酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析

王利強

【摘要】目的探討酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析。方法選取本院近年來收治68例腫瘤患者血清標本進行檢測, 分別采用酶聯免疫法及電化學發光法對血清中甲胎蛋白(AFP)水平進行檢測。結果兩種方法檢測血清內游離AFP含量比較差異無統計學意義(P>0.05)；電化學法與對比酶聯免疫法>0.99, 由此可見, 與高度有較大關系；在95%可信度下, 通過對雙樣本均值分析的t檢驗, P>0.05, 由此可見, 電化學發光法與對比酶聯免疫法比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論在AFP檢測中, 酶聯免疫法與電化學發光法一致性較高, 在腫瘤標志物的診斷中具有較高的使用價值。

【關鍵詞】酶聯免疫法；電化學發光法；AFP腫瘤標志物；對比分析正常情況下, 人體甲胎蛋白(AFP)含量保持在2~8 ng/ml, 近年來臨床通過對甲胎蛋白含量的檢測, 對原發性肝癌進行診斷, 同時判斷患者預后。酶聯免疫法為傳統常用的免疫法, 在甲胎蛋白的檢測中使用廣泛；電化學發光法作為近年來快速發展的方法, 能夠精確、快速、重復性的進行操作, 因此前景良好［1］。為對酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物的結果進行比較分析, 作者對本院收治的68例腫瘤患者血清標本分別采用不同方法進行檢測, 現將具體報告如下。

1資料與方法

1. 1一般資料本院自2011年9月~2013年9月收治的68例腫瘤患者血清標本, 均為腫瘤科、內科及外科住院患者, 其中男41例, 女27例 , 年齡35~80歲, 平均年齡(41.32±6.59)歲, 其中32例患者標本濃度超出正常范圍, 36例患者標本濃度>20 ng/ml, 所有標本檢測范圍均控制在0.61~300 ng/ml, 采集靜脈血均為患者晨起空腹狀態下進行, 放置-20℃保存標本, 留備待檢。

1. 2儀器與試劑電化學發光法：采用儀器為羅氏公司Cobase-411電化學發光自動分析儀, 采用制劑為其配套試劑、定標液和質控品, 酶聯免疫法：使用儀器為深圳雷杜生命科學股份有限公司酶標儀, 使用試劑盒鄭州安圖綠科生物工程有限公司提供, 所有操作均嚴格按照儀器及試劑盒說明書進行。

1. 3統計學方法采用SPSS18.0統計學軟件處理, 計量資料采用均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗, 組間對比采用χ2檢驗, P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2. 1直線回歸分析ELISA法(Y)與電化學發光法檢測結果(X), 相關性檢測擬合直線為Y=7.574+1.055X, 根據擬合結果能夠發現, 酶聯免疫法與點化學發光法檢測CEA的散點圖呈現出直線趨勢, R2=0.9409, 相關系數r=0.97, 由此可見Y與X高度相關, 回歸系數t為16.429, 同時P<0.05, 因此可得出酶聯免疫法對AFP檢測結果之間為直線關系, 直線回歸方程為Y=7.574+1.055X。

2. 2酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物所得結果呈現出正態分布, 承兌雙樣本均值t檢驗結果見表1。

表1t檢驗成對雙樣本均值分析

項目 X Y

平均 22.65878471 23.65743262

方差 1924.325519 2829.351264

觀測值 60 60

泊松相關系數 0.989652322 -

假設平均差 0 -

df 58 -

t Stat -1.051032103 -

P(T<=t)單尾 0.15654416 -

t單尾臨界 1.667085036 -

P(T<=t)雙尾 0.28936551 -

T雙尾臨界 2.000053620 -

3討論

甲胎蛋白是特異性較強的原發性肝癌標志物, 是胎兒肝臟組織的合成物, 當胎兒出生后, AFP含量下降迅速, 并在出生后數月或者年內, 恢復至正常水平。一般情況下AFP水平在20 ng/ml之下［2］。多數癌癥患者體內AFP水平含量高于正常人, 然而總保持在350~400 IU/ml以下。研究顯示, 乙肝病毒攜帶者、畸胎瘤、酒精性肝硬化患者, 肝臟組織出現代償性增生, AFP水平相應的升高［3］。國內研究結果顯示, APF的診斷率符合率多在70%~90%。近年來隨著臨床檢測腫瘤標志物水平的增高, 放射免疫法( RIA) 、化學發光法(ECLIA) 、酶聯免疫法( ELISA) 等在臨床廣泛使用, 其中免疫層析法使用最為廣泛。

