兒童血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌的分布及耐藥性分析

吳端宗 傅清流 雷 瑩 林建生 周鳳華

（泉州市兒童醫(yī)院福建泉州，福建 泉州 362000）

兒童血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌的分布及耐藥性分析

吳端宗 傅清流 雷 瑩 林建生 周鳳華

（泉州市兒童醫(yī)院福建泉州，福建 泉州 362000）

目的探討兒童血培養(yǎng)中凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）的分布狀況及對抗菌藥物的耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供科學(xué)依據(jù)。方法應(yīng)用全自動血培養(yǎng)儀Bact/Alert 3D 120進行血液細菌培養(yǎng)，分離菌株鑒定及藥敏試驗均采用法國生物-梅里埃公司VITEK-2 Compact全自動微生物分析儀來進行，按美國CLSI 2008年版藥敏標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。結(jié)果2008年1月至2012年12月從住院兒童血培養(yǎng)標(biāo)本中共分離出CNS 839株，其中表皮葡萄球菌394株（46.96%），人葡萄球菌240株（28.61%），溶血葡萄球菌117株（13.95%），其他葡萄球菌株62株（7.39%），耐甲氧西林凝固酶陰性的葡萄球菌（MRCNS）的檢出率為80.10%（672/839），藥敏結(jié)果顯示，CNS對青霉素、紅霉素高度耐藥，對萬古霉素、喹努普汀/達福普汀敏感性高，未檢出對利奈唑胺耐藥的菌株。結(jié)論CNS已成為兒童血流感染的首位病原菌，MRCNS發(fā)生率高，萬古霉素、利奈唑胺、喹努普汀/達福普汀是治療MRCNS感染的首選藥物。

兒童；凝固酶陰性葡萄球菌；血培養(yǎng)；抗菌藥物；耐藥性

凝固酶陰性的葡萄球菌（CNS）以往被認為是皮膚、黏膜的正常菌群，臨床意義不大，但近20年來，已肯定該類菌為人類的重要的病原體，在醫(yī)院，已成為感染的主要病原菌。現(xiàn)今隨著高效廣譜抗生素、免疫抑制劑的大量使用和各種侵入性操作診療技術(shù)在兒科的逐步推廣，CNS造成的血行性感染不斷增多，耐藥率也逐年增高，對于抵抗弱的兒童群體，它的致病性更顯突出。為了解該類菌在我院住院患兒的血流感染狀況，筆者對我院2008年1月至2012年12月住院患兒血培養(yǎng)分離的CNS的分布及耐藥情況進行分析，以期為兒童CNS感染的治療提供幫助。

1 材料與方法

1.1 菌株來源：2008年1月至2012年12月我院住院患兒送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本中分離出的凝固酶陰性葡萄球菌。

1.2 血培養(yǎng)、菌株分離鑒定及藥敏：采用法國生物梅里埃公司Bact/ Alert-3D-120全自動血培養(yǎng)儀增菌，溫度設(shè)定為35 ℃，陰性報警時限設(shè)定為5 d。以無菌操作抽取患兒靜脈血1～5 mL，注入配套的專用的兒童血培養(yǎng)瓶（PF），分離的純菌使用的是法國生物梅里埃公司的VITEK-2 compact全自動微生物分析儀及配套革蘭陽性菌（GP）鑒定卡、藥敏卡進行細菌鑒定、藥敏試驗及耐甲氧西林葡萄球菌的檢測。藥敏判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）2008年版的規(guī)定執(zhí)行。由福建省臨床檢驗中心提供的質(zhì)控菌株為ATCC25923。

2 培養(yǎng)結(jié)果

2.1 凝固酶陰性葡萄球菌的菌種分布及構(gòu)成比：共分離出CNS 839株，其中表皮葡萄球菌394株，占46.96%，居首位；其次為人葡萄球菌240株，占28.61%；第三位為溶血葡萄球菌117株，占13.95%；其他凝固酶陰性葡萄球菌62株，占7.39%，見表1。

表1 839株CNS的菌種分布及構(gòu)成比（%）

2.2 三種主要CNS對13種抗菌藥物的耐藥率：839株CNS中共檢出MRCNS 672株，檢出率為80.10%，其中表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌的MRCNS的發(fā)生率分別為330株（83.76%）、179株（74.58%）、111株（94.87%）。三種主要CNS對青霉素、苯唑西林和紅霉素的耐藥率較高，均超過74%，對其他抗菌藥物也呈不同程度耐藥，對萬古霉素、喹努普汀/達福普汀敏感性高，未發(fā)現(xiàn)對利奈唑胺耐藥的菌株。見表2。

表2 三種主要CNS對13種抗菌藥物的耐藥率比較

3 討 論

兒童血流感染病原菌的構(gòu)成比是隨時間不同而變遷的，上世紀(jì)80年代后，革蘭陽性菌上升到了主導(dǎo)地位，較為突出的就是以表皮葡萄球菌為代表的凝固酶陰性葡萄球菌對兒童特別是新生兒所致的血流感染在近幾年呈上升趨勢，已成為兒童血培養(yǎng)病原菌的首位菌[1-2]，我院住院患兒血培養(yǎng)病原菌中CNS的感染占第1位，分離出的CNS菌種中居前三位依次為表皮葡萄球菌394株（46.96%），人葡萄球菌240株（28.61%），溶血葡萄球菌117株（13.95%）。究其原因，一方面由于兒童（特別是新生兒）免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，所以免疫功能相對來說較差，使得小兒更容易受CNS等條件致病菌的侵襲[3]。另外由于侵入性診療技術(shù)的提高以及新的高效廣譜抗菌藥物在兒科臨床中的廣泛應(yīng)用，也增加了CNS感染的機會。

