臨床疑難配血常見因素分析及解決辦法

高麗平 張紅旗

臨床疑難配血常見因素分析及解決辦法

高麗平 張紅旗

目的 分析疑難配血的成因, 探討科學簡潔的解決辦法。方法 對近幾年遇到的疑難配血病例進行原因分析, 并對所采取的處理方法進行總結和歸納。結果 46例疑難配血病例原因分為5類13種, 其中不規則抗體占疑難配血病例總數的39.1%, 冷凝集素和自身抗體占32.6%, 抗原減弱占8.7%,抗體減少占6.5%, 試劑因素占4.3%, 其它如類B、亞型、操作錯誤等各占2.2%。結論 將ABO疑難血型三步分析法思路與微柱凝膠卡法新技術結合起來, 應用于臨床疑難配血簡便快速、科學實用。

血型鑒定；不規則抗體；交叉配血

輸血現已成為臨床治療疾病的重要手段之一, 尤其在急性大出血, 出血性疾病, 慢性貧血等疾病的治療中更為突出。血型鑒定和交叉配血是臨床輸血安全的重要保障措施, 而疑難配血又是輸血科工作人員經常遇到的棘手問題。現將本科室2008年3月~2013年11月間46例疑難配血病例進行回顧性分析, 報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標本來源于2008年3月~2013年11月在本院輸血的住院及門診患者, 部分有輸血史及妊娠史。

1.2 試劑與儀器 抗-A、抗-B和RhD(IgM)單克隆血型定型試劑由長春博德生物技術有限責任公司提供；人ABO血型反定型用紅細胞試劑、紅細胞血型抗體篩選細胞及紅細胞血型抗體鑒定譜細胞由上海血液生物醫藥有限責任公司提供；凝聚胺試劑由珠海生物技術有限公司生產；微柱凝膠卡包括ABO、RhD血型檢測卡、Rh血型分型卡、抗人球蛋白檢測卡, 由長春博迅生物技術有限公司提供； TD-3A型血型血清學用離心機、FYQ型免疫微柱孵育器為長春博研科學儀器有限責任公司生產。

1.3 方法 本實驗室開展有鹽水介質法、凝聚胺法與微柱凝膠卡法。ABO血型正反定型、RhD血型鑒定首先按照文獻［1］的方法進行操作, 發現正反定型不符或結果難以判定時, 加做吸收放散試驗和用微柱凝膠卡法進一步驗證；交叉配血試驗也先用鹽水介質法和凝聚胺法, 遇有不配合需要做Coombs試驗、新生兒溶血病診斷、紅細胞亞型、不規則抗體篩選及鑒定、Rh血型分型等用微柱凝膠卡法, 均按試劑及儀器說明書嚴格操作并判斷結果。

2 結果

46例疑難配血病例不同的原因分類及其處理方法見表1。

2.1 不規則抗體 不規則抗體陽性者共18例, 占46例疑難配血的39.1%, 其中抗-D 1例(2.2%), 抗-E 10例(21.7%),抗-M 6例(13.0%), 抗-P11例(2.2%)；分別占不規則抗體陽性總數的5.6%, 55.6%, 33.3%和5.6%。處理措施是篩選相應抗原陰性的紅細胞進行輸注。

2.2 抗原減弱 抗原減弱4例, 均為白血病患者, 占46例疑難配血的8.7%。4℃條件下延長正定型反應時間, 吸收放散試驗確定血型后同型輸注。

2.3 抗體減少 抗體減少3例, 占46例疑難配血的6.5%。其中1例為白血病患者, 2例為老年患者。處理方法是增加反定型血清量, 4℃條件下延長反定型反應時間, 確定血型后同型輸注。

2.4 冷凝集素 冷凝集素干擾交叉配血試驗10例, 占46例疑難配血的21.7%。簡單的處理方法選用微柱凝膠卡法配血,可避免冷抗體的干擾。或用溫鹽水洗滌患者紅細胞, O型紅細胞4℃條件下吸收患者血清中冷抗體, 后在37℃條件下進行血型鑒定與交叉配血試驗。

