育齡婦女紅細胞葉酸水平的檢測分析

馮月華 吳小璐 梁法亮

（江門市婦幼保健院，廣東 江門 529000）

育齡婦女紅細胞葉酸水平的檢測分析

馮月華 吳小璐 梁法亮

（江門市婦幼保健院，廣東 江門 529000）

目的檢測本地區育齡婦女紅細胞葉酸水平，分析其影響因素，為本地區制定育齡及孕期婦女增補葉酸預防NTDs的方案提供依據。方法募集53例健康育齡婦女志愿者，抽取靜脈血4 mL，化學發光免疫分析儀檢測紅細胞葉酸水平。結果53例育齡婦女的平均紅細胞葉酸水平為（788.6±204.0）nmol/L，有32例濃度低于預防NTDs的最低水平906 nmol/L，占總例數的60.4%。文化程度高者，其濃度低于預防NTDs的最低水平的人群比例漸降。結論本地區育齡婦女紅細胞葉酸水平大多低于預防NTDs的最低水平，應加強對孕前增補葉酸相關知識的宣教。

葉酸；育齡婦女；紅細胞葉酸水平；神經管畸形

葉酸是一種廣泛存在于綠色蔬菜中的水溶性B族維生素，對細胞的分裂生長及核酸、氨基酸、蛋白質的合成起著重要的作用[1]。胎兒神經管畸形（neural tube defects，NTDs）是一組嚴重影響胎兒大腦和脊髓發育的先天畸性，可能的病因主要包括葉酸缺乏、葉酸代謝路徑發生異常等[2]。研究表明，育齡婦女孕前增補葉酸對NTDs具有很好的預防作用[3，4]。但葉酸水平的個體差異大，各地婦女紅細胞葉酸水平現狀不一。本文通過檢測本地區53例育齡婦女的紅細胞葉酸水平，觀察其低于預防NTDs最低水平（906 nmol/L）的人群比例，分析影響個體紅細胞葉酸水平的因素，為江門地區育齡婦女葉酸水平調查，以及制定育齡及孕期婦女增補葉酸預防NTDs等出生缺陷的方案提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

募集53例健康育齡婦女志愿者，納入標準為：①于江門地區工作生活達2年或以上；②年齡20～35歲；③體質量40～62 kg；④無吸煙、酗酒史；⑤無服食精神類藥物史；⑥無慢性肝、腎疾病及血液病等；⑦治療期間保證不服食其他藥物。對研究對象的資料保密，并簽署書面知情同意書。

1.2 檢測方法

①儀器與試劑：DPC Immulite 2000全自動化學發光免疫分析儀（德國Siemens），全自動血細胞分析儀（法國Horiba ABX），葉酸測定試劑盒（化學發光法，包括檢測試劑、葉酸定標品、沖洗緩沖液、紅細胞緩沖液、底物和質控品）（美國Beckman）。②樣品收集與處理：使用肝素抗凝真空管采集空腹靜脈血4 mL，溶血前取適量于全自動血細胞分析儀檢測紅細胞比容（HCT/%）并記錄。全血樣本溶血檢測前可于2～8 ℃最多保存4 h。將紅細胞葉酸溶血劑用25 mL去離子水復溶，放置至少40 min，直到完全溶解。慢慢的顛倒混勻全血標本數次以確定完全混勻后，吸取50 μL全血加入到1 mL溶血劑中進行溶血。慢慢的顛倒混勻數次并在室溫下避光保存至少90 min以使其穩定，此溶血液可在3 h內使用全自動化學發光免疫分析儀檢測葉酸含量或在-20 ℃下保存30 d。③檢測方法：準備葉酸定標品S0、S1、S2、S3、S4和S5，濃度分別約為0、2.3、5.7、11.3、22.7和45.3 nmol/L，根據說明書進行設置定標、定標要求的輸入和回顧定標數據等內容，檢測各定標品的光量子值，根據光量子值和已知濃度之間的數學關系建立定標曲線。葉酸檢測試劑于2～10 ℃下保存2 h后才置于儀器使用，每個血液樣品設置3個復孔，根據儀器操作指南設置參數，檢測各樣品孔的光量子值，并根據存儲的定標曲線自動計算葉酸含量。

表1 不同年齡組育齡婦女紅細胞葉酸水平

表2 不同居住地育齡婦女紅細胞葉酸水平

表3 不同文化程度育齡婦女紅細胞葉酸水平

紅細胞葉酸含量（RBC Folate/nmol/L）：檢測結果乘以溶血液制備時的稀釋倍數21，將此結果除以該樣品的紅細胞比容。

1.3 統計學方法

用SPSS13.0統計軟件進行統計學的分析；計量資料用均值±標準差（xˉ±s）表示，組間比較用t檢驗，數據處理前經正態性檢驗及方差齊性檢驗，顯著性水平定為雙側P ＜ 0.05。

