重組結核病疫苗rBCG-IL-12p70-TB10.4的免疫效應

張豐經，何紅云，鄧儀昊，楊開明

(云南省大理學院 基礎醫學院 人體解剖學教研室，云南 大理 671000)

研究論文

重組結核病疫苗rBCG-IL-12p70-TB10.4的免疫效應

張豐經，何紅云，鄧儀昊*，楊開明

(云南省大理學院 基礎醫學院 人體解剖學教研室，云南 大理 671000)

目的將成功構建的重組卡介苗rBCG-IL-12p70-TB10.4免疫BALB/c小鼠，研究其免疫效應，為結核病新疫苗的研發提供依據。方法將融合基因IL-12p70-TB10.4克隆入pMV361構建重組質粒，以電轉化方式將重組質粒導入卡介苗基因組，構建重組結核病疫苗rBCG-12p70-TB10.4 (rBCG-IT)。將此重組卡介苗免疫BALB/c小鼠，分別于免疫后3、6、9和12周，用間接ELISA檢測特異性抗體滴度水平，XTT檢測脾細胞增值反應, 流式細胞儀檢測脾CD4+T、CD8+T細胞亞型的比例，ELISA試劑盒檢測細胞因子的誘生。結果在免疫后3～12周，rBCG-IT組脾細胞增殖反應均明顯強于其他各組(Plt;0.01)，該組IFN-γ誘生量及CD4+T細胞比例均顯著高于rBCG-I組、rBCG-T組及BCG組(Plt;0.01)。IgG2a/IgG1比值在免疫后各時間點的變化趨勢提示rBCG-IT可誘導Th1型細胞免疫應答。結論重組疫苗rBCG-IT可誘導產生較BCG更強、持續時間更長的特異性細胞免疫應答，可對其免疫保護作用進行深入研究。

重組卡介苗；IL-12p70；TB10.4；免疫效應

由結核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)感染引起的結核病仍是嚴重威脅人類健康的重大傳染病。目前，預防結核病的唯一有效疫苗是卡介苗(bacilli calmette-guérin, BCG)，而BCG的免疫保護作用在某些人群或地區不穩定[1]。在各國學者的努力下，有多種新型MTB疫苗相繼問世，有數株疫苗甚至已進入臨床前期研究[2-3]。但到目前為止，還沒有一種新型結核病疫苗可取代BCG在人類推廣使用。

TB10.4只存在于致病性結核分枝桿菌H37Rv[4]。……