寡克隆區帶檢驗在兒童神經系統疾病中的應用

楊靖

【摘要】目的 研究寡克隆區帶檢驗在兒童神經系統疾病中的應用價值。方法 篩選出2012年3月到2014年3月兒科住院診斷為神經系統疾病的54例患兒為研究對象，根據疾病類型的不同將其分為三組，A組：神經系統炎性脫髓鞘疾病（20例），B組：神經系統炎性疾病（20例）， C組：周圍神經病（14例）。采用免疫固定電泳技術對患兒的腦脊液及血清標本中的寡克隆區帶進行檢測并對結果進行分析比較。結果 三組患兒陽性率兩兩之間比較：A組與B組比較χ?=0.5670，P>0.05，無明顯差異；A組與C組比較χ?=23.5105、B組與C組比較χ?=17.4550，P均<0.05，差異具有統計學意義。結論寡克隆區帶檢驗對兒童神經系統疾病的診斷及鑒別診斷具有較高臨床應用價值，可對患兒中樞神經系統體液免疫活化情況進行反饋，對神經系統疾病中多發性硬化病的診斷陽性率較高，具有較高的臨床理論價值，可進行輔助診斷。

【關鍵詞】寡克隆區帶；免疫固定電泳技術；兒童神經系統疾病；應用價值

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2014）12-0119-02

腦脊液寡克隆區帶是臨床對神經系統疾病進行檢測的常用指標。相關國外研究已經證實寡克隆區帶的檢測在多種神經系統疾病檢測中對其發病機制的研究及診斷具有重要價值，如癡呆、中樞神經系統感染、多發性硬化等疾病[1]。但由于中西方存在人種上的差異，特別是國內多發性硬化患者與西方患者在臨床特征上具有顯著差別，故應對中國寡克隆區帶檢測在神經系統疾病患者診斷中的價值進行臨床探究，尤其是在幼兒患者中。為此筆者展開了對54例神經系統疾病患兒寡克隆區帶檢驗結果的對照研究，現將結果總結如下。

1資料與方法

1.1一般資料

篩選出2012年8月到2014年8月兒科住院診斷為神經系統疾病的54例患兒為研究對象，其中男性30例，女性24例；年齡6個月～12歲，平均（4.6±1.8）歲；病程1個月～5年，平均（2.8±1.3）年。根據疾病類型的不同將其分為三組，A組：神經系統炎性脫髓鞘疾病（20例），包含多發性硬化11例、視神經脊髓炎5例、吉蘭巴雷綜合征4例；B組：神經系統炎性疾病（20例），包含脊髓炎6例、顱內感染8例、腦囊蟲病2例、病毒性腦炎4例； C組：周圍神經病（14例）。三組患兒在性別、年齡、病程等臨床資料的比較上，差異無統計學意義，可進行組間比較。

1.2方法

所有患兒入院后完善相關常規檢查，于第二日晨間抽取外周血3ml，離心分離出血清；同時采用腰穿的方式抽取腦脊液3ml；如病情需要或腦脊液發生異常，則需要重復腰椎穿刺留置標本；全部標本均保存在-20℃冰箱內待測。①寡克隆區帶檢驗：利用瓊脂糖凝膠進行免疫固定電泳對血清和腦脊液標本進行檢驗，蛋白質經瓊脂糖凝膠行電泳分離后利用免疫固定技術，在凝膠片上加入IgG酶標抗血清，采用特異性高的抗體對酶進行標記，經固相酶免疫反應后，進行顯色，讓標本呈現出寡克隆區帶；對此寡克隆區帶進行免疫球蛋白性質的鑒定。腦脊液表現出與血清不相同的2個及以上的異常區域則提示（+）。全部血清及腦脊液標本的寡克隆區帶檢測均經PN1211全自動電泳分析儀進行，且經兩個受過專業培訓的實驗室工作人員分別操作執行，得到相同的（+）結果為準。

1.3觀察指標

對每個患兒的寡克隆區帶（+）結果、腦脊液數據進行觀察記錄，并進行分析比較[2]。

1.4統計學分析

采用SPSS 14.0統計軟件包進行統計學分析，計量資料以（ ±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料采用例數（%）表示，率的比較采用χ?檢驗，檢驗結果以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2結果

2.1A組患兒中檢驗結果為（+）者共7例，約占35.0%；其中多發性硬化5（45.0%）例、視神經脊髓炎1（20.0%）例、吉蘭巴雷綜合征1（25.0%）例。B組患兒中檢驗結果（+）者共6例，約占30.0%；其中脊髓炎2（33.3%）例、顱內感染2（25.0%）例、腦囊蟲病1（50.0%）例、病毒性腦炎1（25.0%）例；C組患兒中檢驗結果為（+）者共1例，約占7.1%。三組患兒寡克隆區帶檢驗陽性率比較，具體見表1。

