黨參不同提取物對小鼠記憶功能的改善作用

郭軍鵬 葛 斌

(長春中醫藥大學基礎醫學院，吉林 長春 130117)

黨參是臨床常用的補益類中藥，性味甘平、無毒，具有補中益氣、生津止渴、健脾益肺之功效。其含多種糖類、酚類、甾醇、揮發油、黃芩素葡萄糖甙、皂甙及微量生物堿等，臨床常用于增強免疫力、擴張血管、降壓、改善微循環、增強造血功能等〔1〕。近些年研究發現黨參還具有改善記憶的功能〔2〕。本實驗研究比較黨參不同提取物改善記憶的功能，為進一步將黨參開發成輔助改善記憶的保健食品奠定基礎。

1 材料與方法

1.1實驗動物 C57BL純系清潔級雄性小鼠，體重(20±2)g，由吉林大學實驗動物中心提供，合格證號SCXK(吉) 2006-2008。

1.2藥品與試劑 黨參醇提物、水提物的制備：分別取10倍體積70%酒精或清水浸泡30 min，大火煮沸后小火繼續煎煮30 min，過濾；藥渣再加入8 倍體積70%酒精或清水煎煮1次，合并前后2次濾液并濃縮，含生藥0.25 g/ml，置冰箱備用；谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3儀器 Morris水迷宮，小鼠跳臺儀，小鼠避暗儀，BIO-410酶標儀。

1.4動物分組及給藥 將小鼠隨機分為三組，每組12只，分別為空白對照組、黨參醇提組、黨參水提組。空白對照組灌胃給予生理鹽水0.2 ml/d；黨參醇提組、水提組分別灌胃給予黨參醇提物和水提物2.5 g·kg-1·d-1(相當于人用量的10倍)，持續給藥15 d。

1.5小鼠空間學習記憶能力的檢測 采用Morris水迷宮評價小鼠空間學習記憶能力。末次給藥后1 h開始訓練。訓練前10 min，空白對照組小鼠腹腔注射生理鹽水10 ml/kg；給藥組小鼠腹腔注射氫溴酸東莨菪堿(5 mg/kg) 1 次，建立記憶障礙小鼠模型。訓練4次/d，歷時5 d。訓練時將小鼠依次從4個不同的象限將小鼠面向池壁放入水中，觀察并記錄小鼠尋找隱藏在水面下平臺的時間記為逃避潛伏期。如果小鼠在90 s內未找到平臺，將其引至平臺，并在平臺上停留30 s后取下，此時潛伏期記為90 s，訓練間隔60 s/次。前4 d為訓練適應期，第5天記錄，計算各組動物逃避潛伏期。學習記憶能力強的動物其逃避潛伏期縮短。第6天將隱藏在水面下平臺撤除，進行小鼠空間探索實驗，檢測單位時間內(60 s)小鼠經過平臺次數和平臺停留時間(s)〔3〕。

1.6小鼠被動回避記憶能力的檢測 采用跳臺和避暗實驗評價小鼠被動回避記憶能力。末次給藥后1 h開始訓練。記憶障礙小鼠模型建立方法同上。將動物放入反應箱內(臺上、臺下)適應環境3 min，然后將動物放置反應箱內的銅柵上，立即通以36 v的交流電。動物受到電擊，正常反應是跳上平臺(絕緣體)或返回明室，以躲避傷害性刺激。24 h后進行重測驗，記錄小鼠的逃避潛伏期，以此作為測試成績，用于評價小鼠被動回避記憶能力〔3〕。

1.7小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的檢測 行為學實驗結束后摘眼球取血，室溫靜止30 min，3 000 r/min離心15 min，取上清液，按照試劑盒要求分別測定血清GSH-PX、MDA和SOD的水平。

2 結 果

2.1黨參提取物對小鼠空間學習記憶能力的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠在定位航行實驗表現較好，潛伏期比較短；黨參水提物組表現較差，潛伏期延長。黨參醇提物組小鼠在空間搜索實驗中經過平臺次數和平臺停留時間有增多趨勢；黨參水提物組經過平臺次數和平臺停留時間明顯增加(P<0.01)。見表1。

表1 黨參提取物對小鼠空間學習記憶能力的影響

2.2黨參不同提取物對小鼠被動回避記憶能力的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠跳臺潛伏期和避暗潛伏期沒有明顯變化。黨參水提物組小鼠表現較差，潛伏期縮短(P<0.01)。見表2。

2.3黨參不同提取物對小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的影響 與空白對照組比較，黨參醇提物組小鼠血清GSH-PX和SOD水平增加(P<0.05)，MDA變化不明顯。黨參水提物組小鼠血清SOD水平明顯增加(P<0.01)，而GSH-PX和MDA變化不明顯。見表3。

表2 黨參不同提取物對記憶獲得障礙模型小鼠學習記憶能力的影響

表3 黨參不同提取物對小鼠血清GSH-PX、MDA和SOD水平的影響

3 討 論

人口老齡化已成為當今世界人們越來越關注的重要問題，隨著年齡的增加，學習和記憶等人類中樞神經系統的高級功能呈現逐漸退化的趨勢。它們不僅影響了生活質量，而且也增加患者的家庭和社會負擔。近些年有關中藥及其提取物改善學習記憶功能的研究日益受到重視。中醫認為，記憶和認知屬“神”的范疇，與腦髓關系密切。氣血生化不足，清竅失養，髓海失充，神機失用，則記憶和認知功能減退〔4〕。黨參具有補中益氣、健脾益肺的功效。臨床常用于脾肺虛弱、氣短心悸、食少便溏、虛喘咳嗽、內熱消渴等。

本文根據《保健食品檢驗與評價技術規范》〔5〕比較了黨參醇提物和水提物對小鼠記憶能力的影響。結果顯示黨參醇提物和水提物均能通過不同途徑改善小鼠記憶功能，因此將黨參開發為益智保健食品時應通過兩種提取方式且合并提取物，以保留黨參改善記憶的有效成分。

4 參考文獻

1賀 慶，朱恩圓，王崢濤，等.黨參化學成分的研究〔J〕.中國藥學雜志，2006；41(1)：10-2.

2張 立，李 丹，劉積平，等.黨參多糖對鉛中毒小鼠記憶障礙的影響及其作用機制〔J〕.武警醫學，2013；24(5)：410-3.

3魏 偉，吳希美，李元建.藥理實驗方法學〔M〕.北京：人民衛生出版社：2010:33-5.

4吳 浩，曹秀榮，黃志軍，等.參葉益智膠囊改善記憶功能的作用機理研究〔J〕.時珍國醫國藥，2003；14(11)：656-7.

5中華人民共和國衛生部.保健食品檢驗與評價技術規范〔S〕.2003：6-7.