三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床評價

朱巧英，李 寧，羅紅權(quán)，倪雪梅

（四川省婦幼保健院，四川 成都610045）

近年來隨著梅毒的發(fā)病率上升，妊娠梅毒和胎傳梅毒的發(fā)病率不斷增加。胎傳梅毒可造成流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、死產(chǎn)、畸形或分娩先天梅毒兒[1]，在流產(chǎn)、死產(chǎn)、死胎中梅毒高達41.67[2]。有效預(yù)防和控制胎傳梅毒的關(guān)鍵是孕婦的產(chǎn)前保健，對妊娠梅毒早期診斷進而進行正規(guī)治療[3－5]。但研究發(fā)現(xiàn)妊娠可改變梅毒的自然病程和臨床表現(xiàn)，使多數(shù)妊娠梅毒表現(xiàn)為潛伏狀態(tài)[6－8]，不易早期發(fā)現(xiàn)，對預(yù)防胎傳梅毒增加了難度。目前，臨床上對潛伏梅毒的診斷主要靠實驗室檢查，包括非梅毒螺旋體抗體檢測如甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）等，梅毒螺旋體抗體檢測如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、金免疫層析試驗（GICA）和梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）等，梅毒螺旋體核酸檢測如聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）等[9，10]。TPPA 的靈敏度和特異性都高，常作為梅毒螺旋體抗體的確認試驗，但費用較高，梅毒螺體抗體陽性可能為既往感染或潛伏梅毒；PCR試驗敏感性高，核酸陽性是梅毒螺旋體存在的直接證據(jù)，但費用高，技術(shù)及條件要求高，不適基層開展，并因污染或抑制劑和（或）核酸損失而出現(xiàn)假陽性或假陰性[9，10]。本實驗對臨床上廣泛應(yīng)用的常規(guī)梅毒血清學試驗－TRUST、ELISA和GICA的臨床價值進行了評價。現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 對象 2010年8月－2013年1月2年間來本院做圍產(chǎn)保健的孕婦1236例，年齡20－38歲，均無梅毒癥狀和體征。真空采血管抽取晨空腹肘靜脈采5ml，3000轉(zhuǎn)／分離心10分鐘，分離出血清備用。

1.2 儀器試劑 TP－ELISA試劑盒由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司生產(chǎn)，GICA試劑由艾康（杭州）生物有限公司生產(chǎn)，TRUST試劑盒由上海榮盛有限公司生產(chǎn)，TPPA試劑盒由日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)，室內(nèi)質(zhì)控血清由科華公司提供，梅毒螺旋體核酸擴增（PCR）熒光檢測試劑盒由達安基因（深圳）公司生產(chǎn)。

1.3 儀器 酶標儀和洗板機為北京普朗公司生產(chǎn)。核酸擴增熒光檢測儀為羅氏lightcycler2.0。

1.4 實驗方法 ELISA和GICA為雙抗原夾心法，TPPA和TRUST為間接凝集試驗，PCR為核酸擴增實時熒光檢測法，各實驗均嚴格試劑說明書進行，并隨標本一起做室內(nèi)質(zhì)控試驗。

1.5 檢測程序 所有孕婦血清標本都采用盲法同時做TRUST、ELISA、GICA和TPPA試驗。TPPA試驗陽性血清再做PCR試驗。

1.6 診斷標準 參照文獻[9]，本實驗以TPPA試驗和PCR試驗都陽性判斷為潛伏妊娠梅毒。

2 結(jié)果

2.1 潛伏妊娠梅毒檢出率 1236例圍產(chǎn)保健孕婦中共檢出潛伏梅毒12例，檢出率為0.97%。

2.2 符合率評價 TRUST試驗與ELISA試驗和GICA試驗結(jié)果的總符合率分別為89.8%和86.9%。GICA試驗與ELISA試驗結(jié)果的總符合率為92.3%。

2.3 臨床價值評價 以TPPA試驗和PCR試驗都陽性為潛伏妊娠梅毒診斷標準，TRUST試驗、ELISA試驗和GICA試驗的臨床效能評價結(jié)果見表1。

表1 TRUST試驗、ELISA試驗和GICA試驗診斷潛伏妊娠梅毒的臨床效能評價結(jié)果

3 討論

近年來我國妊娠梅毒檢出率逐年上升，妊娠期梅毒篩查及干預(yù)已成為控制胎傳梅毒的重要措施[11]。本實驗結(jié)果顯示，潛伏妊娠梅毒檢出率為0.97%，低于天津市的2.25%[11]、哈爾濱市的1.32%[1]和長沙市的1.24%[12]，這主要是地域和被檢人群差異所致。在妊娠期，孕婦體內(nèi)滋養(yǎng)層細胞產(chǎn)生的各種激素、Th1／Th2平衡的改變、炎癥因子水平的變化以及促進胎盤和胎兒生長的因子等因素影響梅毒的自然病程和臨床表現(xiàn)，使母體表現(xiàn)為無癥狀感染[13]。我國妊娠梅毒發(fā)生率已達1%－2%，且多數(shù)為潛伏梅毒，臨床應(yīng)加強產(chǎn)前梅毒篩查，盡早發(fā)現(xiàn)和治療孕婦梅毒，最大限度地阻斷梅毒的母嬰垂直傳播。

