N-乙酰半胱氨酸減輕香煙煙霧提取物所致的A549細(xì)胞損傷

張強(qiáng)弩，焦宗憲，常嘉琛

(蘭州大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 病理學(xué)研究所， 甘肅 蘭州 730000)

研究論文

N-乙酰半胱氨酸減輕香煙煙霧提取物所致的A549細(xì)胞損傷

張強(qiáng)弩，焦宗憲*，常嘉琛

(蘭州大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 病理學(xué)研究所， 甘肅 蘭州 730000)

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)對(duì)香煙煙霧提取物(CSE)暴露后的A549細(xì)胞的影響。方法MTT法測(cè)定不同處理后A549細(xì)胞的存活率；用PI單染和AnnexinV-FITC/PI雙染檢測(cè)細(xì)胞的周期變化和凋亡變化；用熒光探針H2DCFDA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)變化；用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot 技術(shù)檢測(cè)胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3)的表達(dá)變化。結(jié)果CSE致A549細(xì)胞存活的A值為0.55±0.04，顯著低于對(duì)照組的0.78±0.03(Plt;0.05)，NAC處理使A值顯著上升至0.67±0.04(Plt;0.05)，并消除了G1期阻滯，降低細(xì)胞凋亡率等。IGFBP-3的表達(dá)在CSE刺激后，有所升高，在接受NAC保護(hù)后，其表達(dá)水平有所降低(Plt;0.05)。結(jié)論NAC可以抑制香煙煙霧提取物造成的A549細(xì)胞損傷，IGFBP-3可能在香煙煙霧提取導(dǎo)致細(xì)胞損傷的機(jī)制中發(fā)揮作用。

IGFBP-3；香煙煙霧提取物；肺泡上皮細(xì)胞；N-乙酰半胱氨酸

香煙煙霧可以引發(fā)氧化應(yīng)激，對(duì)肺泡上皮細(xì)胞造成損傷[1],此過(guò)程涉及細(xì)胞增殖障礙但其具體機(jī)制尚未清楚[2]。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(insulin-like growth factor binding protein，IGFBP)與細(xì)胞的增殖密切相關(guān)[3]。高氧暴露后，IGFBP的表達(dá)發(fā)生變化[4]。氧化應(yīng)激造成細(xì)胞損傷的機(jī)制也可能與IGFBP有關(guān)。IGFBP-3是IGFBP家族的重要的成員，故本研究用香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract，CSE)對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行刺激，然后分析IGFBP-3表達(dá)水平的變化，以期找到兩者的聯(lián)系。N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine，NAC)是一種效果明確的抗氧化劑[5]。但具體來(lái)講，NAC是否可以從細(xì)胞周期阻滯，降細(xì)胞凋亡等方面，改善CSE導(dǎo)致的肺泡上皮細(xì)胞細(xì)胞損傷，還有待驗(yàn)證。……