補(bǔ)充脫氧核苷酸對(duì)12歲以下反復(fù)呼吸道感染兒童的多中心、前瞻性、隨機(jī)開放性對(duì)照臨床研究

董 李李玉歡朱雪云李玉森

（1 福州市兒童醫(yī)院，福建 福州 350000；2 海南省人民醫(yī)院，海南 海口 570100；3 海南省兒童醫(yī)院，海南 海口 570100）

補(bǔ)充脫氧核苷酸對(duì)12歲以下反復(fù)呼吸道感染兒童的多中心、前瞻性、隨機(jī)開放性對(duì)照臨床研究

董 李1李玉歡2朱雪云2李玉森3

（1 福州市兒童醫(yī)院，福建 福州 350000；2 海南省人民醫(yī)院，海南 海口 570100；3 海南省兒童醫(yī)院，海南 海口 570100）

目的評(píng)價(jià)12歲以下的反復(fù)呼吸道感染兒童補(bǔ)充脫氧核苷酸后的有效性及安全性。方法采用前瞻性、多中心、隨機(jī)開放性對(duì)照研究方法，入組反復(fù)呼吸道感染患者兒童72對(duì)，試驗(yàn)組采用脫氧核苷酸鈉注射液[發(fā)作期10 mg/（kg·d）靜脈滴注，同時(shí)給予抗感染藥物，祛痰、鎮(zhèn)咳藥物]，穩(wěn)定期每周肌內(nèi)注射或靜脈滴注10毫克/（千克·周），連續(xù)應(yīng)用12個(gè)月，近期隨訪7～14 d評(píng)價(jià)療效，遠(yuǎn)期則隨訪1年以上評(píng)價(jià)患兒預(yù)后情況及發(fā)生的不良事件。結(jié)果近期研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組急性癥狀持續(xù)時(shí)間(5.24±1.45)vs(7.21±1.73)，抗感染藥物使用時(shí)間(4.57±1.28)vs(6.23±1.19)，住院時(shí)間(4.69±1.21)vs(6.43±1.35)，完全好轉(zhuǎn)時(shí)間(7.14±1.28)vs(9.41±1.43)均短于對(duì)照組（P＜0.05），可能與脫氧核苷酸提高CD3+(58.9±9.8）vs（52.8±7.01)，(47.9±6.7) vs（36.8±6.8)水平有關(guān)，另外試驗(yàn)組近期有效率痊愈率高于對(duì)照組(29.2%vs18.0%)。長(zhǎng)期應(yīng)用，脫氧核苷酸可減少平均急性發(fā)作次數(shù)(2.4±0.4)vs(4.9±2.1)。脫氧核苷酸不良反應(yīng)為輕微發(fā)熱，發(fā)生率22.2%。結(jié)論對(duì)于反復(fù)呼吸道感染患兒，補(bǔ)充脫氧核苷酸急性期可顯著縮短患兒病程，穩(wěn)定期可減少反復(fù)發(fā)作次數(shù)。

反復(fù)呼吸道感染；脫氧核苷酸；臨床研究

文獻(xiàn)報(bào)道，微生物進(jìn)入機(jī)體的主要途徑是通過上皮表面和黏膜，超過50%的淋巴組織分布上皮和黏膜，即黏膜相關(guān)淋巴組織、免疫細(xì)胞如T細(xì)胞群、NK細(xì)胞群和吞噬細(xì)胞群，均能阻止病原微生物的入侵，并促進(jìn)一系列免疫細(xì)胞因子的釋放，減少細(xì)菌或病毒的再次感染[1]。本研究采用的脫氧核苷酸鈉注射液可以通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖，為T淋巴細(xì)胞的合成提供原料，同時(shí)促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)機(jī)體血清蛋白質(zhì)的合成，一方面促進(jìn)損傷細(xì)胞的修復(fù)，另一方面可以增加患者的抗體水平[2]，但是目前關(guān)于脫氧核苷酸是否能夠在反復(fù)呼吸道感染患兒的遠(yuǎn)期指標(biāo)中得到獲益，獲益指標(biāo)主要是什么目前尚不清楚，本研究開展此項(xiàng)前瞻性的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，試圖探究脫氧核苷酸鈉在反復(fù)的呼吸道感染患兒的臨床價(jià)值及安全性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

