食管癌患者XRCC1蛋白的表達與臨床因素的相關性研究

【摘要】目的研究食管癌組織，Barrett食管組織和正常食管黏膜中DNA修復酶XRCCI的表達及其意義。方法用免疫組化法檢測食管癌組織、Barrett食管與正常食管上皮中XRCCl蛋白表達情況并且分析它們與食管癌臨床病理參數的關系。結果食管癌組XRCCl蛋白的陽性表達率為89.2%明顯高于Barrett食管組的59.1%與正常食管組織的57.1%（P<0.05）。XRCCI的表達與性別，年齡，食管癌的分期，分化程度，浸潤深度，腫瘤部位、分型及有無淋巴結轉移均無關。結論XRCCl基因在食管癌發生過程中可能起重要作用。

【關鍵詞】XRCC1；食管癌；單核苷酸多態性

我國豫北地區是世界上食管癌發病率和死亡率最高的地區之一。研究提示，該地區人群食管癌的發生是環境和遺傳因素共同作用的結果。但值得注意的是同一地區暴露于相似環境的人群中卻只有少數人發病，提示個人的遺傳因素可能在食管癌發生中起重要作用。食管癌細胞中有許多染色體改變和癌基因及抑癌基因突變，說明致癌因素引起DNA損傷是食管癌發生和發展的重要環節，同時也提示DNA修復能力差異可能是導致個體對食管癌易感性不同的原因。我們采用免疫組化SP法檢測食管癌組織，Barrett食管組織和正常食管黏膜中XRCCI的表達，旨在探討其表達的臨床意義，從而為食管癌的診治提供新的理論基礎。

1資料與方法

1.1研究對象采用頻數匹配病例對照研究設計：從新鄉醫院三附院病收集2009年1月至2010年10月的食管癌鱗癌手切除標本202例，液氮保存。所有食管癌標本均由2名病理學家進行組織學觀察和復診。同期收集來醫院體檢健康人群靜血樣317例作為對照組，-80℃保存。病例和對照均為來自豫北地區漢族居民，并按性別和年齡（±5歲）進行頻數配對。

1.2試劑XRCCl鼠抗人單克隆抗體來自美國Neo-Marks公司，工作濃度均為1：200。兔多抗及免疫組化SP試劑盒來自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3方法用免疫組化SP法進行免疫組化染色。染色步驟按說明書進行，采用微波抗原修復，一抗4。C過夜，DAB顯色，蘇木素復染。用已知陽性切片作陽性對照，PBS代替第一抗體作陰性對照。

1.4結果判定XRCCI以細胞核和/或胞漿出現棕黃色細顆粒為陽性細胞，任取5個高倍視野，按染色強度計分：0分為無色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色；按細胞所占百分比計分：1分為陽性細胞數不足10%，2分為Il%一50%，3分為5l%一75%，4分為大于75%，染色強度與陽性細胞所占百分比計分乘積≥3分為陽性，否則為陰性。

I.5統計學分析所有數據采用SPSS13.0統計軟件處理，采用x2檢驗分析。

2結果

2.1XRCCI在食管癌組織、Barrett食管與正常食管黏膜上皮中的表達食管癌組XRCCl蛋白的陽性表達率為89.2%明顯高于Barrett食管組的59.1%與正常食管組織的57.1%（P=0.002）。后兩者間差別無統計學意義（P>0.05）。

2.2食管癌XRCCI的表達及其與臨床病理特征之間的關系XRCCI蛋白的表達與性別，年齡，食管癌的分期，分化程度，浸潤深度，腫瘤部位，腫瘤分型及有無淋巴結轉移均無關。

3討論

XRCCl蛋白分子是堿基切除修復途徑的重要組成成分。目前對XRCCl基因的研究主要從兩個方面進行：一方面是基因的多態性與腫瘤易感性之間的關系；另一方面是基因改變與腫瘤發生之間的關系。XRCCl基因單核苷酸多態性（single nucleotide polymorphism SNP）與腫瘤的易感性可能有關。Ladiges等研究認為XRCCI單核苷酸（Ar9194Trp和Ar9399Gln）的多態性與年齡相關性疾病，特別是腫瘤有關。

同一基因內或與其它變異等位基因結合的單體型分析表明：XRCCl與肺癌、乳腺癌、食管癌、前列腺癌、白血病和胃癌發生風險相關聯。本實驗研究了XRCCI蛋白在食管癌組織，Barrett食管組織和正常食管黏膜中的表達情況，發現XRCCl在食管癌中出現高表達。我們可以推測食管癌組織腫瘤細胞非常不穩定，于生長的過程中，會出現大量的由于癌組織中產生某種物質，阻斷了DNA修復酶修復DNA損傷的途徑，從而使得DNA修復酶在腫瘤細胞中蓄積。這些有待于進一步研究。

許多證據表明腫瘤的發生與細胞能力下降有密切關系。多數正常哺乳動物細胞XRCCl皆是低水平表達，突變的或過高表達的XRCCI可能干擾正常的修復途徑，可導致基因組不穩定性增加和增變基因表型，從而使修復能力降低。同時也有研究認為XRCCl單核昔酸多態引起的DNA修復活性降低，可能在某些癌癥包括食管癌的病因學中起一定的作用。同時本研究也顯示了XRCCI的表達與性別，年齡，食管癌的分期，分化程度及有無淋巴結轉移等無關。這可能提示此修復基因只參與腫瘤的發生，而與腫瘤的生長轉移無關。

參考文獻

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