酶聯免疫法是傳統檢測AFP腫瘤標志物的重要手段, 設備及試劑成本均較低, 因此在基層醫院及篩查中使用廣泛, 然而其檢測的準確性、敏感性及穩定性等均比較低, 因此在對AFP腫瘤標志物進行檢測時, 存在一定的缺陷。本次研究使用的化學發光法(CLIA)是近年來新發展起來的新型標記免疫分析方法, 有效結合了免疫測定與電化學發光的優勢, 具有自動化程度高、檢測快速、無放射污染、結果精確、檢測范圍較寬等優勢；然而設備成本較高, 同時所需使用試劑亦較為昂貴［4］。本次研究結果顯示, 酶聯免疫法對AFP診斷, 可能導致假陽性的出現, 而電化學發光法能夠穩定、快速的進行診斷, 從而提高AFP診斷的準確性, 有效減少了漏診誤診現象的發生。總之, 不同檢測方法在對患者樣品結果進行診斷時具有可比性, 因此在臨床診斷及檢測時不應忽略, 然而無論患者采用何種儀器, 在何種檢測結構進行, 都需要保證檢驗結果的可比性, 實現檢測的準確性。本次研究中, 由于樣本量較少, 檢測范圍較窄, 因此仍需要在日后工作中繼續研究。

參考文獻

［1］ 徐焰, 陳名聲, 郝曉柯.聯合檢測血清AFU、AFP腫瘤標志物在原發性肝癌診斷中的臨床價值.重慶醫學, 2008, 37(23): 2805.

［2］ 張倩云, 林金明.磷脂酰肌醇蛋白聚糖3血清學檢測及其在原發性肝癌診斷中的應用.分析化學, 2009, 37(A03): 266.

［3］ 鄭建瓊.腫瘤標志物聯檢在肺癌診斷中的價值研究.中國免疫學雜志, 2013, 29(10):1067.

［4］ 黃紅, 毛琴, 全勝麟, 等. 4種血清腫瘤標志物在原發性胃淋巴瘤的I臨床應用研究.重慶醫學, 2013, 42(26):3117.

［收稿日期：2014-03-18］

endprint

【摘要】目的探討酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析。方法選取本院近年來收治68例腫瘤患者血清標本進行檢測, 分別采用酶聯免疫法及電化學發光法對血清中甲胎蛋白(AFP)水平進行檢測。結果兩種方法檢測血清內游離AFP含量比較差異無統計學意義(P>0.05)；電化學法與對比酶聯免疫法>0.99, 由此可見, 與高度有較大關系；在95%可信度下, 通過對雙樣本均值分析的t檢驗, P>0.05, 由此可見, 電化學發光法與對比酶聯免疫法比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論在AFP檢測中, 酶聯免疫法與電化學發光法一致性較高, 在腫瘤標志物的診斷中具有較高的使用價值。

【關鍵詞】酶聯免疫法；電化學發光法；AFP腫瘤標志物；對比分析正常情況下, 人體甲胎蛋白(AFP)含量保持在2~8 ng/ml, 近年來臨床通過對甲胎蛋白含量的檢測, 對原發性肝癌進行診斷, 同時判斷患者預后。酶聯免疫法為傳統常用的免疫法, 在甲胎蛋白的檢測中使用廣泛；電化學發光法作為近年來快速發展的方法, 能夠精確、快速、重復性的進行操作, 因此前景良好［1］。為對酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物的結果進行比較分析, 作者對本院收治的68例腫瘤患者血清標本分別采用不同方法進行檢測, 現將具體報告如下。