入選標(biāo)準(zhǔn)：6個(gè)月～12歲，性別不限；符合反復(fù)性呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)參照診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)全國(guó)1987年成都小兒呼吸道疾病會(huì)議制定的標(biāo)準(zhǔn)[3]：①0～2歲小兒每年上呼吸道感染7次，下呼吸道感染3次；②3～5歲小兒每年上呼吸道感染6次，下呼吸道感染2次；③6～14歲小兒，每年上呼吸道感染5次，下呼吸道感染2次（兩次上呼吸道感染間距時(shí)間應(yīng)＞7 d，若上呼吸道感染次數(shù)不夠，可加上下呼吸道感染次數(shù)）；④依從性好，能堅(jiān)持采用脫氧核苷酸注射液治療次數(shù)至少8次/年。排除標(biāo)準(zhǔn)：先天性呼吸道畸形病變；入選前曾應(yīng)用激素超過1個(gè)月；入選前1個(gè)月內(nèi)服用免疫激活劑（如胸腺肽制劑、微量元素制劑、泛福舒等）或免疫抑制劑（如環(huán)磷酰胺、環(huán)孢素等）；治療過程中，對(duì)照組服用了與試驗(yàn)組不一樣的藥品。或兩組服用過其他藥品，研究者認(rèn)為其可能會(huì)影響試驗(yàn)藥物的療效評(píng)價(jià)；患兒有較為嚴(yán)重的心（心功能分四級(jí)，屬3～4級(jí)者）、肝（ALT及AST超過正常值上限2倍）、腎疾病，或合并有白血病、淋巴瘤等；精神疾病患者或智力障礙患者；患者2個(gè)月內(nèi)參與了其他項(xiàng)目的研究；合并有其他疾病的患兒，研究者認(rèn)為其可能會(huì)影響到藥物的效果評(píng)價(jià)。

1.2 治療方法

納入3個(gè)研究中心的144例6個(gè)月～12歲患兒，隨機(jī)分為兩組，試驗(yàn)組72例，對(duì)照組72例，兩組患兒急性期均給予抗感染、化痰、鎮(zhèn)咳等基礎(chǔ)治療，試驗(yàn)組急性期同時(shí)給予脫氧核苷酸注射液，溶于100 mL 0.9%NS，靜脈滴注，10 mg/kg，1次/天。穩(wěn)定期給予脫氧核苷酸注射液，溶于100 mL 0.9%NS，靜脈滴注，10 mg/kg，1次/周。對(duì)照組急性期給予生理鹽水滴注，穩(wěn)定期不給予任何藥物，連續(xù)應(yīng)用12個(gè)月。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

近期隨訪14 d，觀察患兒癥狀持續(xù)時(shí)間，包括發(fā)熱、咳嗽、咯痰持續(xù)時(shí)間、抗生素或抗病毒藥使用天數(shù)、住院天數(shù)。同時(shí)在治療前及治療后3 d進(jìn)行癥狀、體征評(píng)分。①咳嗽：0分，無；1分，輕度咳嗽，不影響用餐、玩耍；2分，中度咳嗽，部分影響用餐、玩耍；3分重度咳嗽，患兒無法用餐、玩耍；②咳痰：0分，無；1分，很容易；2分，能咳出，但需要過程；3分較難咳出；③啰音：0分，無；1分，少量啰音；2分，中等量啰音；3分，大量啰音；④疼痛：0分，無；1分，輕度疼痛、咽干；2分，中度疼痛、咽干；3分，重度疼痛、咽干；⑤鼻塞流涕：0分，無；1分，輕度，有堵塞感，聲重偶有流涕；2分，中度，鼻塞時(shí)有時(shí)無，時(shí)流清涕；3分，重度，鼻塞持續(xù)不解，持續(xù)流涕；⑥頭痛：0分，無；1分，輕微頭痛；2分，中度頭痛，煩躁，時(shí)流清涕；3分，重度頭痛不能堅(jiān)持。根據(jù)病情程度：輕度0～6分，中度6～12分，重度12～18分，療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)采用積分評(píng)價(jià)，痊愈：治療前積分-治療后積分/治療前積分≥90%；顯效：治療前積分-治療后積分/治療前積分≥70%，＜90%；有效：治療前積分-治療后積分/治療前積分≥30%，＜70%；無效：治療前積分-治療后積分/治療前積分＜30%。同時(shí)于治療前后檢測(cè)患者的細(xì)胞免疫（T細(xì)胞）及體液免疫功能（抗體水平）。遠(yuǎn)期隨訪12個(gè)月，觀察年發(fā)病次數(shù)，平均呼吸道感染間隔時(shí)間。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)分析擬采用SAS統(tǒng)計(jì)分析軟件包進(jìn)行分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)取0.05，即P＜0.05將被認(rèn)為所檢驗(yàn)的差別有統(tǒng)計(jì)意義。不同治療組的計(jì)量資料將采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，與入組時(shí)的基礎(chǔ)值進(jìn)行比較，采用配對(duì)t檢驗(yàn)比較組內(nèi)前后差異。兩組治療前后的變化采用方差分析（ANOVA）和Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行比較。不同治療組的計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)（構(gòu)成比）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。兩組治療前后的變化采用χ2檢驗(yàn)或非參數(shù)檢驗(yàn)。安全性分析：采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法等比較兩組不良事件發(fā)生率，并列表描述本次試驗(yàn)所發(fā)生的不良事件；實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果在試驗(yàn)前后正常/異常的變化情況以及發(fā)生異常改變時(shí)與試驗(yàn)藥物的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1 臨床基線