注：三組患兒陽性率兩兩之間比較：A組與B組比較χ?=0.5670（P=0.4515），A組與C組比較χ?=23.5105（P=0.0000），B組與C組比較χ?=17.4550（P=0.0000）。其中A組和B組之間無明顯差異，C組分別與A組和B組間比較，P均<0.05，差異具有統計學意義。

2.2三組患兒腦脊液WBC計數分別為：A組（32.5±2.8）×106，B組（33.5±3.0）×106，C組（31.8±3.2）×106；腦脊液蛋白定量分別為：A組（0.8±0.4）g/dl，B組（1.2±0.6）g/dl，C組（1.1±0.5）g/dl。三組患兒兩種指標水平無明顯差異。

3討論

血清和腦脊液中寡克隆帶檢驗在臨床對神經系統疾病的診斷中廣泛應用，其證實中樞神經本身參與活躍的免疫應答。腦脊液寡克隆區帶屬于定性指標，具有高度靈敏性，其檢驗結果顯示（+）提示中樞神經系統存在自身生成的免疫球蛋白[3]。李潔等研究發現，寡克隆區帶陽性在多發性硬化及中樞神經系統感染性疾病中，前者腦脊液檢驗呈（+），但血清檢驗中多為（-）；后者在血清及腦脊液的檢驗中均可顯示為（+）；腦脊液寡克隆區帶陽性區和血清檢驗中不同，表明寡克隆區帶檢驗（+）對多發性硬化疾病的診斷意義不同[4]。

本文研究中，不同疾病類型患兒，血清及腦脊液中寡克隆區帶陽性率不同，其中A組為35.0%，B組為30.0%，C組為7.1%，三組兩組間進行比較，C組與A組、B組存在顯著差異（P均<0.05），但A組與B組間比較，無明顯差異（P>0.05）。說明在A組和B組患兒中均中樞神經系統存在自身免疫激活。A組患兒中，多發性硬化陽性率為45.0%最高，視神經脊髓炎僅為20.0%。臨床上此兩類疾病表現相似，難以通過臨床癥狀進行鑒別診斷；但對寡克隆區帶進行檢測可有效區分二者。本文研究中將其分組進行寡克隆區帶檢驗，結果多發性硬化與視神經脊髓炎陽性率水平差異顯著。吉蘭巴雷綜合征患兒陽性率為25.0%與多發性硬化相比較低。提示寡克隆區帶檢驗陽性率在兒童神經系統疾病的診斷中對多發性硬化的診斷率較高[5]。通過B組與C組研究數據分析可得：神經系統炎性疾病寡克隆區帶檢驗陽性率為30.0%，周圍神經病陽性率為7.1%，其中脊髓炎33.3%、顱內感染25.0%、腦囊蟲病50.0%、病毒性腦炎25.0%；證明寡克隆區帶檢驗對兒童神經系統疾病的診斷具有較高臨床應用價值，可對患兒中樞神經系統體液免疫活化情況進行反饋。

綜上所述，寡克隆區帶檢驗對神經系統疾病中多發性硬化病的診斷陽性率較高，具有較高的臨床理論價值，不同的神經系統疾病診斷的靈敏度不統一，寡克隆區帶的檢測對臨床鑒別診斷多發性硬化病具有重要意義。

參考文獻：

[1] Magraner，M.J.，Bosca，I.，Simó-Castelló，M. et al.Brain atrophy and lesion load are related to CSF lipid-specific IgM oligoclonal bands in clinically isolated syndromes[J].Neuroradiology，2012，54（1）：5-12.

[2] 唐波，婁茜.腦脊液電泳在多發性硬化病中的應用[J].重慶醫學，2007，36（10）：905-906.

[3] 喻雄文，高玲，顏綿生等.腦脊液寡克隆區帶瓊脂糖凝膠免疫固定電泳的實驗研究[J].熱帶醫學雜志，2010，10（9）：1073-1075.

[4] 李潔，李琳，付璐等.腦脊液寡克隆區帶檢測對中樞神經系統疾病的診斷價值[J].中國血液流變學雜志，2010，20（2）：293-295.

[5] 王玉鴿，胡學強，鄭雪平等.腦脊液寡克隆區帶對多發性硬化的意義[J].中國神經免疫學和神經病學雜志，2013，20（3）：153-155，159.