1資料與方法

1. 1一般資料本院自2011年9月~2013年9月收治的68例腫瘤患者血清標本, 均為腫瘤科、內科及外科住院患者, 其中男41例, 女27例 , 年齡35~80歲, 平均年齡(41.32±6.59)歲, 其中32例患者標本濃度超出正常范圍, 36例患者標本濃度>20 ng/ml, 所有標本檢測范圍均控制在0.61~300 ng/ml, 采集靜脈血均為患者晨起空腹狀態下進行, 放置-20℃保存標本, 留備待檢。

1. 2儀器與試劑電化學發光法：采用儀器為羅氏公司Cobase-411電化學發光自動分析儀, 采用制劑為其配套試劑、定標液和質控品, 酶聯免疫法：使用儀器為深圳雷杜生命科學股份有限公司酶標儀, 使用試劑盒鄭州安圖綠科生物工程有限公司提供, 所有操作均嚴格按照儀器及試劑盒說明書進行。

1. 3統計學方法采用SPSS18.0統計學軟件處理, 計量資料采用均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗, 組間對比采用χ2檢驗, P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2. 1直線回歸分析ELISA法(Y)與電化學發光法檢測結果(X), 相關性檢測擬合直線為Y=7.574+1.055X, 根據擬合結果能夠發現, 酶聯免疫法與點化學發光法檢測CEA的散點圖呈現出直線趨勢, R2=0.9409, 相關系數r=0.97, 由此可見Y與X高度相關, 回歸系數t為16.429, 同時P<0.05, 因此可得出酶聯免疫法對AFP檢測結果之間為直線關系, 直線回歸方程為Y=7.574+1.055X。

2. 2酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物所得結果呈現出正態分布, 承兌雙樣本均值t檢驗結果見表1。

表1t檢驗成對雙樣本均值分析

項目 X Y

平均 22.65878471 23.65743262

方差 1924.325519 2829.351264

觀測值 60 60

泊松相關系數 0.989652322 -

假設平均差 0 -

df 58 -

t Stat -1.051032103 -

P(T<=t)單尾 0.15654416 -

t單尾臨界 1.667085036 -

P(T<=t)雙尾 0.28936551 -

T雙尾臨界 2.000053620 -

3討論

甲胎蛋白是特異性較強的原發性肝癌標志物, 是胎兒肝臟組織的合成物, 當胎兒出生后, AFP含量下降迅速, 并在出生后數月或者年內, 恢復至正常水平。一般情況下AFP水平在20 ng/ml之下［2］。多數癌癥患者體內AFP水平含量高于正常人, 然而總保持在350~400 IU/ml以下。研究顯示, 乙肝病毒攜帶者、畸胎瘤、酒精性肝硬化患者, 肝臟組織出現代償性增生, AFP水平相應的升高［3］。國內研究結果顯示, APF的診斷率符合率多在70%~90%。近年來隨著臨床檢測腫瘤標志物水平的增高, 放射免疫法( RIA) 、化學發光法(ECLIA) 、酶聯免疫法( ELISA) 等在臨床廣泛使用, 其中免疫層析法使用最為廣泛。

酶聯免疫法是傳統檢測AFP腫瘤標志物的重要手段, 設備及試劑成本均較低, 因此在基層醫院及篩查中使用廣泛, 然而其檢測的準確性、敏感性及穩定性等均比較低, 因此在對AFP腫瘤標志物進行檢測時, 存在一定的缺陷。本次研究使用的化學發光法(CLIA)是近年來新發展起來的新型標記免疫分析方法, 有效結合了免疫測定與電化學發光的優勢, 具有自動化程度高、檢測快速、無放射污染、結果精確、檢測范圍較寬等優勢；然而設備成本較高, 同時所需使用試劑亦較為昂貴［4］。本次研究結果顯示, 酶聯免疫法對AFP診斷, 可能導致假陽性的出現, 而電化學發光法能夠穩定、快速的進行診斷, 從而提高AFP診斷的準確性, 有效減少了漏診誤診現象的發生。總之, 不同檢測方法在對患者樣品結果進行診斷時具有可比性, 因此在臨床診斷及檢測時不應忽略, 然而無論患者采用何種儀器, 在何種檢測結構進行, 都需要保證檢驗結果的可比性, 實現檢測的準確性。本次研究中, 由于樣本量較少, 檢測范圍較窄, 因此仍需要在日后工作中繼續研究。

