【摘要】目的比較顯色培養基與傳統培養基在金黃色葡萄球菌(以下簡稱金葡菌)中的檢出率。方法對245份食品樣品,采用同樣的增菌方法,每份樣品分別接種同樣數量的顯色平板,傳統培養基(指Baird-parker以下簡稱B-P平板、血平板),觀察溶血情況,挑取疑似金葡菌菌落轉種BH肉湯和營養瓊脂小斜面,再進一步做血漿凝固酶試驗。結果245份食品樣品中,顯色平板的金葡菌檢出率是0.82%(2/245),B-P平板和血平板的金葡菌檢出率均是8.57%(21/245),并且在顯色平板上生長的金葡菌,在B-P平板和血平板上均能生長。結論在金葡菌的培養與離中,傳統培養基(B-P平板、血平板)的檢出率明顯高于顯色平板。
【關鍵詞】顯色培養基;傳統培養基;金黃色葡萄球菌;檢出率
顯色培養基(chromogenic media)是一類利用微生物自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應顯色的原理來檢測微生物的培養基,這些相應的顯色底物是由產色基因顯示一定的顏色,直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。近幾年來發展迅速,應用廣泛,在中華人民共和國國家標準GB4789的食品微生物檢驗標準中,常見的食源性致病菌檢測如沙門氏菌、志賀氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、阪崎腸桿菌等,均將相應的顯色培養基列入國家食品安全標準檢驗方法。但是金葡菌國家食品安全標準檢驗方法,只將傳統培養基列入,而沒有將顯色培養基列入。為了解顯色培養基與傳統培養基在金葡菌檢驗中檢出率,我們于2013年進行了比較與分析,現報告如下:
1資料與方法
1.1樣品共計245份,包括甜品35份,乳制品23份,熟肉制品77份,盒飯70份,嬰幼兒食品30份,直飲水10份。
1.2主要儀器恒溫培養箱(上海實驗儀器公司);高速分散均質機(上海模型廠)。
1.3顯色培養基(國產)血平板(鄭州安圖生物公司);7.5%Nacl肉湯、B-P培養基、營養瓊脂、BHI肉湯、凍干血漿均由北京陸橋技術有限公司生產。
1.4金葡菌標準菌株,菌株號ATcc25923。
1.5檢驗方法取均質的樣品接種7.5%Nacl(肉湯中36℃±1℃培養18-24h后,每份樣品分別轉種金葡菌顯色平板、B-P平板、血平板各三個,并且每種平板接種金葡萄標準菌株作為陽性對照。經36℃±1℃培養18-24h后,挑取可疑菌落涂片染色,轉種BHI肉湯和營養瓊脂小斜面。再經36℃±1℃培養18-24h后,進行血漿凝固酶試驗,陽性報告為檢出金葡菌。
2檢驗結果
在245份食品類檢測樣品中,用顯色平板檢出2例金葡菌,檢出率是0.82%(2/245),用B-P平板和血平板均檢出21例金葡菌,檢出率是8.57%(21/245),并且在顯色平板上生長的2例金葡菌,在B-P平板和血平板上均能生長,有19份樣品,用B-P平板和血平板均能培養出金葡菌,但用顯色平板未檢出。
3討論
金葡菌既是污染食品和引起食品物中毒的主要病原菌,也是引起化膿性炎癥、敗血癥及膿毒血癥的病原菌,所以,無論是國家食品安全標準檢驗方法,還是醫院消毒衛生標準檢驗方法,以及化妝品微生物標準檢驗方法,均將金葡菌列入必檢的微生物檢驗項目中,可見,金葡菌是一個相當重要的衛生指標。傳統的金葡菌檢驗方法,是金葡菌檢驗的金標準。近幾年來,隨著顯色培養基的迅速發展,普及使用,顯色培養基極大地提高了微生物檢測的工作效率,這是其最主要的優勢,但是,并不是所有細菌的顯色培養基的靈敏度和特異性能和傳統培養基相媲美的。從這次比較的結果來看,對同一批次的樣品,在同樣增菌的條件下,用顯色培養基對金葡菌的檢出率是0.82%(2/245),用傳統培養基的檢出率是8.57%(21/245),兩種培養基的檢出率有明顯的區別,假陰性問題是金葡菌顯色培養基的主要問題,這也是食品、化妝品、醫院消毒效果監測等國家標準沒有將顯色培養基列入標準檢驗方法的重要原因。目前,微生物檢驗工作正處在傳統培養基與顯色培養基使用的交匯處,檢測人員在選擇使用何種培養基時,既要考慮工作效率,又要考慮培養基的靈敏度和準確性。
參考文獻
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