梅毒血清學篩查是發(fā)現(xiàn)潛伏妊娠梅毒的有效方式[11]。TRUST、ELISA和 GICA具有簡單、快速、經(jīng)濟等優(yōu)點，為臨床常規(guī)梅毒血清學篩查試驗。本實驗結(jié)果顯示，ELISA試驗對潛伏妊娠梅毒的診斷靈敏度最高（91.7%），TRUST 試驗最低（75.0%），這應(yīng)與實驗本身的敏感性、檢測針對不同抗原的抗體以及被測抗體的產(chǎn)生規(guī)律有關(guān)；TRUST、ELISA和GICA試驗對潛伏妊娠梅毒的診斷特異度都大于95%，TRUST 的假陽性率（2.5%）高于 ELISA（1.8%）和 GICA（1.1%）。TRUST試驗假陽性主要是其檢測非梅毒螺體抗體－抗心磷脂抗體，由螺旋體或宿主組織細胞受損而釋放的脂類物質(zhì)誘導(dǎo)機體產(chǎn)生，在自身免疫病等多種其它疾病時也可檢出[9]。ELISA和GICA試驗假陽性是由于既往感染產(chǎn)生的抗體持續(xù)存在，或?qū)θ瞬恢虏〉拿苈菪w感染誘導(dǎo)機體產(chǎn)生與梅毒螺體交叉反應(yīng)的抗體，在低危人群中假陽性率約 1%[9，10，14]。TRUST、ELISA和GICA試驗的陰性預(yù)測值都高（＞99%），陽性似然比最大、陰性似然比最小的是ELISA試驗。綜上，臨床篩查潛伏妊娠梅毒最好選擇雙抗原夾心ELISA試驗，同時聯(lián)合TRUST、金免疫層析試驗（GICA）檢測梅毒可以提高陽性檢測率，為臨床預(yù)防和阻斷梅毒母嬰垂直傳播提供更可靠的理論依據(jù)。

[1]苗 巖，歐春怡，王學斌，等，先天性梅毒實驗室檢測方法學評價[J].中華全科醫(yī)學，2012，10（7）：1137.

[2]邱莉霞，劉 兵，許宗嚴.妊娠梅毒患者流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)15例分析[J].嶺南皮膚性病科雜志，2006，13（5）：370.

[3]Singh AE，Sutherland K，Lee B，et al.Resurgence of early congenital syphilis in Alberta[J].CMAJ，2007，177（1）：33.

[4]Wolff T，Shelton E，Sessions C，et al.Screening for syphilis infection in pregnant women：evidence for the U.S.Preventive Services Task Force reaffirmation recommendation statement[J].Ann Intern Med，2009，150（10）：710.

[5]Myer L，Abdool Karim SS，Lombard C，et al.Treatment of maternal syphilis in rural South Africa：effect of multiple doses of benzathine penicillin on pregnancy loss[J].Trop Med Int Health，2004，9（11）：1216.

[6]Berman SM.Maternal syphilis：pathophysiologyy and treatment[J].Bull World Health Organ，2004，82（6）：433.

[7]Fonck K Claeys P，Bashir F，et al.Syphilis contro1during pregnancy：effectiveness and sustainability of a decentralized program[J].Am J Public Health，2001，91（5）：705.

[8]劉 婷，溫貴華，何春承，等.1778例母嬰梅毒血清學分析[J].中國婦幼保健，2012，27（16）：2465.

[9]中華醫(yī)學會.臨床診療指南免疫學分冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

[10]武建國.梅毒的實驗室診斷與臨床相關(guān)問題[J].臨床檢驗雜志，2006，24（4）：316.

[11]吳紅章，郄春花，周 源，等.妊娠梅毒患者母嬰傳播的檢測及干預(yù)治療[J].哈爾濱醫(yī)藥，2012，32（2）：98.

[12]伏 鋼，彭艷華，李毅剛，等.長沙市孕產(chǎn)婦乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病病毒和梅毒的感染情況[J].職業(yè)與健康，2012，28（12）：1480.

[13]劉江波，楊 森.妊娠梅毒與胎傳梅毒[J].國際皮膚性病學雜志，2008，34（1）：25.

[14]強 娣，季必華.胎傳梅毒的研究進展[J].國際皮膚性病學雜志，2010，36（3）：162.