參考文獻

［1］ 徐焰, 陳名聲, 郝曉柯.聯合檢測血清AFU、AFP腫瘤標志物在原發性肝癌診斷中的臨床價值.重慶醫學, 2008, 37(23): 2805.

［2］ 張倩云, 林金明.磷脂酰肌醇蛋白聚糖3血清學檢測及其在原發性肝癌診斷中的應用.分析化學, 2009, 37(A03): 266.

［3］ 鄭建瓊.腫瘤標志物聯檢在肺癌診斷中的價值研究.中國免疫學雜志, 2013, 29(10):1067.

［4］ 黃紅, 毛琴, 全勝麟, 等. 4種血清腫瘤標志物在原發性胃淋巴瘤的I臨床應用研究.重慶醫學, 2013, 42(26):3117.

［收稿日期：2014-03-18］

endprint

【摘要】目的探討酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析。方法選取本院近年來收治68例腫瘤患者血清標本進行檢測, 分別采用酶聯免疫法及電化學發光法對血清中甲胎蛋白(AFP)水平進行檢測。結果兩種方法檢測血清內游離AFP含量比較差異無統計學意義(P>0.05)；電化學法與對比酶聯免疫法>0.99, 由此可見, 與高度有較大關系；在95%可信度下, 通過對雙樣本均值分析的t檢驗, P>0.05, 由此可見, 電化學發光法與對比酶聯免疫法比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論在AFP檢測中, 酶聯免疫法與電化學發光法一致性較高, 在腫瘤標志物的診斷中具有較高的使用價值。

【關鍵詞】酶聯免疫法；電化學發光法；AFP腫瘤標志物；對比分析正常情況下, 人體甲胎蛋白(AFP)含量保持在2~8 ng/ml, 近年來臨床通過對甲胎蛋白含量的檢測, 對原發性肝癌進行診斷, 同時判斷患者預后。酶聯免疫法為傳統常用的免疫法, 在甲胎蛋白的檢測中使用廣泛；電化學發光法作為近年來快速發展的方法, 能夠精確、快速、重復性的進行操作, 因此前景良好［1］。為對酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物的結果進行比較分析, 作者對本院收治的68例腫瘤患者血清標本分別采用不同方法進行檢測, 現將具體報告如下。

1資料與方法

1. 1一般資料本院自2011年9月~2013年9月收治的68例腫瘤患者血清標本, 均為腫瘤科、內科及外科住院患者, 其中男41例, 女27例 , 年齡35~80歲, 平均年齡(41.32±6.59)歲, 其中32例患者標本濃度超出正常范圍, 36例患者標本濃度>20 ng/ml, 所有標本檢測范圍均控制在0.61~300 ng/ml, 采集靜脈血均為患者晨起空腹狀態下進行, 放置-20℃保存標本, 留備待檢。

1. 2儀器與試劑電化學發光法：采用儀器為羅氏公司Cobase-411電化學發光自動分析儀, 采用制劑為其配套試劑、定標液和質控品, 酶聯免疫法：使用儀器為深圳雷杜生命科學股份有限公司酶標儀, 使用試劑盒鄭州安圖綠科生物工程有限公司提供, 所有操作均嚴格按照儀器及試劑盒說明書進行。

