支原體感染實(shí)驗(yàn)室藥敏結(jié)果分析

摘要：目的 對泌尿生殖道支原體感染的藥敏結(jié)果加以分析，監(jiān)測其耐藥性的變遷。方法 采用支原體培養(yǎng)、藥敏一體化試劑盒，對非淋病性尿道（宮頸）炎（NGU）患者進(jìn)行支原體分離、培養(yǎng)、鑒定及藥物敏感試驗(yàn)。現(xiàn)對500例非淋病性尿道（宮頸）炎（NGU）進(jìn)行支原體分離、培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果 支原體陽性192例，陽性率38%，其中解脲支原體（UU）139例，占總陽性率的72.4%；人型支原體（Mh）11例占總陽性率的5.7%；混合感染42例，占總陽性率的21.9%[1]。藥敏分析結(jié)果顯示：強(qiáng)力霉素，美滿霉素，交沙霉素大多趨于敏感，而環(huán)丙沙星，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，螺旋霉素，壯觀霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥率較高。結(jié)論 強(qiáng)力霉素，美滿霉素，交沙霉素可作為治療泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素。

關(guān)鍵詞：泌尿生殖道；支原體感染；鑒定；藥物敏感性試驗(yàn)

1資料與方法

1.1一般資料 臨床資料來自本院2011年6月～2013年7月男科及婦科門診就診，擬診為NGU的患者500例，均有初診泌尿生殖道炎癥。男177例，女323例。年齡18～56歲。標(biāo)本為男性尿道分泌物，前列腺液，精液和女性宮頸分泌物，全部檢測支原體和藥物敏感測定。

1.2標(biāo)本采集男性 用無菌棉拭子取尿道內(nèi)口2～2.5 cm處分泌物，前列腺按摩液，精液，中段尿需取尿10 mL，經(jīng)2000 r/min離心10 min，取尿沉渣接鐘；女性：擴(kuò)陰器擴(kuò)陰后，用無菌棉拭子取宮頸管內(nèi)口1～2 cm處的單層柱狀上皮細(xì)胞，取樣拭子不可碰陰道壁，也可用羊水培養(yǎng)，陽性培養(yǎng)液（普通支原體培養(yǎng)基獲得）用無菌吸嘴吸取30～50 ul。

1.3試劑 所用的支原體分離培養(yǎng)，鑒定及藥物敏感試驗(yàn)配套試劑來自珠海銀科醫(yī)學(xué)工程有限公司提供的。

1.4實(shí)驗(yàn)原理 標(biāo)本的處理及培養(yǎng)，鑒定，藥物敏感分析均按照珠海市銀科醫(yī)學(xué)工程有限公司提供的試劑盒支原體鑒定，半定量計(jì)數(shù)及藥敏試驗(yàn)于一體。試劑盒由液體藥敏培養(yǎng)基和藥敏測試板組成。培養(yǎng)基中含有蛋白胨、酵母提取物、血清、生長因子等營養(yǎng)物，并加有尿素、精氨酸被分解生成的堿性物質(zhì)引起pH值上升，培養(yǎng)基由黃色變成紅色。培養(yǎng)基內(nèi)加有抑菌劑，可抑制泌尿生殖道中細(xì)菌和真菌的生長。

1.5實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1空白對照取出測試板，用無菌吸嘴吸取100 UL培養(yǎng)液加入A1-空白對照孔。

1.5.2接種標(biāo)本將標(biāo)本棉簽伸入小瓶，靠近液面上方的瓶壁擠壓棉簽，使標(biāo)本滲入，丟棄棉簽，或直接加入30～50 uL的陽性培養(yǎng)液。標(biāo)本加入后充份搖勻使之混合。

1.5.3加樣至測試板吸取100 uL含菌培養(yǎng)液加入其余的微孔中。

1.5.4礦物油封蓋所有微孔滴加1～2滴試劑盒所附的礦物油。（注意：一定要使礦物油覆蓋液面，否則培養(yǎng)液蒸發(fā)，結(jié)果不準(zhǔn)）

1.5.5培養(yǎng)將測試板加蓋后置培養(yǎng)箱中，35℃～37℃培養(yǎng)24～48 h，觀察結(jié)果。

1.6試驗(yàn)結(jié)果判定

1.6.1培養(yǎng)基與分離孔均不變色者為陰性。

1.6.2培養(yǎng)基由黃變紅，且透明清亮，試劑條上的分離鑒定孔變紅，有UU和（或）MH生長，分離計(jì)數(shù)≥104 CCU/ML和≤104 CCU/ML兩種情況。

