坤安煎劑對去卵巢大鼠血清NO、ET-1含量的影響＊

傅金英，于勝男，徐萌萌，李瑞麗，杜 蕾

(河南中醫學院，鄭州 450003)

婦女絕經后心腦血管病的危險性較絕經前明顯增加［1］。動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)普遍存在內皮功能障礙，是多種心腦血管疾病的共同病理基礎。內皮功能障礙的主要原因是ET和NO平衡失調［2］。本實驗研究了坤安煎劑對去卵巢大鼠血清NO、ET-1含量的影響，以探討坤安煎劑對心血管的保護作用及其初步作用機理，為坤安煎劑在防治更年期心血管疾病的應用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 動物飼養環境與分組

選用SPF級雌性成年Wistar大鼠52只，體質量(200±10)g，由山東魯抗實驗動物中心提供(動物質量許可證號SCCXK(魯)20080002)。室溫20℃左右，濕度70%，通風、清潔，飼料、供水充足，環境安靜。實驗環境符合SPF級動物實驗室要求。

動物購進適應喂養1周后，按隨機數字表法分為4組?？瞻捉M不予任何處理;模型組摘除大鼠雙側卵巢，術后7 d給予生理鹽水灌胃，10 ml/kg/次，連續8周;中藥組摘除大鼠雙側卵巢，術后7 d給予中藥“坤安煎劑”灌胃，10 ml/kg/次，相當于成人等效劑量的6倍，連續8周;補佳樂組摘除大鼠雙側卵巢，術后7 d給予補佳樂生理鹽水混懸液(0.01 mg/ml)灌胃，10 ml/kg/次，相當于成人等效劑量的6倍，連續8周。

1.2 藥物與試劑

坤安煎劑組成:北沙參15 g，知母15 g，山茱萸15 g，黃柏12 g，枸杞20 g，黃芪30 g，地骨皮15 g，茯苓15 g，女貞子15 g，旱蓮草30 g，杜仲20 g，淫羊藿30 g，煅龍骨 30 g，煅牡蠣30 g，丹參30 g，酸棗仁 30 g。所用生藥飲片由河南省中醫藥研究院制劑室提供，按照本院制劑標準濃煎、過濾，所煎藥液濃縮至每毫升含生藥3.52 g，4℃冰箱保存備用;補佳樂片(戊酸雌二醇片)1 mg/片，法國Delpharm Lille SAS進口藥品(批號J20080036);鹽酸氯胺酮注射液2 ml:0.1g/支，由福建古田藥業有限公司生產(批號H35020148);注射用青霉素鈉80 U/支，由華北制藥股份有限公司生產(批號H13020657);生理鹽水500 ml/瓶，由河南太龍藥業股份有限公司生產(批號H41023506)。

1.3 標本采集與指標檢測

末次給藥24 h后稱取各大鼠體質量。以10%水合氯醛麻醉后，腹主動脈取血5ml，離心出血清，儲存于低溫冰箱待測。檢測各大鼠血清內皮素-1(ET-1)采用酶聯免疫吸附法檢測，試劑盒來自伊萊瑞特生物技術有限公司;一氧化氮(NO)采用硝酸還原酶法檢測，試劑盒來自南京建成生物工程研究所。檢測方法按試劑盒說明書進行操作。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件進行統計分析，組間比較采用單因素方差分析，所有數據以均數±標準差(±s)表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

表1 各組大鼠血清NO、ET-1含量比較(±s)

表1 各組大鼠血清NO、ET-1含量比較(±s)

注:與空白組比較:＊＊P ＜0.01，*P ＜0.05;與模型組比較:#P ＜0.01，與補佳樂組比較:△P＜0.01

組 別 例數 血清NO(μmol/L)血清ET-1(pg/mL)空 白 組 10 42.75±2.87△ 55.31±1.89△模 型 組 10 17.54 ±2.52＊＊△ 75.14 ±0.83＊＊△中 藥 組 10 28.62 ±2.82＊＊#△ 66.95 ±4.70＊＊#△補 佳 樂 組 10 37.53 ±2.69＊＊# 58.55 ±3.81*#

