合并心肌損傷的窒息新生兒血漿心肌營(yíng)養(yǎng)素-1及糖原磷酸化酶同工酶腦型的測(cè)定及臨床意義

黎日保，李彥甫

（吳川市婦幼保健院新生兒科，廣東 吳川 524500）

新生兒窒息后的多臟器損害仍是影響并威脅新生兒生命和預(yù)后的常見并發(fā)癥，在眾多的新生兒窒息并發(fā)癥中，其中并發(fā)心肌損傷、心衰的發(fā)生率較高，有報(bào)道［1］心肌損傷發(fā)生率可達(dá)73.3%。因此，新生兒窒息心肌損傷已逐漸成為目前學(xué)者研究的一個(gè)重要課題。目前，肌酸激酶同工酶（CK-MB）等臨床上評(píng)價(jià)心肌損傷的重要生化指標(biāo)有靈敏度低、特異性差等不足，因此尋找早期、快速、準(zhǔn)確反映新生兒窒息后心肌損傷的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)以及有效的防治措施具有重要臨床意義和實(shí)用價(jià)值。心肌營(yíng)養(yǎng)素-1（cardio trophin-1，CT-1）［2］、糖原磷酸化酶同工酶腦型（glycogen phosphorylase isoenzyme BB，GPBB）［3］是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子,其在心肌損傷的程度、鑒別診斷、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后估計(jì)等方面的臨床價(jià)值得到越來(lái)越多的關(guān)注。本研究測(cè)定72例合并心肌損傷的窒息新生兒血漿CT-1以及GPBB的變化，并探討其臨床意義。

1 對(duì)象及方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2010年2月至2011年12月吳川市婦幼保健院新生兒科收治的72例合并心肌損傷窒息新生兒（試驗(yàn)組），其中男38例，女34例；平均出生體質(zhì)量（3.49±0.53）kg；平均胎齡（38.5±1.2）周；剖宮產(chǎn)40例，順產(chǎn)32例；輕度窒息39例（輕度窒息組），重度窒息33例（重度窒息組）。

所有窒息新生兒均符合以下的診斷標(biāo)準(zhǔn):生后1 min Apgar評(píng)分 4～7分為輕度窒息，0～3分為重度窒息，若生后1 min評(píng)8～10分而數(shù)分鐘后又降到7分及以下者亦屬窒息。

新生兒窒息合并心肌損傷診斷符合以下標(biāo)準(zhǔn):明確的窒息病史；CK-MB或肌鈣蛋白大于同日齡正常均值均數(shù)±2標(biāo)準(zhǔn)差；同時(shí)伴有心電圖改變、胸部X線顯示肺充血、心臟聽診心音低鈍3項(xiàng)中其中1項(xiàng)改變［4］。

選擇本院新生兒科同期收治的無(wú)窒息史的新生兒32例為對(duì)照組，其中男17例，女15例；平均出生體質(zhì)量（3.51±0.47）kg；平均胎齡（37.9±1.0）周；剖宮產(chǎn)18例，順產(chǎn)14例。均無(wú)先天性心、腦、肝、腎等重要臟器疾病；無(wú)宮內(nèi)發(fā)育遲緩、宮內(nèi)窘迫等產(chǎn)科情況，無(wú)合并感染、應(yīng)用炎癥抑制藥物及免疫抑制劑者。

2組新生兒的胎齡、出生體質(zhì)量、性別、分娩方式等比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。

1.2 標(biāo)本采集及檢測(cè)方法

所有患兒于發(fā)病后12 h內(nèi)采集外周靜脈血4 mL，其中2 mL加入抗凝試管中檢測(cè)CT-1，2 mL檢測(cè)GPBB；即送檢驗(yàn)室，經(jīng)離心和處理后分離血清后保存于－80℃冰箱保存待測(cè)；采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定 GPBB、CT-1，所有的操作步驟均嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，檢驗(yàn)前各組數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，多重比較采用單因素方差分析，各種指標(biāo)間的關(guān)系采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 試驗(yàn)組和對(duì)照組血漿GPBB、CT-1水平的比較

試驗(yàn)組GPBB、CT-1水平均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），見表 1。

表1 試驗(yàn)組和對(duì)照組 GPBB、CT-1 的比較 ,ρ/(μg·L－1)

表1 試驗(yàn)組和對(duì)照組 GPBB、CT-1 的比較 ,ρ/(μg·L－1)

*P＜0.05與對(duì)照組比較。

組別 n GPBB CT-1試驗(yàn)組 72 13.52±2.79* 253.07±33.84*對(duì)照組 32 9.06±0.29 29.77±8.72

2.2 不同窒息程度的合并心肌損傷窒息新生兒血漿GPBB、CT-1水平的變化

合并心肌損傷的重度窒息組新生兒血漿GPBB、CT-1 水平高于輕度窒息組新生兒（P＜0.01），見表2。

表2 不同窒息程度的合并心肌損傷的窒息新生兒血漿 GPBB、CT-1 水平的變化 ,ρ/(μg·L－1)

表2 不同窒息程度的合并心肌損傷的窒息新生兒血漿 GPBB、CT-1 水平的變化 ,ρ/(μg·L－1)

*P＜0.05與輕度窒息組比較。

組別 n GPBB CT-1輕度窒息組 39 10.12±1.27 197.43±28.54重度窒息組 33 14.37±2.09* 296.79±20.48*

2.3 血漿GPBB、CT-1之間以及與合并心肌損傷的窒息新生兒的窒息程度關(guān)系

血漿GPBB水平、CT-1與窒息程度均呈負(fù)相關(guān)（r=－0.519、r=－0.527，P＜0.05）；血漿 GPBB 水平與CT-1水平呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.547，P＜0.05）。

