ClK細胞免疫治療原發性肝癌的臨床療效評價

孫英慧 宋爽 楊紫恩

（北部戰區總醫院 遼寧 沈陽 110016）

原發性肝癌是臨床常見的一種惡性腫瘤，主要由肝細胞和(或)肝內膽管上皮細胞癌變導致。近年來原發性肝癌治療手段逐漸豐富，包括手術治療、放化療以及免疫治療等手段極大提高了原發性肝癌患者的生存率[1]。其中過繼免疫治療是治療原發性肝癌的新型手段，細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)作為一種體外廣譜抗瘤免疫活性細胞目前在原發性肝癌免疫治療中得到了廣泛應用[2]，為進一步探討CIK細胞免疫治療原發性肝癌的臨床療效，現做如下報道。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2010年5月—2016年5月間收治的71例原發性肝癌患者，所有患者均經手術病理結果確診，納入時病灶無轉移，臨床分期I、Ⅱ期，Child-pugh分級為A、B級，且未接受過其他免疫抑制劑治療。其中男性患者37例，女性患者34例，年齡42～78歲，平均年齡（62.3±2.5）歲。

1.2 治療方法

抽取患者外周血50mL，使用密度梯度離心法分離出1×107～7×107個單個核細胞，細胞濃度控制在1×106/mL～2×106/mL，并加入IFN-γ1000IU/mL/mL，置于37℃、5%CO2環境中培養24h。然后加入單克隆抗CD3抗體100ng/mL、IL-2 1000U/mL繼續培養1～2d，每2～3天添加新鮮無血清培養基及IL-21000U/mL繼續培養2周。所有制備操作流程均符合臨床相關規定及安全標準，質控合格后于CIK細胞培養第15d收集、離心、洗滌CIK 細胞，并使用20%人血白蛋白生理鹽水重懸，制成 200mLCIK細胞懸液，1h內靜脈輸注到患者體內，隔日再回輸一次，2次為1療程，持續治療3個療程。

1.3 療效評價指標

采集患者靜脈血2ml，利用流式細胞儀檢測患者治療前后的T細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細胞水平，對免疫功能進行評價，同時對患者進行2年的隨訪，記錄患者生存情況及復發情況。

1.4 統計學處理

采用SPSS20.0軟件對數據資料進行統計分析，計量資料用表示，計數資料用率（%）表示，其中計量資料采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 免疫功能比較

患者治療后CD8+水平以及CD4+/CD8+較治療前有所改善，差異有統計學意義（P＜0.05），治療前后CD3+、CD4+水平差異未見統計學意義（P＞0.05）。見表。

表 患者治療前后T細胞亞群比較（）

表 患者治療前后T細胞亞群比較（）

CD3+(%)CD4+(%)CD8+ (%)CD4+/CD8+治療前 77.28±16.59 42.25±11.43 25.87±7.94 1.86±0.61治療后 77.42±17.26 41.68±12.51 29.26±9.25 1.45±0.57 P＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 隨訪結果

71例患者中，復發13例，死亡9例，復發率和病死率分別為18.3%和12.6%。

3.討論

肝癌的發生及發展與患者的免疫功能有密切關系，手術是目前治療肝癌的主要方式，但術后患者預后差、復發率高[3]，提高肝癌患者的免疫功能對于提高臨床療效，延長患者生存期具有重要意義。過繼免疫治療是提高腫瘤患者免疫功能的一種重要治療手段，對于提高患者的免疫功能，降低腫瘤的復發及轉移率有重要作用[4]。CIK是一群具有非組織相容性復合體限制殺瘤活性的異質細胞，其中CD3和CD56 T細胞具有體外增殖能力強、廣譜高效殺瘤活性等特點[5]，對于調節和增強機體免疫功能，清除體內殘余病灶，防止腫瘤復發有積極意義。

機體免疫系統主要由CD4+與CD8+相互作用形成，腫瘤患者因機體免疫功能降低，因此出現CD4+下降而CD8+上升，進而導致CD4+/CD8+下降[6]。采用CIK細胞免疫治療原發性肝癌取得了較好的臨床療效，治療后患者的T細胞亞群CD8+水平以及CD4+/CD8+較治療前有所改善（P＜0.05），且遠期療效較為理想，這與宋娟[7]報道一致。Pan[8]對204例外科術后的肝癌患者行至少4周期CIK細胞治療，患者治療后的5年生存率明顯高于未用CIK細胞治療組患者。CIK抑制腫瘤的機理在于非MHC限制性細胞毒性作用由NKG2D介導，與顆粒酶作用后造成細胞溶解，并釋放顆粒酶導致腫瘤細胞裂解，同時增強機體對癌細胞的免疫功能，提升免疫監視功能水平。

綜上所述，采用CIK細胞免疫治療原發性肝癌的療效確切，能夠有效改善患者免疫功能，對于降低復發率，延長生存期具有積極意義，可在臨床推廣應用。