四種天然抗體在不同年齡性別正常人體的分布

摘要：目的 探討抗卵核抗體、抗卵清抗體、抗牛血清抗體和抗傷寒多糖抗體在不同年齡性別人群中的分布特點(diǎn)及與年齡性別的關(guān)系。方法 隨機(jī)挑選體檢正常人，ELISA檢測四種抗體水平。結(jié)果 抗卵核抗體（P<0.01）和抗傷寒多糖抗體（P<0.05）在不同年齡組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且在老年組中該抗體對(duì)數(shù)單位含量偏低；其余兩種抗體（P>0.05）在不同年齡組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這四種抗體在不同性別組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 抗卵核抗體和抗傷寒多糖抗體受年齡影響，其它兩種抗體未發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象。四種抗體均不受性別因素影響。

關(guān)鍵詞：天然抗體；年齡；性別；分布特點(diǎn)

大量事實(shí)表明，幾乎所有脊椎動(dòng)物體內(nèi)，在未經(jīng)任何抗原免疫的情況下，都廣泛存在針對(duì)種類繁多的自身成分的抗體，即天然抗體（natural antibody）。天然抗體以多種形式存在，已發(fā)現(xiàn)天然抗體具有三種類型，它們是IgM、IgG和IgA。胚胎及新生兒時(shí)期天然抗體以IgM為主要類型，而在成人天然抗體絕大部分屬于IgG類型[1]。天然抗體在正常人體內(nèi)普遍存在，但其在不同年齡、不同性別人群中的分布特點(diǎn)如何，目前尚無相關(guān)報(bào)道，與年齡性別因素有無關(guān)聯(lián)尚不清楚。所以我們對(duì)此試驗(yàn)，研究其在不同年齡、性別正常人群中的分布特點(diǎn)及與年齡性別的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料 從大連血液中心和大連醫(yī)科大學(xué)附屬二院體檢中心隨機(jī)挑選體檢正常人121人（男54人、女67人、平均年齡42.81歲）。分為老年組（≥70歲，男18人、女19人，平均年齡為77.68歲）與青年組（<40歲，男33人、女41人，平均年齡23.82歲）及男性組（54人，平均年齡44.83）與女性組（67人，平均年齡41.18歲）。

1.2儀器和試劑 酶標(biāo)儀，羊抗人IgG酶標(biāo)抗體、底物與顯色劑、洗滌液均購于北京生物制品研究所。

1.3方法

1.3.1四種抗原 卵黃抗原來源于市售新鮮雞蛋、卵清蛋白購于Sigma、牛血清蛋白購于Roche、傷寒O901診斷菌液購自寧波天潤生物藥業(yè)有限公司，傷寒多糖抗原的制備[2]。

1.3.2檢測方法 劉輝等[3]證實(shí)，以不同來源的雞卵核為抗原，用間接ELISA方法檢測可提取性核抗原的抗體（ENA抗體）與經(jīng)典的檢測ENA抗體的方法具有很好的一致性，可用于自身免疫病抗核抗體（ANA）的檢測，且證實(shí)不同來源的雞卵核對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無影響。用ELISA間接法[4]測定這四種天然抗體的效價(jià)水平。四種抗原包被板的制備：分別稱取或量取相應(yīng)量的上述四種抗原，分別用pH 9.6碳酸鹽緩沖液稀釋溶解。卵核抗原板的制備。卵清抗原包被液制備：稱取卵清蛋白5 mg，量取pH 9.6碳酸鹽緩沖液100 mL稀釋溶解，配制成濃度為5 mg/100 mL的卵清蛋白溶液。同理，配制濃度為25 mg/100 mL的牛血清蛋白包被液。量取傷寒O901診斷菌液5 mL，用pH 9.6碳酸鹽緩沖液100 mL稀釋，配制成1∶20的傷寒多糖菌液。用配制好的抗原包被液包被聚苯乙烯酶標(biāo)板，包被過程如同卵核抗原液包被。抗牛血清蛋白抗體的測定過程中樣品及酶標(biāo)二抗的稀釋液用30%羊奶，這樣避免或盡量減少發(fā)生交叉反應(yīng)，便于準(zhǔn)確測定待測樣品中的抗牛血清蛋白抗體。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1同一樣品在除卵核抗原板之外的其他三種抗原板上連續(xù)做16次，1次/d。用上述測定計(jì)算方法得知該樣品在這三種不同抗原板上的抗體對(duì)數(shù)單位含量，見表1。

2.2這四種抗體在不同性別組不同年齡組中的抗體對(duì)數(shù)單位含量，見表2、表3。

3討論

大量研究考證，正常機(jī)體內(nèi)普遍存在多種天然抗體。因此我們將研究它們?cè)诓煌挲g、不同性別體檢正常人群中的分布特點(diǎn)，進(jìn)而論證他們?cè)跈C(jī)體內(nèi)的含量多少是否與年齡性別有關(guān)，對(duì)其關(guān)聯(lián)程度和關(guān)聯(lián)機(jī)制深入研究。表明我們建立的方法檢測這三種相應(yīng)的抗體較一般方法穩(wěn)定性好，具有可重復(fù)性，可用于這些抗體的測定。

關(guān)于天然抗體對(duì)數(shù)單位水平與年齡性別的關(guān)系說法不一。結(jié)果還表明四種天然抗體效價(jià)水平不隨性別的改變而改變。因此可以認(rèn)為抗卵黃抗體和抗傷寒多糖抗體和年齡有關(guān)，四種抗體均與性別因素?zé)o關(guān)。臨床上許多指標(biāo)的參考值都受年齡或性別的影響，如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白量 。那么出現(xiàn)這種情況的原因和機(jī)制是什么呢？是由遺傳因素決定？還是受環(huán)境因素影響？尚需進(jìn)一步探討。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉玉峰，王剛.天然自身抗體[M].1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：3-6.

[2]王欽富，免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].1版.中國醫(yī)藥科技出版社，1995：1.

[3]Hui L，Shijun L，Yue M.ANA detected by ELISA using nucleus of egg cell as antigen[J].Immunoassay Immunochem，2008，29（2）：161-166.

[4]王蘭蘭.臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：92-93.

編輯/肖慧