表1顯示，與空白組比較，模型組大鼠血清NO顯著下降，差異有統計學意義(P＜0.01);血清ET-1顯著升高(P＜0.01)，差異有統計學意義。與模型組比較，中藥組和補佳樂組大鼠血清NO明顯升高，差異有統計學意義(P＜0.01);血清ET-1下降，差異有統計學意義(P＜0.01)。

3 討論

更年期是婦女一生中的重要時期，是婦女從生育期向老年期過渡的必經時期［3］。隨著卵巢功能逐漸衰退，雌激素水平的下降，近期易導致潮熱、盜汗、心悸、抑郁、失眠等;遠期易致骨質疏松、泌尿生殖道改變及心血管疾病發病率增加［4］?，F代研究關于更年期綜合征遠期并發癥的研究較少，而心血管疾病是危害絕經后婦女身體健康的主要因素。故導師傅金英教授結合其多年的臨床經驗自擬經驗方坤安煎劑防治更年期綜合征，以補腎填精為主，藥用女貞子、旱蓮草、枸杞補益肝腎;淫羊藿、杜仲補腎助陽，以助陽中求陰;以北沙參、知母、地骨皮、黃柏養陰退熱;山萸肉、煅龍骨、煅牡蠣3味藥收斂固澀、鎮驚安神;黃芪、茯苓健脾益氣，補后天以滋養先天;丹參活血祛瘀，酸棗仁養心安神?？v觀全方，諸藥合用、標本兼治，共奏滋陰補腎、填精益髓之效。

NO是由血管內皮細胞合成的一種酶催化的生物活性物質，其前體是L-精氨酸，具有強力擴張血管、抑制血小板黏附和聚集［5］、白細胞的趨化激活、抑制血管平滑肌細胞的增殖移行、保護血管內皮細胞、防止心肌細胞缺血的作用，是心血管系統的重要調節因子［6］。ET-1為主要的縮血管因子，是迄今所知最強的縮血管物質，還可誘導血小板聚集，導致血栓形成，增加單核細胞遷移、促進平滑肌細胞增殖等作用［7］。ET通過激活鈣通道增加鈣離子內流，促進血管平滑肌收縮。在內皮損傷時其合成或釋放增加，并與血管平滑肌上的受體結合，增加血管緊張度而使血管收縮。ET和NO之間存在著相互促進、相互抑制的復雜關系，共同調節心肌、血管的舒縮狀態和平滑肌細胞的增殖情況，直接或間接地影響心功能［6］。臨床實驗表明，高血壓、動脈粥樣硬化、心絞痛、慢性心力衰竭、心肌病等心血管疾病常伴有NO、ET的異常，而NO、ET的異常又反過來加重心血管疾病，所以兩者之間有著密切關系的NO和ET是維持血管基礎張力的主要血管活性物質［8］。

本實驗研究表明，坤安煎劑在影響血管內皮功能方面可明顯升高模型大鼠血清NO含量，降低大鼠血清ET-1含量，說明坤安煎劑通過改善受損內皮功能，調節血管活性物質的分泌、釋放及不同活性物質間的平衡，以調節血管緊張度增加局部血流量，恢復血管的自穩態，有助于為臨床預防絕經后心血管疾病提供理論依據。

［1］田文艷，武紅利，等.絕經后婦女雌激素替代治療對缺血性腦血管病患者的預防及治療作用［J］.醫學研究與教育，2009，26(1):26-28.

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［5］張念志，韓明向，周宜軒，等.人參注射液對冠心病心絞痛心氣虛證作用的臨床研究［J］.中國中醫急癥結合，2005，9(4):141-142.

［6］楊煥斌，林堅，羅陸.補腎法對犬心肌缺血模型一氧化氮、內皮素的影響［J］.中國中醫藥信息雜志，2006，13(5):30-31.

［7］王秀紅，路方紅.內皮素、一氧化氮與心血管疾病［J］.中國慢性病預防與控制，2003，13(3):139-141.

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