1.6.3藥敏結(jié)果的判定 藥敏孔變紅，說明有UU和（或）MH，若低濃度和高濃度孔均不變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素敏感；若低濃度和高濃度孔均變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素耐藥；若僅有低濃度孔變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素中敏。

2結(jié)果

2.1支原體分離培養(yǎng)檢測結(jié)果500例支原體陽性192例中，UU感染139例占72.4%（139/192）；Mh感染11例占5.7%（11/192）；混合感染42例占21.9%（42/192）。

2.2 500例支原體對12種抗生素的體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果如下：環(huán)丙沙星的耐藥率高達(dá)82.8%，左旋氧氟77.1%螺旋霉素77.1%，壯觀霉素67.2%，氧氟沙星64.1%，羅紅霉素48.4%，阿齊霉素47.9%，司帕沙星44.8%，克拉霉素41.2%。。UU和Mh對環(huán)丙沙星，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，螺旋霉素，壯觀霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥率較高；對強(qiáng)力霉素，美滿霉素，交沙霉素的敏感性較高，應(yīng)作為目前治療泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素[3]。

3討論

3.1支原體是介于病毒和細(xì)菌之間的最小原核微生物，是一類能獨(dú)立生活，最簡單的，最小的原核細(xì)胞微生物[2]。

3.2支原體侵犯人體的黏膜細(xì)胞，黏附在宿主細(xì)胞表面，破壞宿主細(xì)胞膜，損傷宿主細(xì)胞，造成炎癥性改變。

3.3 NGU是臨床上常見的性傳播疾病之一。NGU的病原體主要是支原體，引起生殖道感染的主要是解脲支原體（Uu）和人型支原體（Mh）。一般女性生殖道感染后可引起陰道炎，宮頸炎，子宮內(nèi)膜炎，輸卵管炎及不育癥等。本文實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，在500例由支原體感染的非淋菌性泌尿生殖道炎的患者中，Uu感染最為多見，其次為Uu和Mh的混合感染，Mh感染最少。

3.4對于支原體的耐藥性實(shí)驗(yàn)，本文使用珠海銀科醫(yī)學(xué)工程有限公司生產(chǎn)的試劑盒，它采用了敏感析點(diǎn)--高低藥敏濃度測定的新設(shè)計(jì)。與此同時(shí)，這種試劑盒將分離培養(yǎng)，鑒定及藥敏試驗(yàn)同步進(jìn)行，實(shí)現(xiàn)了快速化，標(biāo)準(zhǔn)化，準(zhǔn)確化。

3.5支原體感染的治療，隨著抗生素的應(yīng)用，耐藥菌株明顯增加。因此，本地區(qū)NGU患病率的上升、耐藥菌株的增多以及多種藥物重復(fù)耐藥現(xiàn)象與抗生素的使用有一定關(guān)系。耐藥菌株不斷增多的原因可能由以下兩方面造成：①由于以往一般條件的實(shí)驗(yàn)室難以完成支原體的培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，臨床治療支原體感染多為經(jīng)驗(yàn)用藥，濫用廣譜抗生素雖然有一定的療效，但效果不夠理想，易造成耐藥菌株產(chǎn)生。②有些患者由于各種原因不到醫(yī)院就診，自購抗生素服用，雖然癥狀有所緩解，但治療不徹底，盲目反復(fù)服藥形成惡性循環(huán)，加速耐藥株的產(chǎn)生。因此，為了減少支原體耐藥菌株的發(fā)生，控制經(jīng)驗(yàn)用藥及抗生素的濫用是關(guān)鍵，①要搞好宣傳教育工作，避免患者盲目自行用藥；②臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇用藥，正確指導(dǎo)患者進(jìn)行治療。

3.6對192株支原體的體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果分析可見UU和MH對環(huán)丙沙星，螺旋霉素，壯觀霉素，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥性與以前相比都明顯增加。因此支原體對這些藥物的耐藥性已不容忽視。試驗(yàn)結(jié)果同樣表明，交沙霉素、美滿霉素和強(qiáng)力霉素是治療UU、MH和MH+UU的有效藥物。此外，強(qiáng)力霉素（或美滿霉素）與克林霉素聯(lián)合用藥療效肯定，這一點(diǎn)已經(jīng)得到臨床證實(shí)，原因尚需進(jìn)一步研究探討。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉長德，張艷，余成源，等.支原體培養(yǎng)假陽性結(jié)果原加分析[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29（3）：214.

[2]倪語星，尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：303-312.

[3]涂斌，羅少鋒，劉素玲，等.泌尿生殖道支原體感染現(xiàn)狀及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，（6）.編輯/張燕