。

22供試品溶液取本品10片，包衣片除去包衣，精密稱定，研細，取20 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入2 mL濃氨試劑，使濕潤，再加入三氯甲烷100 mL，稱定重量，超聲提取30 min，放冷，過濾，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至10 mL容量瓶，精密量取5 mL，加在中性氧化鋁柱上（100-200目，4 g，內徑1 cm），依次以三氯甲烷，三氯甲烷-甲醇（7：3）各20 mL洗脫，合并洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉移至5 mL容量瓶中，用微孔濾膜（045 μm）濾過，取續濾液即得。

23陰性樣品溶液依照清肺抑火片的處方制備缺苦參的陰性樣品，按“22”項下方法制備溶液，即得。

83筆者對本次抽樣的202批次15家企業樣品按照上述實驗條件進行檢測，發現各生產企業間產品質量差異大，企業內各批次產品質量差異也較大；分析原因有1該品種執行的標多，而且要求參差不齊的情況，導致各生產企業間產品質量差異大；有些企業因該品種標準低，在生產時未能對各味藥材的質量進行全面控制，導致各批次產品質量差異較大。各企業應加強對原料質量嚴格把關，以確保產品質量。2該品種各生產企業的生產工藝流程雖然與原部頒標準WS3-0418-90大體一致，但各自對梔子、知母提取時間、加水量；前胡、苦參、黃柏、黃芩、天花粉提取的乙醇用量及清膏的相對密度等工藝參數差異比較大；各企業應加強生產監督管理，嚴格按照GMP生產。參考文獻：

[1]衛生部藥典委員會衛生部藥品標準中藥成方制劑（第二冊）[S].北京：中華人民共和國衛生部，1990：248。

[2]國家藥典委員會中華人民共和國藥典：一部[S].中國醫藥科技出版社，2010

[3]王定營；陳良銘；高效液相色譜法測定婦潔靈中苦參堿的含量[J]華夏醫學；2006，6：124-125

[4]田紅霞；宋莉；田洪斌；HPLC法測定苦膽片中苦參堿的含量[J]；中國藥事；2010，11：210-211（收稿日期：2014-04-25）endprint