1. 3統計學方法采用SPSS18.0統計學軟件處理, 計量資料采用均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗, 組間對比采用χ2檢驗, P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2. 1直線回歸分析ELISA法(Y)與電化學發光法檢測結果(X), 相關性檢測擬合直線為Y=7.574+1.055X, 根據擬合結果能夠發現, 酶聯免疫法與點化學發光法檢測CEA的散點圖呈現出直線趨勢, R2=0.9409, 相關系數r=0.97, 由此可見Y與X高度相關, 回歸系數t為16.429, 同時P<0.05, 因此可得出酶聯免疫法對AFP檢測結果之間為直線關系, 直線回歸方程為Y=7.574+1.055X。

2. 2酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物所得結果呈現出正態分布, 承兌雙樣本均值t檢驗結果見表1。

表1t檢驗成對雙樣本均值分析

項目 X Y

平均 22.65878471 23.65743262

方差 1924.325519 2829.351264

觀測值 60 60

泊松相關系數 0.989652322 -

假設平均差 0 -

df 58 -

t Stat -1.051032103 -

P(T<=t)單尾 0.15654416 -

t單尾臨界 1.667085036 -

P(T<=t)雙尾 0.28936551 -

T雙尾臨界 2.000053620 -

3討論

甲胎蛋白是特異性較強的原發性肝癌標志物, 是胎兒肝臟組織的合成物, 當胎兒出生后, AFP含量下降迅速, 并在出生后數月或者年內, 恢復至正常水平。一般情況下AFP水平在20 ng/ml之下［2］。多數癌癥患者體內AFP水平含量高于正常人, 然而總保持在350~400 IU/ml以下。研究顯示, 乙肝病毒攜帶者、畸胎瘤、酒精性肝硬化患者, 肝臟組織出現代償性增生, AFP水平相應的升高［3］。國內研究結果顯示, APF的診斷率符合率多在70%~90%。近年來隨著臨床檢測腫瘤標志物水平的增高, 放射免疫法( RIA) 、化學發光法(ECLIA) 、酶聯免疫法( ELISA) 等在臨床廣泛使用, 其中免疫層析法使用最為廣泛。

酶聯免疫法是傳統檢測AFP腫瘤標志物的重要手段, 設備及試劑成本均較低, 因此在基層醫院及篩查中使用廣泛, 然而其檢測的準確性、敏感性及穩定性等均比較低, 因此在對AFP腫瘤標志物進行檢測時, 存在一定的缺陷。本次研究使用的化學發光法(CLIA)是近年來新發展起來的新型標記免疫分析方法, 有效結合了免疫測定與電化學發光的優勢, 具有自動化程度高、檢測快速、無放射污染、結果精確、檢測范圍較寬等優勢；然而設備成本較高, 同時所需使用試劑亦較為昂貴［4］。本次研究結果顯示, 酶聯免疫法對AFP診斷, 可能導致假陽性的出現, 而電化學發光法能夠穩定、快速的進行診斷, 從而提高AFP診斷的準確性, 有效減少了漏診誤診現象的發生。總之, 不同檢測方法在對患者樣品結果進行診斷時具有可比性, 因此在臨床診斷及檢測時不應忽略, 然而無論患者采用何種儀器, 在何種檢測結構進行, 都需要保證檢驗結果的可比性, 實現檢測的準確性。本次研究中, 由于樣本量較少, 檢測范圍較窄, 因此仍需要在日后工作中繼續研究。

參考文獻

［1］ 徐焰, 陳名聲, 郝曉柯.聯合檢測血清AFU、AFP腫瘤標志物在原發性肝癌診斷中的臨床價值.重慶醫學, 2008, 37(23): 2805.

［2］ 張倩云, 林金明.磷脂酰肌醇蛋白聚糖3血清學檢測及其在原發性肝癌診斷中的應用.分析化學, 2009, 37(A03): 266.

［3］ 鄭建瓊.腫瘤標志物聯檢在肺癌診斷中的價值研究.中國免疫學雜志, 2013, 29(10):1067.

［4］ 黃紅, 毛琴, 全勝麟, 等. 4種血清腫瘤標志物在原發性胃淋巴瘤的I臨床應用研究.重慶醫學, 2013, 42(26):3117.

［收稿日期：2014-03-18］

endprint