MCP—1和Visfantin/PBEF在妊高癥患者胎盤中的表達及意義

摘要：目的 檢測單核細胞趨化蛋白（Monocyte chemotactic protein 1 ，MCP-1）和內脂素/前B細胞克隆因子（Visfantin ormer B cell cloning ，Visfantin/PBEF）在妊娠高血壓綜合征產婦和正常產婦胎盤組織中的表達，探討二者在妊娠高血壓綜合征發生發展過程中的意義。方法 收集經臨床診斷證實為妊娠高血壓綜合征產婦及正常產婦的胎盤組織各30例，分娩方式順產、剖宮產均可，采用免疫組化學法檢測標本組織中MCP-1和Visfantin/PBEF倆因子的表達水平。結果 在妊娠高血壓綜合征產婦胎盤組織中MCP-1、Visfantin/PBEF的表達較正常產婦的胎盤組織中MCP-1、Visfantin/PBEF高（P<0.05）；MCP-1、Visfantin/PBEF在妊娠高血壓綜合征產婦胎盤組織中的表達呈明顯正相關（r=0.436，P<0.01）。結論 MCP-1、Visfantin/PBEF在妊娠高血壓綜合征產婦胎盤組織中高表達，且二者的表達水平呈明顯正相關；MCP-1、Visfantin/PBEF表達異常可能與妊娠高血壓綜合征發生發展有關。

關鍵詞： MCP-1；Visfantin/PBEF；妊娠高血壓綜合征

妊娠高血壓綜合征是妊娠20w左右母體合并的一組以高血壓、蛋白尿為主要臨床表現的疾病，簡稱妊高癥，該病在產科發病率較高，是妊娠期嚴重危害母兒生命的一個特發疾病，是產婦死亡的第二大原因[1]。其發病機制至今尚未闡明，MCP-1和Visfantin/PBEF作為肥胖、高血壓、心血管疾病、動脈硬化、糖尿病、自身免疫性疾病及代謝綜合征等方面的熱點，在妊高癥的發病方面也收到了廣泛的關注。但目前國內外有關于上述二因子在妊高癥產婦血清或胎盤中的相關性表達研究甚少，為了進一步研究MCP-1和Visfantin/PBEF在妊高癥發病機制中的作用，本研究應用免疫組織化學方法檢測了正常胎盤組織和妊娠期高血壓疾病胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF的表達情況，探討了這兩種蛋白與妊娠期高血壓疾病的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集正常產婦胎盤組織（30例）為對照組、妊高癥產婦胎盤組織（30例）為研究組，順產、剖腹產均可，其中妊高癥組患者在分娩前均經過降壓以及硫酸鎂治療，均為輕中度子癇前期，未發生子癇抽搐。兩組孕婦年齡、孕周、孕次、身高、體重比較，差異無統計學意義。

1.2標本采集 選分娩30min內的新鮮胎盤組織取正中1cm見方大小的胎盤組織，注意避開出血、梗死及鈣化區生理鹽水漂洗3次后，置10%中性福爾馬林溶液中固定24～48h，常規石蠟包埋，連續組織切片成5μm厚，進行免疫組織化學染色。

1.3主要試劑 兔抗人MCP-1多克隆抗體，鼠抗人Visfantin/PBEF單克隆抗體，即用型鏈酶親和素-生物素-過氧化酶復合物免疫組化試劑盒，DAB顯色試劑盒。

1.4結果判斷 MCP-1和Visfantin/PBEF陽性表達以胎盤絨毛上皮細胞及間質細胞的細胞核被染呈棕黃色或棕褐色為陽性細胞，無著色為陰性細胞，染色強度評分標準：不著色0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。每張切片隨機觀察10個高倍視野，計數細胞總數和陽性細胞數。陽性細胞百分率評分標準：陽性細胞數<10%為0分，10%～40%為1分，40%～70%為2分，>70%為3分。兩項評分相加作為該切片的最終評分，0～1分記為（-），2分記為（+），3～4分記為（++），5～6分記為（+++）。