國內(nèi)外有關(guān)CNS的耐藥研究很多，有報道CNS對青霉素、紅霉素等抗生素高度耐藥[4]。從表2結(jié)果顯示：三種主要CNS對青霉素、紅霉素的耐藥率均超過74.00%，表明作為治療小兒CNS感染的首選藥物來說，以上的藥物都已不適宜。對復(fù)方新諾明、四環(huán)素、氯潔霉素的耐藥率較高，由于四環(huán)素類藥物可導(dǎo)致牙齒黃染及牙釉質(zhì)發(fā)育不良，不可用于8歲以下小兒，故臨床治療時醫(yī)師應(yīng)根據(jù)具體的藥敏結(jié)果選擇使用復(fù)方新諾明及克林霉素。對利福平敏感性高，但利福平其屬于抗結(jié)核藥，易產(chǎn)生耐藥性，也不宜使用。對其他幾種抗菌藥物也呈不同程度耐藥。喹努普汀/達福普汀是鏈陽霉素類的復(fù)合制劑，本資料顯示，共出現(xiàn)5株喹努普汀/達福普汀耐藥株，其耐藥率＜1%，由于FDA已批準(zhǔn)可將鏈陽霉素類抗菌藥物用于CNS感染，因此可將其用于CNS感染的治療。

目前，CNS作為一種常見的條件致病菌，可產(chǎn)生較強的致病性和耐藥性。而MRCNS檢出率的不斷增加也會導(dǎo)致耐藥水平的整體增高，是臨床醫(yī)師對兒童感染治療選擇抗生素比較棘手的耐藥菌之一，由其導(dǎo)致的全身性嚴(yán)重感染已引起高度重視。本研究共檢出MRCNS 672株，檢出率為80.10%，與文獻[5-7]的報道一致，應(yīng)引起臨床關(guān)注。居前三位的CNS中，溶血葡萄球菌的檢出率最高，達94.77%，與翁學(xué)軍[4]吳健寧[8]報道相近。不僅如此，溶血葡萄球菌還存在著嚴(yán)重的多重耐藥性，對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類及磺胺類的耐藥率均超過50.00%，應(yīng)引起重視。萬古霉素是糖肽類抗菌藥物，故其抗菌作用強的原因是對細菌的細胞壁合成、細胞膜通透性及蛋白質(zhì)合成均有抑制作用，本研究發(fā)現(xiàn)表皮及人葡各有2株萬古霉素耐藥株，應(yīng)引起重視。未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥的溶血葡萄球菌，但據(jù)報道，已發(fā)現(xiàn)溶血葡萄球菌出現(xiàn)萬古霉素耐藥株[9]，萬古霉素可作為兒童革蘭陽性菌重癥感染的主要選擇藥物，也被國內(nèi)外視為治療MRCNS感染的首選藥物，但萬古霉素具有耳毒性和腎毒性，臨床應(yīng)用一定要嚴(yán)格掌握萬古霉素的應(yīng)用指征，根據(jù)萬古霉素藥敏試驗結(jié)果慎重選擇。利奈唑胺是近幾年出現(xiàn)的唑烷酮類抗生素，由于其對革蘭陽性球菌有強大的抑菌作用，在體外不易誘導(dǎo)細菌耐藥性的產(chǎn)生，因此也可以做為MRCNS感染的一線用藥[10]。

由于抗菌藥物的廣泛使用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，細菌耐藥機制日益復(fù)雜，特別是MRCNS的危害性及小兒的特殊性，且不同地區(qū)，不同醫(yī)院細菌的流行情況不同，耐藥譜也存在一定差異，因此，我們應(yīng)重視病原學(xué)檢測，動態(tài)監(jiān)測病原菌的變遷，及時掌握本地區(qū)、本醫(yī)院CNS感染的分布特點及耐藥性變化，在細菌培養(yǎng)藥敏結(jié)果出來之前，臨床醫(yī)師可根據(jù)本院耐藥監(jiān)測情況，經(jīng)驗性選擇抗生素，嚴(yán)格掌握抗生素使用適應(yīng)證及療程，但是一旦得到藥敏結(jié)果，則應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果選擇符合兒童特點的抗菌藥物進行治療，這樣既可避免抗生素的濫用，又能減小耐藥菌株的產(chǎn)生，真正做到合理應(yīng)用抗菌藥物。

[1] 胡紅兵,楊勞榮,夏維,等.CNS致新生兒敗血癥的病原學(xué)及體外耐藥監(jiān)測[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2006,16(2):227-228.

[2] 劉芳,虞濤,鮑連生,等.兒童血培養(yǎng)中凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(2):416-417.

[3] 吳躍平,章文,陳運生,等.兒童血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2006,16(4):463-465.

[4] 翁學(xué)軍.兒童凝固酶陰性葡萄球菌感染菌種分布及耐藥監(jiān)測[J].中國小兒急救醫(yī)學(xué),2012,19(2):168-169.

[5] 陳紅霞,王貞斐.兒童血液CNS感染情況及耐藥性分析.中國微生態(tài)雜志,2008,20(5):492-493.

[6] 張申,沈波,王春新.新生兒CNS敗血癥病原菌分布及耐藥性分析。臨床兒科雜志,2009,27(11):1061-1063.

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[8] 吳健寧,黃革玲,李秀娟,等.206株CNS的臨床分布及耐藥性分析[J].中國微生態(tài)雜志,2010,22(11):1636-1638.

[9] 李勝利,張嬰元,吳菊芳,等.葡萄球菌醫(yī)院感染的調(diào)查研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,1998,8(2):651.

[10] 林東胍,王明貴,張嬰元.惡唑烷酮類抗菌藥:利奈唑胺[J].中國抗感染化療雜志,2001,(3):189.

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1671-8194（2014）34-0178-02