2 結 果

2.1 不同年齡組育齡婦女紅細胞葉酸水平

53例育齡婦女中，年齡組20～30歲有34例，年齡超過30歲的有19例，兩年齡組的紅細胞葉酸含量相比沒有顯著性差異。年齡組20～30歲的34例中，有21例濃度低于預防胎兒神經管畸形的最低水平906 nmol/L，比例為61.8%。年齡超過30歲的19例中，有11例濃度低于906 nmol/L，比例為57.9%。見表1。

2.2 不同居住地育齡婦女紅細胞葉酸水平

53例育齡婦女中，20例居住地為農村，33例居住地為城市，兩組的紅細胞葉酸含量相比沒有顯著性差異。但農村組中紅細胞葉酸含量低于906 nmol/L的有13例，比例為65.0%，明顯高于城市組的57.6%。見表2。

2.3 不同文化程度育齡婦女紅細胞葉酸水平

文化程度在初中及以下的育齡婦女有12例，高中組的有20例，兩組的紅細胞葉酸含量沒有顯著性差異，大專及以上組的平均紅細胞葉酸含量比前兩組高，具有顯著性差異（P＜0.05）。三組中紅細胞葉酸含量低于906 nmol/L的比例分別為66.7%、60.0%和57.1%，文化程度高者，其比例漸降。見表3。

3 討 論

我市出生缺陷發生率近幾年也居高不下，據市新篩中心對新生嬰兒的篩查，我市2007年的出生缺陷發生率為111.6/萬，2008年為112.6/萬，2009年為143.2/萬。因此，實施出生缺陷“三級干預措施”，加強葉酸增補預防NTDs的宣教，將優生知識普及到基層迫在眉睫。

本研究53例育齡婦女的平均紅細胞葉酸水平為（788.6± 204.0）nmol/L，有32例濃度低于預防NTDs的最低水平906 nmol/L，占總例數的60.4%。不同年齡組和不同居住地組的紅細胞葉酸水平沒有明顯差異，但30歲以上者和居住在城市的育齡婦女中濃度低于預防NTDs的最低水平的比例相對較低，這一方面可能是由于本研究中的19例30歲以上者和33例居住于城市的多為學歷較高，對增補葉酸的認知程度深；另一方面可能是膳食結構、生活習慣以及對保健知識的認知程度等的不同而導致。文化程度越高，紅細胞葉酸水平越高，濃度達到906 nmol/L的比例數也越高，其中農村育齡婦女的文化程度較低者居多，主要原因可能是不同文化程度婦女的保健知識水平、來源途徑不同，從而對葉酸知識的掌握程度不同。此外，本文所檢測的例數較少，難以形成大樣本的統計數據以作影響因素分析，后續研究中可考慮抽區江門市三區四轄市的育齡及孕期婦女做研究樣本，對其紅細胞葉酸水平以及增補葉酸預防胎兒NTDs的知曉率以及態度、行為的基礎數據進行收集統計，為實施增補葉酸預防NTDs的干預措施提供科學依據，指導增補葉酸預防NTDs的方案制定。

食物中葉酸分布廣泛，以肝臟、綠葉蔬菜、豆類及水果含量最豐富，但葉酸極易被光、熱破壞，在食物貯存加工過程中損失率達80%，且生物利用率僅為45%左右，因此烹調不當、貯存損失等會導致葉酸利用率低[5]。我國于2009年發布的《增補葉酸預防神經管缺陷項目管理方案》中提出，一般待孕婦女從懷孕前3個月至懷孕后3個月以0.4 mg/d的劑量增補葉酸。因此，育齡婦女在計劃懷孕時，除了日常生活注重膳食結構外，還須通過口服葉酸制劑，體內的紅細胞葉酸水平才可達到預防NTDs的最低水平。

[1] Czeizel AE,Dudas I,Vereczkey A,et al.Folate deficiency and folic acid supplementation: the prevention of neural-tube defects and congenital heart defects[J].Nutrients,2013,5(11):4760-4775.

[2] 譚春英,王燕,楚嚴,等.孕婦紅細胞葉酸水平與胎兒出生缺陷發病關系的研究[J].中國優生與遺傳雜志,2011,19(8):81-83.

[3] 王珊,潘新娟,余增麗.妊早期婦女血清葉酸水平與胎兒出生缺陷發病關系的隊列研究[J].中國婦幼保健,2012,27(33):5266-5268.

[4] 沈佩芳,胡惠敏.葉酸預防胎兒神經管缺陷的效果觀察[J].中國藥業,2011,20(11): 67-68.

[5] Osterhues A,Ali NS,Michels KB.The role of folic acid fortif i cation in neural tube defects: a review[J].Crit Rev Food Sci Nutr,2013,53(11): 1180-1190.

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1671-8194（2014）21-0194-03