1.5統計方法 統計結果分析應用SPSS17.0軟件對所有數據進行統計分析，等級資料用秩和檢驗檢驗進行比較。MCP-1和Visfantin/PBEF之間的相關性分析采用Spearman相關分析。

2 結果

2.1 MCP-1在胎盤組織中表達的免疫組化結果及陽性率 MCP-1蛋白的陽性染色主要定位于胎盤絨毛細胞核和細胞漿內，免疫組化結果顯示出棕黃色顆粒。MCP-1在妊高癥患者胎盤絨毛組織的陽性表達高于正常妊娠產婦，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 Visfantin/PBEF在胎盤組織中表達的免疫組化結果及陽性率 Visfantin/PBEF在妊高癥患者胎盤絨毛組織的陽性表達高于正常妊娠產婦，差異均有統計學意義（P<0.01），見表2。

2.3妊娠期高血壓胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF表達的相關性 采用Spearman相關分析對30例妊高癥產婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin /PBEF的表達進行相關分析，經統計學處理，MCP-1和Visfantin/PBEF相關系數rs=0.436（P<0.05），說明妊娠期高血壓胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF表達呈正相關，且有統計學意義，見表3。

3 討論

妊娠高血壓綜合征在產科領域發病率高，在沒有任何臨床干預治療的情況下，該病的最終轉歸為子癇，引起產婦抽搐，昏迷，全身臟器損害，衰竭，乃至產婦生命受到威脅死亡，也可引起胎兒的損害和死亡。妊高癥患者的全身小動脈的硬化，MCP-1在動脈硬化的發病過程中起到了很重要的誘導作用，李雪梅等通過實驗研究指出在原發性高血壓患者的血清中MCP-1蛋白表達的水平明顯高于正常對照組，且隨著血壓的增高MCP-1有增高的趨勢。同時還指出原發性高血壓患者的頸總動脈內膜中膜的厚度與MCP-1在血清中的表達水平呈現正相關關系，從而推斷動脈硬化的發生發展過程中MCP-1起到了很重要的誘導作用。目前，國內外大量的臨床研究均已證實MCP-1蛋白無論是在妊高癥產婦的血清中，還是胎盤組織中的表達水平都明顯的高于正常妊娠產婦，說明了MCP-1因子在妊高癥的致病過程中起到了不容忽視的作用。

妊娠高血壓綜合征的病理生理學特征與代謝綜合征有許多相似的病理生理特征，包括胰島素抵抗，動脈粥樣硬化，炎癥反應。張高峰等通過體外培養細胞進行的實驗得出如下結論：Visfantin/PBEF能夠增加巨噬細胞中TF因子和PAI-1的表達水平，證明Visfantin/PBEF可以促進巨噬細胞向血栓轉化，可能導致了血管粥樣硬化斑塊的發生。這一結果與MCP-1因子在妊高癥中導致胎盤螺旋小動脈硬化而促進了妊高癥的發病過程遙相呼應。

綜上所述，本研究通過免疫組化法檢測了妊娠期高血壓產婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白的表達情況，并探討了其在妊娠期高血壓發生發展中的作用。結果顯示妊娠期高血壓產婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白高表達，MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白在妊娠期高血壓產婦胎盤組織中的表達水平呈正相關，提示了MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白可能存在相互協同致病的可能，但其具體的作用機制仍有待于進一步的研究闡明。

參考文獻：

[1]樂杰.婦產科學[M].第6版.北京：人民衛生出版社，2005：97.

[2]李雪梅，石惠榮.原發性高血壓患者血清單核細胞趨化蛋白1水平與頸總動脈內膜中膜厚度的關系[J].中國動脈硬化雜志，2011，07：606-608.

[3]張高峰，許澎.內脂素促進巨噬細胞向致血栓表形轉化[J].中國分子心臟病學雜志，2010，10（6）：356-359.

編輯/哈濤