表1 46例疑難配血原因分析及處理方法(n, %)

2.5 自身抗體 自身抗體陽性者5例, 占46例疑難配血的10.9%。處理方法是選擇交叉配血凝集最弱者進行輸注。

2.6 A2B亞型 A2B亞型1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法是選擇不含A1抗原的紅細胞進行輸注。

2.7 類B 獲得性B 1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法有：唾液血型物質鑒定、ABO血型吸收放散試驗、使用抗-A+B、抗-H做正定型試驗, 再重做ABO正反定型試驗和交叉配血試驗。

2.8 標本因素 患者血清蛋白紊亂1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法有：唾液血型物質鑒定、溫鹽水洗滌紅細胞再重做ABO正反定型試驗、反定型觀測結果時, 用生理鹽水稀釋后凝集散開。正確定型后交叉配血。

2.9 試劑因素 試劑因素2例, 占46例疑難配血的4.3%。檢查試劑質量并更換合格試劑。

2.10 人為因素 人為誤判1例, 占46例疑難配血的2.2%。處理方法再次培訓SOP, 重新規范操作。

3 討論

由表1可見本次調查46例疑難配血原因分布在5大類共13種, 不規則抗體和自身抗體分別占疑難配血病例總數的39.1%和32.6%與文獻［1］報道的50.0%和33.3%比較,不規則抗體比例稍低, 自身抗體所占比例相近。

疑難配血主要難在血型鑒定和抗體的篩查與鑒定, 這兩個問題解決后即可以同型或相容性輸注。欲解決好疑難配血, 首先應具備相當數量的高素質專業技術人員, 以ABO疑難血型三步分析法［2］為技術路線, 以血型血清學操作規程［3］和凝聚胺技術、微柱凝膠免疫檢測技術為依托, 建立并持續改進臨床輸血質量管理體系, 認真編寫并嚴格執行輸血技術操作規程(SOP), 據文獻［4］報道占疑難配血病例29.3%屬于人員誤操作和試劑質量因素, 通過強化培訓并嚴格執行SOP,即可糾正并預防此類情況的再次發生。其次在編寫SOP時考慮到不同患者的臨床資料, 適時指導操作人員哪些患者需做抗體篩查, 用什么方法；哪些情況需按照ABO正反定型不一致分類表［5］提示逐項排除不可能引起正反定型不一致的原因, 并對還無法排出的原因設計一組有針對性的試驗和方法來驗證患者的血型。在本實驗室中, 微柱凝膠免疫檢測技術以其具有簡單方便、不需洗滌、陰性結果不須確認試驗、適用于大量標本檢測、解決了Coombs試驗因為程序復雜費時等原因未能在臨床應用的問題, 同時具有結果準確、清晰明確、保存時間長、可重復性強, 對臨床標本血型檢測敏感性恰到好處、標本用量少約為試管法的1/10~1/5、儀器操作、工作程序和結果判定等易于規范化和標準化等優點, 在解決疑難配血病例工作中發揮了關鍵性的作用。

［1］ 董興華, 林正明, 江建鋒, 等.36例疑難配血原因分析及解決方案.中國輸血雜志, 2012, 25(5):481-482.

［2］ 蘭炯采, 陳靜嫻, 馬紅麗, 等.推薦ABO疑難血型三步分析法.中國輸血雜志, 2010, 23(3):165-168.

［3］ 葉應嫵, 王毓三, 申子瑜, 等.全國臨床檢驗操作規程.第3版.南京：東南大學出版社, 2006:246-257.

［4］ 苑新.基層醫院ABO血型正反定型不符常見原因分析.中國誤診學雜志, 2006, 6(5):869-870.

［5］ 蘭炯采, 贠中橋, 陳靜嫻.輸血免疫學實驗技術.北京:人民衛生出版社, 2011:131-146.

2014-03-21］

466300 河南省， 沈丘縣人民醫院輸血科(高麗平)；周口市中心血站血型室(張紅旗)

高麗平