試驗(yàn)組脫落17例，對(duì)照組脫落13例，均為失訪人群。兩組患者年齡、性別構(gòu)成、病情嚴(yán)重程度均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。兩組病例基本情況比較見表1。

表1 兩組病例基本情況比較

2.2 近期癥狀持續(xù)時(shí)間

試驗(yàn)組急性癥狀持續(xù)時(shí)間(5.24±1.45) vs （7.21±1.73)，抗感染藥物使用時(shí)間(4.57±1.28) vs （6.23±1.19)，住院時(shí)間(4.69±1.21) vs（6.43±1.35)，完全好轉(zhuǎn)時(shí)間(7.14±1.28) vs （9.41±1.43)均短于對(duì)照組，并具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組病例近期癥狀持續(xù)時(shí)間比較

2.3 近期有效率

試驗(yàn)組痊愈率高于對(duì)照組(29.2% vs 18.0%)，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），顯效率(47.2% vs 50.0%)、有效率（13.8% vs 15.2%），兩組比較均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見表3。

表3 兩組病例近期有效率比較

2.4 免疫功能

表4 兩組病例免疫功能比較

2.5 遠(yuǎn)期療效

試驗(yàn)組年平均急性發(fā)作次數(shù)(2.4±0.4) vs (4.9±2.1)，年平均抗生素使用天數(shù)(11.9±4.2) vs (32.9±9.4)，年平均住院時(shí)間(14.8±8.2) vs (15.6±11.2)兩組比較均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），年平均感染間隔時(shí)間顯著長(zhǎng)于對(duì)照組（152.8±32.8） vs (78.6±28.2），并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。見表5。

表5 兩組病例遠(yuǎn)期療效比較

2.6 不良事件

試驗(yàn)組因注射脫氧核苷酸發(fā)熱患兒16例，占22.2%，對(duì)照組無因注射藥物所致的發(fā)熱事件。發(fā)熱一般均為低熱，均低于38 ℃，無1例采用非甾體抗炎藥物處理。另外試驗(yàn)組有1例患兒發(fā)生輕微皮疹。其余未見其他明顯不良事件發(fā)生。且患兒隨著注射事件延遲，發(fā)熱的患兒一般在第3、4次注射，即未見發(fā)熱不良事件。