3 討論

新生兒窒息是圍生期的各種病因所致的呼吸障礙，機(jī)體不能進(jìn)行正常的氣體交換，導(dǎo)致新生兒氧分壓下降，出現(xiàn)低氧血癥、高碳酸血癥和酸中毒。雖然隨著醫(yī)療水平的提高，新生兒窒息的發(fā)生率以及復(fù)蘇成功率有所改善，但新生兒窒息后的多臟器損害仍是影響并威脅新生兒生命和預(yù)后的常見并發(fā)癥，心臟就是最常見的受到損害的器官之一。由于心肌是以有氧代謝為主，對(duì)缺氧極度敏感；窒息的本質(zhì)是缺氧，可引起心肌細(xì)胞內(nèi)酸中毒、高碳酸以及缺血后再灌注損傷，出現(xiàn)心內(nèi)膜下心肌及乳頭肌缺血性改變和壞死等病理改變［4］，最終引起心力衰竭或心源性休克、多器官缺氧缺血性損害及功能障礙而危及生命。

尋找早期、快速、準(zhǔn)確評(píng)估新生兒窒息心肌損傷的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)以及有效降低或預(yù)防新生兒窒息后的心肌損害的發(fā)生是目前研究的重要課題，CT-1、GPBB是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的兩種心肌標(biāo)志物，它們的臨床價(jià)值得到越來(lái)越多的關(guān)注。GPBB是人體內(nèi)糖原磷酸化酶（glucogen phosphorylase，GP）3 種同工酶之一，大量存在于人類心肌、腦細(xì)胞中，分子質(zhì)量為97 ku，是心肌細(xì)胞氧化磷酸化時(shí)糖原分解的關(guān)鍵酶，主要的生理作用是為心肌細(xì)胞的收縮所需要的能量提供燃料。有研究報(bào)道:在心肌缺血損傷［5］、心力衰竭［6］等心臟疾病時(shí)，血漿GPBB在某個(gè)階段會(huì)明顯升高，隨后逐漸回落到正常范圍；而腦缺氧缺血?jiǎng)t并無(wú)血漿GPBB的明顯變化，因此認(rèn)為血漿的GPBB濃度升高可能反映缺氧缺血性心肌損傷的程度［7］，其敏感性以及特異性可能優(yōu)于CK-MB及肌鈣蛋白Ⅰ（cTnⅠ）［8］。 CT-1 是在 1995 年發(fā)現(xiàn)的一種白細(xì)胞介素家族細(xì)胞因子，人類CT-1是由201個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)與IL-6具有高度同源性，屬IL-6家族新成員。有研究發(fā)現(xiàn):CT-1參與了心臟早期發(fā)育過(guò)程，在心臟的早期發(fā)育中起重要作用［9］；CT-1在心室重構(gòu)、抑制心肌細(xì)胞凋亡以及保護(hù)心肌細(xì)胞中有著重要的作用［10］；CT-1預(yù)治療可降低離體心肌細(xì)胞死亡，心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯下降［10］。CT-1發(fā)揮作用的可能機(jī)制包括:CT-1與受體結(jié)合后，觸發(fā)JAK／STAT通路使酪氨酸激酶磷酸化而將信號(hào)傳入細(xì)胞內(nèi)，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期調(diào)控因子，發(fā)揮調(diào)控細(xì)胞增殖等功能；CT-1與受體結(jié)合后，尚可激活蛋白激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路（P42/P44 MAPK）和磷脂酰肌醇-3 激酶（PI3K）B/Akt途徑［11］。因此，CT-1作為最新發(fā)現(xiàn)的心肌標(biāo)志物，在正常心臟功能及心肌病、心肌梗死等心臟疾病診斷、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后估計(jì)等方面的重要臨床意義越來(lái)越得到學(xué)者們的重視。

本研究結(jié)果顯示合并心肌損傷的窒息新生兒血漿GPBB、CT-1水平較對(duì)照組明顯升高，且均隨窒息程度的加重而升高，與窒息程度成負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示GPBB、CT-1與新生兒窒息合并心肌損傷有著密切的關(guān)系，檢測(cè)GPBB、CT-1水平可有助于反映心肌損傷程度及其能量代謝狀況；缺氧越重，心肌損傷程度也越重，這也與窒息引起心肌損害的病理生理過(guò)程是一致的。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)學(xué)者的研究［12-13］相似。本研究暫未就檢測(cè)GPBB、CT-1與CK－MB、cTnI的特異性、敏感性進(jìn)行比較，但有研究［12-13］認(rèn)為GPBB、CT-1 特異性、敏感性優(yōu)于 CK－MB、cTnI。 另外，本研究結(jié)果顯示合并心肌損傷的窒息新生兒血漿GPBB、CT-1水平兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系，筆者認(rèn)為CT-1可能通過(guò)某種機(jī)制影響血漿GPBB水平,從而影響心肌的能量代謝。

綜上所述，GPBB、CT-1與新生兒窒息合并心肌損傷有著密切的關(guān)系，檢測(cè)GPBB、CT-1水平可有助于反映心肌損傷程度及其能量代謝狀況，可望成為早起診斷新生兒窒息心肌損傷的敏感標(biāo)志物，這對(duì)防治窒息新生兒的心肌損害、改善預(yù)后、降低新生兒病死率具有重要意義。

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