BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌中的表達(dá)關(guān)聯(lián)研究

王 嵬陳 曲哈敏文*

（1 遼寧錦州市中心醫(yī)院，遼寧 錦州 121000；2 遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，遼寧 錦州 121000）

BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌中的表達(dá)關(guān)聯(lián)研究

王 嵬1陳 曲1哈敏文2*

（1 遼寧錦州市中心醫(yī)院，遼寧 錦州 121000；2 遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，遼寧 錦州 121000）

目的檢測BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）中的表達(dá)情況，分析二者之間的關(guān)聯(lián)。方法采用免疫組化方法檢測72例三陰性乳腺癌患者術(shù)后惡性組織，癌旁正常組織及乳腺良性病變組織BRCA-1、BAG-1蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果在三陰性乳腺癌中BRCA-1的陽性表達(dá)率為76.4%，均高于乳腺良性病變及癌旁正常組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。BAG-1陽性表達(dá)率為69.4%，均高于乳腺良性病變及癌旁正常組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。BRCA-1與BAG-1蛋白的表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.845，P=0.001）。結(jié)論三陰性乳腺癌中BRCA-1、BAG-1蛋白表達(dá)上調(diào)，參與TNBC發(fā)生、發(fā)展過程，可能成為評估TNBC預(yù)后的潛在敏感指標(biāo)。

BRCA-1；BAG-1；三陰性乳腺癌；表達(dá)

乳腺癌是一種個體差異較大的異質(zhì)性惡性腫瘤。BRCA-1基因是一種抑癌基因。大多數(shù)TNBC存在BRCA-1基因突變。BRCA基因突變在散發(fā)乳腺癌患者中罕見[1-2]，然而，最近的研究表明相關(guān)DNA修復(fù)基因的表達(dá)或功能的變化對散發(fā)乳腺癌的發(fā)生也起到重要作用[3]。BAG-1基因是一種抗凋亡基因，有學(xué)者用免疫組化方法檢測BAG-1在乳腺癌中的表達(dá)，結(jié)果顯示約有2/3或更多的病例可檢測到BAG-1的高表達(dá)。本實驗通過檢測BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌中的表達(dá)，并進(jìn)行二者相關(guān)性研究，探索二者之間的關(guān)聯(lián)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2004年1月至2010年12月在錦州市中心醫(yī)院普外科手術(shù)治療明確診斷為乳腺癌，免疫組化證實ER（-）、PR（-）、HER-2（-）的患者共72例，均為女性，中位年齡47歲；其中Ⅰ期10例、Ⅱ期36例、Ⅲ/Ⅳ期26例。所有患者術(shù)前未接受過任何治療。隨機(jī)選取上述病例癌旁正常乳腺組織30例（正常組織取自距癌組織邊緣≥5 cm處）、乳腺良性病變25例作為對照。

1.2 方法

①免疫組化方法：所有標(biāo)本經(jīng)10%的福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚度切片。所有病例均按照WHO標(biāo)準(zhǔn)確定病理診斷。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測，實驗步驟嚴(yán)格按說明書來進(jìn)行，以PBS代替一抗作為陰性對照，BRCA-1、BAG-1用已知的陽性切片作為陽性對照。②結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，陽性表達(dá)判斷：BRCA-1陽性表達(dá)為細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)均有棕黃色或棕褐色細(xì)顆粒沉著，BAG-1陽性表達(dá)為細(xì)胞核和（或）細(xì)胞質(zhì)有棕黃色或棕褐色細(xì)顆粒沉著。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計學(xué)處理，不同組間表達(dá)率比較采用卡方檢驗和Fisher精確概率法，Spearman相關(guān)分析BRCA-1與BAG-1的相關(guān)性，組間差異采用log-rank方法，均采用雙側(cè)檢驗，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 BRCA-1、BAG-1在不同乳腺組織中的表達(dá)

見表1所示。BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌組織中的表達(dá)率分別為76.4%、69.4%，高于乳腺良性病變組織和癌旁正常乳腺組織中的表達(dá)。各組之間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 BRCA-1與BAG-1在不同乳腺組織中的表達(dá)

2.2 BRCA-1、BAG-1在三陰性乳腺癌中表達(dá)的相關(guān)性

采用Spearman秩相關(guān)檢驗分析三陰性乳腺癌組織中BRCA-1與BAG-1蛋白表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果表明二者表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.845，P=0.001）。

3 討 論

BRCA基因是一種抑癌基因，與乳腺癌、肺癌等多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)。BRCA基因的產(chǎn)物發(fā)揮多種作用，參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)，促進(jìn)細(xì)胞分化、誘導(dǎo)凋亡，參與細(xì)胞DNA損傷修復(fù)，抑制細(xì)胞的增殖。缺乏功能性BRCA-1或BRCA-2的細(xì)胞不能對DNA雙鏈斷裂進(jìn)行修復(fù)，這可能是遺傳缺陷的機(jī)制之一[4]。在BRCA突變的乳腺癌患者中，多數(shù)為三陰性乳腺癌[5]，正常細(xì)胞DNA受損后可通過多種途徑激活DNA修復(fù)相關(guān)的BRCA-1從而調(diào)控DNA修復(fù)過程。當(dāng)BRCA-1發(fā)生突變則不能對DNA雙鏈斷裂進(jìn)行修復(fù)，這是三陰性乳腺癌的發(fā)病機(jī)制之一[6]。本研究顯示，BRCA-1在三陰性乳腺癌組織中的表達(dá)率為76.4%，明顯高于正常乳腺組織和乳腺良性病變組織中的表達(dá)（P＜0.01）。

BAG-1基因位于9p12號染色體，全稱為Bcl-2結(jié)合抗凋亡基因，是1995年Takayama等[6]在對人淋巴細(xì)胞株Jurkat篩檢與Bcl-2蛋白相結(jié)合的蛋白時發(fā)現(xiàn)的。已有多項研究證明，BAG-1基因在乳腺癌、肺癌、大腸癌、前列腺癌等惡性腫瘤中高表達(dá)，而在正常組織中低表達(dá)或不表達(dá)。Townsend等[7-8]應(yīng)用免疫組化法檢測BAG-1蛋白的表達(dá)，研究結(jié)果顯示BAG-1在大部分乳腺癌中陽性表達(dá)，本研究顯示，BAG-1蛋白在TNBC組織中的陽性表達(dá)率為69.4%，顯著高于乳腺良性病變組織及癌旁正常乳腺組織的表達(dá)（P＜0.01），提示BAG-1在三陰性乳腺癌中的發(fā)生發(fā)展過程中起作用，可能作為早診指標(biāo)。

在本研究中，分析BRCA-1與BAG-1的相關(guān)性，結(jié)果表明二者表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.845，P=0.001）。

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R737.9

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1671-8194（2014）22-0252-02

*通訊作者：E-mail：hamw2002@126.com