共培養人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)和兔關節軟骨細胞誘導hUC-MSCs分化成軟骨細胞

羅二梅， 張家文，胡笑軻，唐明喬，宇 麗*

(暨南大學 1.醫學院 生物化學系； 2.理工學院 土木工程系， 廣東 廣州 510632)

研究論文

共培養人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)和兔關節軟骨細胞誘導hUC-MSCs分化成軟骨細胞

羅二梅1， 張家文1，胡笑軻1，唐明喬2*，宇 麗1*

(暨南大學 1.醫學院 生物化學系； 2.理工學院 土木工程系， 廣東 廣州 510632)

目的探討兔膝關節軟骨細胞和人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)的共培養對hUC-MSCs成軟骨誘導分化的影響及共培養的最佳比例。方法分離培養hUC-MSCs和兔膝關節軟骨細胞并鑒定其特異性。在Transwell體系中，按1∶4，1∶3，1∶2，1∶1，2∶1，3∶1及4∶1 的比例(hUC-MSCs：兔膝關節軟骨細胞)共培養。倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態與增殖；甲苯胺藍染色及免疫熒光染色分別檢測葡萄糖胺聚糖(GAG)和Ⅱ型膠原(COL2A1)(蛋白水平定性)；并對各組細胞爬片進行GAG、COL2A1定量檢測；同時用實時定量熒光PCR(pPCR)檢測GAG、COL2A1 mRNA表達，觀察共培養前后細胞的基質分泌情況。結果共培養 21 d 后，陽性對照組和實驗組細胞甲苯胺藍染色及免疫熒光反應均呈陽性；GAG、COL2A1含量及mRNA表達量1∶4實驗組均要高于其他實驗組和陽性對照組。結論hUC-MSCs和兔關節軟骨細胞的共培養可明顯促進hUC-MSCs向軟骨樣細胞誘導分化，且最佳共培養比例為1∶4。

Transwell小室；人臍帶間充質干細胞；兔膝關節軟骨細胞；共培養；成軟骨誘導

近年來，細胞生物學和生物材料技術的高速發展使組織工程在軟骨缺損修復中的治療應用成為可能[1]。目前，軟骨細胞和間充質干細胞都被認為可用于構造新生軟骨組織。但軟骨細胞表型不易維持，容易去分化，因此，其臨床應用性受到限制。……