3 討 論

脫氧核苷酸鈉注射液是以生物技術(shù)提取的脫氧核糖核酸為原料，經(jīng)多種生物酶作用形成，富含腺嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸等4種核苷酸成分，參與體內(nèi)核酸代謝過程，具有促進(jìn)DNA合成，促進(jìn)受損肝細(xì)胞再生、改善肝功能，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等藥理作用，已成為核酸代謝療法的臨床代表用藥。核酸是生命的本源，是一切生物細(xì)胞的基本成分或核心物質(zhì)，也是調(diào)節(jié)生命現(xiàn)象的重要物質(zhì)，它控制著蛋白質(zhì)的合成，因此當(dāng)機(jī)體核苷酸不足，將影響蛋白質(zhì)的合成，從而會(huì)使細(xì)胞分裂緩慢，細(xì)胞缺陷[4]。細(xì)胞分裂減慢導(dǎo)致人體衰老出現(xiàn)功能性退化等疾病，而細(xì)胞缺陷則會(huì)引起機(jī)體損傷、病變，甚至死亡[5]。基礎(chǔ)研究顯示，脫氧核苷酸鈉主要具有以下藥理作用[6]：①增加機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)，尤其是對(duì)肝細(xì)胞或炎癥損傷型細(xì)胞的修復(fù)，增加細(xì)胞的DNA合成，RNA轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)細(xì)胞膜的再生成，對(duì)于潰瘍性損傷，神經(jīng)細(xì)胞的修復(fù)、退行性疾病的預(yù)防有較好臨床療效[7]。②激活人體的免疫功能[2]，將脫氧核苷酸鈉注射液腹腔注射100 mg/d于beagle犬，連續(xù)注射7 d，結(jié)果顯示犬血清的，細(xì)胞較注射前有顯著增加，另外IgM，IgG水平亦有明顯的增高。Caramori[8]通過活檢7歲以下的患兒氣道黏膜，顯示患兒的呼吸道黏膜中免疫細(xì)胞水平、抗體水平均顯著低于正常兒童，然而，血檢結(jié)果顯示免疫細(xì)胞水平卻并不低于正常患兒，上述研究，在臨床非常常見，因此常常患兒的免疫功能低下常常受到忽略。本研究采用的脫氧核苷酸鈉注射液可以通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖，為T淋巴細(xì)胞的合成提供原料，同時(shí)促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)機(jī)體血清蛋白質(zhì)的合成，一方面促進(jìn)損傷細(xì)胞的修復(fù)，另一方面可以增加患者的抗體水平。抵抗微生物的入侵，因此具有減少反復(fù)呼吸道感染發(fā)作的作用。本研究采用DNA治療后，急性期可縮短發(fā)熱、咳嗽、咯痰癥狀持續(xù)時(shí)間明顯縮短，住院時(shí)間進(jìn)一步縮短。穩(wěn)定期可減少感染發(fā)作次數(shù)，應(yīng)用過程未見明顯不良事件。因此臨床上補(bǔ)充脫氧核苷酸對(duì)免疫功能下降的患兒具有較高的臨床價(jià)值，且安全性較高，可以作為預(yù)防兒童反復(fù)發(fā)作的常規(guī)的藥物。

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Sodium Deoxyribonucleotide Intervention in Repeated Respiratory Infection of Children under 12——A Multi-centric, Randomized Clinical Trial

DONG Li1, LI Yu-huan2, ZHU Xue-yun2, LI Yu-sen3
(1 Fuzhou Children's Hospital, Fuzhou 350000, China; 2 Hainan Provincial People's Hospital, Haikou 570100, Chian; 3 Children's Hospital of Hainan Province, Haikou 570100, China)

ObjectiveTo evaluate the efficacy and safety of deoxyribonucleotide in intervention with repeated respiratory infection of children under 12.MethodsA prospective, multicenter, randomized open-control study was conducted. 144 patients with repeated respiratory infection were included. The experiment group (n=72) were received conventional therapy and deoxyribonucleotide 10 mg/(kg·d) in acute period, and weekly 10 mg/kg for 12 months. The control group (n=72) were received conventional therapy only.ResultsTimes of duration of symptoms(5.24±1.45)vs(7.21±1.73), hospital time (4.69±1.21)vs(6.43±1.35), antibiotic application time(4.57±1.28)vs(6.23±1.19) were shorter than the control group. And it may be related with that the deoxyribonucleotide improve the immune function. And the recovery rate of the experiment group was superior to the control group (29.2% vs 18.0%). There is no obvious adverse effect in the course of treatment.Deoxyribonucleotide can decrease acute attack times (2.4±0.4)vs(4.9±2.1), when long-time application.ConclusionFor children with recurrent respiratory tract infection, acute phase complementary deoxynucleotide children can significantly shorten the course, stable can reduce recurrent episodes.

Recurrent respiratory tract infections; Deoxynucleotides; Clinical research

R725.6

B

1671-8194（2014）23-0060-03