脂聯素減輕高糖誘導的人血管內皮細胞系損傷

李 熠，匡雙玉，尹 凱，匡穩定，桂慶軍*

(南華大學 醫學院 1.診斷學教研室；2.附屬第二醫院， 湖南 衡陽 421001)

研究論文

脂聯素減輕高糖誘導的人血管內皮細胞系損傷

李 熠1，匡雙玉2，尹 凱1，匡穩定2，桂慶軍1*

(南華大學 醫學院 1.診斷學教研室；2.附屬第二醫院， 湖南 衡陽 421001)

目的觀察脂聯素(APN)對高糖誘導血管內皮細胞系損傷的保護作用及NF-κB與LOX- 1蛋白表達在其中的作用。方法30 mmol/LD-葡萄糖作用于HUVEC- 12(人臍靜脈內皮細胞系)，不同濃度的脂聯素(10、20和40 μg/mL)作用48 h及20 μg/mL 脂聯素作用不同時間(12、24、48和72 h)后，倒置相差顯微鏡觀察內皮細胞形態，Western blot檢測核轉錄因子NF-κB和LOX- 1蛋白表達, 間接免疫熒光法檢測NF-κB核轉位情況。結果脂聯素作用于D-葡萄糖誘導的HUVEC- 12，內皮細胞形態改善，折光性增強，胞內顆粒物減少，細胞排列相對規整；同時，LOX- 1蛋白表達下調(Plt;0.05)，NF-κB活性降低(Plt;0.05)，并呈現時間和濃度依賴性(n=3,Plt;0.05)。結論脂聯素可能通過NF-κB信號通路引起LOX- 1蛋白表達下調，從而發揮其對高糖誘導血管內皮細胞損傷的保護作用。

D-葡萄糖；人臍靜脈內皮細胞；脂聯素；LOX- 1；NF-κB

脂聯素(Adiponectin，APN)是一種由脂肪細胞分泌的血漿蛋白，通過抑制炎性反應、保護血管內皮、抗動脈粥樣硬化及抑制血管新生等[1- 5]發揮其心血管保護作用，但具體機制尚不清楚。本實驗在高糖誘導血管內皮細胞系損傷的模型上，觀察APN對高糖誘導血管內皮細胞的保護作用及NF-κB、LOX- 1蛋白表達在其中的作用。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

脂聯素(Ramp;D公司)；RMPI- 1640培養基和胰蛋白酶(Hyelone公司)；新生胎牛血清(杭州四季清公司)；BCA 蛋白定量試劑盒和Western印跡熒光檢測試劑盒(Hyclone. Pierce公司)；……