離體子宮平滑肌測定方法的改進

崇立明，王忠輝，楊陽，王蓉，周莉，孫祖越

上海市計劃生育科學研究所 藥理毒理學研究室，中國生育調節藥物毒理學檢測中心，上海 200032

離體子宮平滑肌是生物活性組織，通過人工模擬的生理環境測定藥物對子宮平滑肌舒張和收縮變化的影響，同時采用計算機生物信號采集處理系統，使子宮平滑肌收縮的復雜信號量化，繪制出給藥前后子宮平滑肌收縮的圖形并測得數據，可為實驗提供更加客觀和準確定量的分析方法。離體器官實驗需要給離體器官一個適宜的環境，包括溫度（35℃）、營養液（De-Jalon's 液）及混合氧（95% O2和5%CO2）[1]。正常實驗中，在供氧時直接用鋼瓶給營養液中通入混合氧[2-9]。考慮到用鋼瓶通氣的危險性，而且通混合氧費時、費事，耗費較多，我們以新西蘭兔離體子宮平滑肌為材料，在營養液中分別通入混合氧、增氧泵通氣及不通氣，觀察了離體子宮平滑肌的收縮反應，尋求一種簡便、易行、經濟的替代方法。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雌性新西蘭兔（普通級，體重2.5～3.5 kg）購自上海松江區松聯實驗動物場［生產許可證SCXK（滬）2012-0011，使用許可證SYXK（滬）2013-0027］，飼養于上海市計劃生育科學研究所（中國生育調節藥物毒理檢測中心）普通級小動物房，室溫18～26℃，相對濕度40%～70%，光照12～14 h，黑暗10～12 h。實驗開始前于不銹鋼籠內（單只/籠）適應性飼養7 d，自由進食、飲水。

De-Jalon's 液：NaCl 9 g，KCl 0.42 g，NaHCO30.5 g，CaCl20.06 g，葡萄糖0.5 g，蒸餾水1000 mL。

RM-6240BD 多道生理信號采集處理系統、JZJ01H 型肌肉張力換能器、離體腸管及熱板恒溫器（均購自成都儀器廠）；增氧泵。

1.2 實驗方法

每只兔取3 mm×10 mm 大小子宮平滑肌3 段，隨機分為混合氧組、增氧泵通氣組和不通氣組，每組8 段子宮，一端穿線固定于離體器官恒溫水浴裝置的浴槽底部，另一端穿線與記錄裝置相連，分別通入混合氧、增氧泵通氣及不通任何氣體；將已連接的子宮肌浸沒于浴槽，浴槽中盛有6 mL 新鮮配置的De-Jalon's 液，給予子宮肌1 g 的負荷并保持，靜置10 min，待波形穩定后，記錄約5 min正常波形。

1.3 統計學處理

以RM-6240BD 生物機能實驗系統描記子宮平滑肌的收縮活動。測定子宮平滑肌的收縮幅度、頻率及活動力（幅度×頻率），實驗數據以x±s 表示，用SPSS11.5統計分析軟件處理數據，單因素方差分析。

2 結果

不通氣組子宮平滑肌的頻率和活動力與混合氧組比較均有統計學差異，而混合氧組與增氧泵組比較無統計學差異。表明給新西蘭兔離體子宮平滑肌的營養液內通入混合氧或使用增氧泵通氣效果相同，不通氣組的效果最差。見表1、圖1。

表1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌收縮的影響（）

表1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌收縮的影響（）

與混合氧組相比，*P＜0.01，**P＜0.05

圖1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌波形的影響

3 討論

增氧泵是通過電動馬達抽吸空氣，通過管道通路吹到水中釋放，增加了空氣和水的接觸面和水的循環流動，可以保證水中始終保持充足的溶氧量和溶氧的均一度。

本實驗中，離體子宮維持生理功能的條件是營養液，營養液中的混合氧含量及營養液與子宮是否充分接觸都是維持組織正常生理功能的重要條件。根據實驗結果，增氧泵通氣組與混合氧組對比無統計學差異，說明使用增氧泵通氣可促進營養液流動，增加營養液與子宮充分接觸的機會，在氧氣供應方面也達到了與通入混合氧相同的效果。綜上所述，使用增氧泵通氣可以達到供氧及促進液體流動的雙重目的，完全可替代傳統的用鋼瓶通入混合氧的方法，而且增氧泵體積較小，操作簡單，方便經濟，是離體子宮實驗的理想選擇。

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