高效液相色譜法測定蘆薈苷的方法

摘要：本文研究了用高效液相色譜法測定蘆薈苷的方法，解決了蘆薈苷不穩定的難題，適用于蘆薈及蘆薈制劑，可為分析、檢測人士提供一些幫助。

關鍵詞：高效液相色譜法；蘆薈；蘆薈苷

蘆薈為百合科植物庫拉索蘆薈Aloe barbadensis Miller葉的汁液濃縮干燥物，功能與主治為\"瀉下通便，清肝瀉火，殺蟲療疳。用于熱結便秘，驚癇抽搐，小兒疳積；外治癬瘡\"[1]。 有關資料顯示，蘆薈的化學成分有蘆薈多糖、蘆薈苷、蘆薈大黃素苷、異蘆薈大黃素苷等，其中蘆薈苷是主要生物活性成分之一。蘆薈的瀉下作用主要是蒽醌衍生物的作用，尤其是蘆薈大黃素的作用，因這些蒽醌苷在腸道中釋放出大黃素，在腸腔內通過膽汁變成大黃素，刺激腸道，增強腸蠕動功能所致。

經查閱有關資料，蘆薈苷的檢測方法有高效液相色譜法、紫外分光光度法等，《中國藥典》2010年版的檢測方法為高效液相色譜法，但穩定性稍差，參考蘆薈苷的穩定性研究[2]、2種蘆薈中蘆薈苷含量及穩定性研究的相關資料，經實驗研究，本檢測方法穩定性高、可操作性強，希望為業內人士提供更好地幫助。

1 資料與方法

1.1儀器 高效液相色譜儀（UV-200Ⅱ型）；試藥：蘆薈苷對照品（中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110787-200504，供含量測定用），乙腈為色譜純，水為純化水，其它試劑為分析純；供試品：庫拉索蘆薈；色譜條件：C18柱（4.6×250mm，5μm），乙腈-水（25：75）為流動相，檢測波長355nm。

1.2方法

1.2.1對照品溶液的制備 精密稱取蘆薈苷對照品適量，置棕色量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：1000）混合溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

1.2.2供試品溶液的制備 取本品1g，研細，取約0.1g，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：500-2000）混合溶液適量，超聲處理10～20min，加稀鹽酸-甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

1.2.3測定法 分別吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

2 結果

2.1準確度試驗 精密稱取已知含量的樣品（含量為46.02mg·g-1）0.1g，精密加入蘆薈苷對照品甲醇溶液（0.4996mg/ml）7.4、9.2、11ml，按樣品測定項下方法測定，計算回收率，結果回收率為99.97%，RSD為0.71%，表明準確度良好。

2.2重復性試驗 取同一批樣品，精密稱定樣品0.1g，重復進樣6次測定含量，結果平均含量為45.14mg/g，RSD為0.77%，表明本試驗重復性好。

2.3線性 精密吸取不同濃度的蘆薈苷對照品溶液，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，計算回歸方程為y =38798x+239.96，R2=0.9996。表明蘆薈苷在對照品濃度在0.02～0.5mg/ml范圍內呈良好的線性關系。

2.4耐用性

2.4.1供試品溶液穩定性 取同一供試品溶液于0h開始測定，以后間隔一定時間測定1次，表明供試品溶液至少在24h內穩定。

2.4.2提取溶劑對結果的影響 取本品0.1g，置50ml量瓶中，分別加不同濃度稀鹽酸- 甲醇適量，超聲處理15min，加相應溶劑至刻度、搖勻、濾過、測定，見表3。根據試驗結果，選取稀鹽酸-甲醇（1：1000）作為提取溶劑。

2.4.3 超聲時間對結果的影響 取本品0.1g，置50ml量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：1000）混合溶液適量，超聲處理時間分別為10、15、20min，加混合溶液定容至刻度，濾過，測定，含量分別為22.0%、23.1%和23%，故選擇超聲時間為15min。

2.5檢測值 供試品庫拉索蘆薈中蘆薈苷（C21H22O9）含量為22.8%。

3 結論

本方法專屬性強，穩定、科學、方便經濟，可很好地控制蘆薈的內在質量，同一蘆薈原料用本方法檢測的檢測值較《中國藥典》2010年版檢測方法高10%以上。同時，本方法也適用于蘆薈制劑。

參考文獻：

[1]岳銀屏，吳強，邢旭. 蘆薈苷的穩定性研究[J]. 食品工業科技，2006，10：85-86+95.

[2]吳洪，蔡和意. 2種蘆薈中蘆薈苷含量及穩定性研究[J]. 安徽農業科學，2012，13：7708-7709.

編輯/哈濤